Your browser doesn't support javascript.
loading
ATIVIDADE ANTI-HELMÍNTICA IN VITRO DE NANOEMULSÕES DE CARVONA SOBRE Haemonchus contortus
Thesis em Pt | VETTESES | ID: vtt-222007
Biblioteca responsável: BR68.1
RESUMO
A resistência anti-helmíntica tem dificultado o controle de nematoides gastrintestinais em pequenos ruminantes. Dessa forma, novas alternativas de controle estão sendo estudadas, como o nanoencapsulamento de compostos bioativos, na tentativa de maximizar a eficácia parasitária desses compostos. Este trabalho teve como objetivo avaliar a atividade ovicida, larvicida e adulticida de nanoemulsões de carvona produzida por diferentes métodos de homogeneização sobre Haemonchus contortus. Três nanoemulsões de R-carvona foram preparadas usando dois equipamentos de homogeneização (ultra homogeneizador e sonicador) e com e sem revestimento de alginato de sódio nanoemulsões de R-carvona sem revestimento homogeneizada em sonicador (NSR-son) e homogeneizadas em ultra homogeneizador (NSR- ultra) e R-carvona com revestimento de alginato de sódio (NCR-ultra). Foi realizada a análise de estabilidade, eficiência de encapsulamento e caracterizações físico-químicas das nanoemulsões. Os efeitos das nanoemulsões foi avaliado sobre H. contortus multirresistente no teste de eclosão de ovos (TEO), teste de desenvolvimento larvar (TDL) e teste de motilidade em adultos (TMA). As alterações na cutícula induzidas em H. contortus adultos foram avaliadas por meio da microscopia eletrônica de varredura (MEV) e microscopia confocal de varredura a laser. Os resultados foram submetidos à análise de variância (ANOVA) e comparados pelo teste Tukey (P<0,05). A concentração efetiva para inibir 50% da eclosão dos ovos e do desenvolvimento larvar (CE50) foi calculada no programa SPSS 17.0. NSR-ultra e NCR-ultra, foram mais estáveis frente à sedimentação e cremeação, respectivamente. Os tamanhos de partículas foram de 281,1 nm (NSR-son), 152,7 nm (NSR-ultra) e 557,8 nm (NCR-ultra) e os potenciais zeta de -15 mV (NSR-son), -10,8 mV (NSR-ultra) e -24,2 mV (NCR-ultra). A eficiência de encapsulamento foi de 99,84±0,01%. A microscopia eletrônica de varredura nas nanoemulsões detectou aumento no tamanho, distribuição não uniforme das partículas e presença de estruturas esféricas agregadas a rede polimérica. No TEO, as CE50 de NSR-son, NSR-ultra e NCR-ultra foram de 0,19 mg/mL, 0,02 mg/mL e 0,17 mg/mL, respectivamente. No TDL foram de 0,29 mg/mL, 0,31 mg/mL e 0,95 mg/mL para NSR-son, NSR-ultra e NCR- ultra, respectivamente. A inibição da motilidade de adultos foi de 100%, após 12h de exposição a NSR-ultra e NCR-ultra, enquanto que para NSR-son foi de 79,16%. A microscopia confocal e de varredura detectaram alterações na cápsula bucal e danos cuticulares. Conclui-se que as nanoemulsões de R-carvona com e sem revestimento de alginato de sódio produzidas por diferentes métodos de homogeneização causaram alterações morfológicas e inibiram a eclosão dos ovos, o desenvolvimento larvar e a motilidade de H. contortus adulto, sendo promissoras para controle de infecções por nematoides gastrintestinais em pequenos ruminantes após avaliações futuras no que se refere à segurança toxicológica desses produtos assim como a comprovação da eficácia anti-helmíntica in vivo.
ABSTRACT
Anthelmintic resistance has made it difficult to control gastrointestinal nematodes in small ruminants. Thus, new control alternatives are being studied, such as the nanoencapsulation of bioactive compounds, in an attempt to maximize the parasitic efficacy of these compounds. This work aimed to evaluate the ovicidal, larvicidal and adulticidal activity of carvone nanoemulsions produced by different homogenization methods on Haemonchus contortus. Three R-carvone nanoemulsions were prepared using two homogenization equipment (ultra homogenizer and sonicator) and with and without sodium alginate coating uncoated R-carvone nanoemulsions homogenized in sonicator (UNAlg-son) and homogenized in ultra homogenizer (UNAlg-ultra) and sodium alginate coated R-carvone (CNAlg-ultra). Stability analysis, encapsulation efficiency and physicochemical characterizations of the nanoemulsions were performed. The of the nanoemulsions were evaluated on multidrug resistant H. contortus in the egg hatch test (EHT), larval development test (LDT) and adult worm motility test (AWMT). Changes in cuticle induced in adult H. contortus were evaluated by means of scanning electron microscopy (SEM) and confocal laser scanning microscopy. The results were submitted to analysis of variance (ANOVA) and compared using the Tukey test (P<0.05). The effective concentration to inhibit 50% of egg hatching and larval development (EC50) was calculated using the SPSS 17.0 program. UNAlg-ultra and CNAlg-ultra were more stable against sedimentation and creamation, respectively. The particle sizes were 281.1 nm (UNAlg-son), 152.7 nm (UNAlg-ultra) and 557.8 nm (CNAlg-ultra) and the zeta potentials were -15 mV (UNAlg-son), - 10.8 mV (NSR-ultra) and -24.2 mV (CNAlg-ultra). The encapsulation efficiency was 99.84±0.01%. Scanning electron microscopy of the nanoemulsions detected an increase in size, non-uniform distribution of particles and presence of spherical structures aggregated to the polymeric network. In EHT, the EC50 of UNAlg-son, UNAlg-ultra and CNAlg-ultra were 0.19 mg/mL, 0.02 mg/mL and 0.17 mg/mL, respectively. In LDT they were 0.29 mg/mL, 0.31 mg/mL and 0.95 mg/mL for UNAlg- son, UNAlg-ultra and CNAlg-ultra, respectively. The adult motility inhibition was 100% after 12h of exposure to UNAlg-ultra and CNAlg-ultra, while for UNAlg-son it was 79.16%. Confocal and scanning microscopy detected changes in the buccal capsule and cuticular damage. It is concluded that R-carvone nanoemulsions with and without sodium alginate coating produced by different homogenization methods caused morphological changes and inhibited egg hatching, larval development and adult motility of H. contortus, being promising for control of infections by gastrointestinal nematodes in small ruminants after further evaluations regarding the toxicological safety of these products as well as proof of anthelmintic efficacy in vivo.
Palavras-chave
Texto completo: 1 Base de dados: VETTESES Idioma: Pt Ano de publicação: 2021 Tipo de documento: Thesis
Texto completo: 1 Base de dados: VETTESES Idioma: Pt Ano de publicação: 2021 Tipo de documento: Thesis