Acurácia diagnóstica e viabilidade de ácidos nucléicos em tumores mamários caninos usando fixação coagulante e processamento histológico rápido em micro-ondas doméstico

RESUMO

Neoplasias mamárias são relativamente comuns em cães. O diagnóstico dessa enfermidade se dá por meio da histopatologia usando o formol como fixação padrão. Métodos alternativos existem, porém são pouco empregados, como é o caso da fixação coagulante e do processamento em micro-ondas domésticos. O presente trabalho teve como objetivo avaliar acurácia diagnóstica de fragmentos fixados com fixador coagulante e processadas em micro-ondas doméstico, bem como avaliar se esse material é viável para biologia molecular. Os tumores mamários foram clivados em duas partes e uma pequena parte foi criopreservada. Foi determinada a acurácia diagnóstica no exame histopatológico do fragmento processado em micro-ondas. Além disso, todas as amostras foram extraídas o DNA para amplificação do gene GAPDH e em seguida realizada a eletroforese. A acurácia diagnóstica obtida foi de 66,6% e o amostras parafinadas de todos os fragmentos fixados em fixador coagulante e processados em micro-ondas foram positivos para o gene GAPDH na eletroforese. Os resultados demonstraram que a técnica de processamento rápido em forno micro-ondas doméstico empregando a fixação coagulante é uma alternativa viável para diagnóstico de neoplasias mamária de cães em curto prazo. Os blocos parafinados serviram como ótimas fontes de extração de DNA para biologia molecular.

ABSTRACT

Breast neoplasms are relatively common in dogs. The diagnosis of this disease is made through histopathology using formalin as standard fixation. Alternative methods exist, but they are little used, as is the case of coagulant fixation and domestic microwave processing. This study aimed to evaluate the diagnostic accuracy of fragments fixed with coagulant fixative and processed in domestic microwaves, as well as to evaluate whether this material is viable for molecular biology. Breast tumors were cleaved into two parts and a small part was cryopreserved. The diagnostic accuracy was determined in the histopathological examination of the microwave-processed fragment. In addition, all samples were extracted from DNA for amplification of the GAPDH gene and then electrophoresed. The diagnostic accuracy obtained was 66.6% and the paraffin samples of all fragments fixed in coagulant fixative and processed in microwave were positive for the GAPDH gene in electrophoresis. The results showed that the rapid processing technique in a domestic microwave oven using coagulant fixation is a viable alternative for short-term diagnosis of breast cancer in dogs. The paraffin blocks served as excellent sources of DNA extraction for molecular biology.