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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-222077

Resumo

A produção in vitro de embriões bovinos apresenta papel de destaque dentre as biotecnologias reprodutivas, tendo em vista sua vasta contribuição para o melhoramento genético dos rebanhos, uma vez que possibilita a seleção tanto de machos quanto de fêmeas. Apesar da técnica ser praticada em escala comercial, ainda existem algumas limitações, como a baixa taxa de eclosão de blastocisto, produção de embriões com pouca tolerância à criopreservação, e consequente, taxa de prenhez reduzida, resultante de entraves inerentes ao processo de produção, a exemplo, o estresse oxidativo. Assim, várias pesquisas vêm sendo desenvolvidas para avaliar o efeito da adição de antioxidantes aos meios in vitro, com intuito de reduzir os danos causados pelo estresse oxidativo. Nesse sentido, o objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito antioxidante do sulforafano na produção in vitro de embriões bovinos. Para isso, foram coletados ovários de abatedouros para obtenção de oócitos viáveis, os quais foram selecionados e postos em maturação por 24 horas em incubadora com atmosfera controlada. Posteriormente, os oócitos maturados foram fertilizados e incubados por nove horas. Passado esse período, foi adicionado 5 M de Sulforafano no terço final da etapa de fertilização in vitro (últimas três horas). Em seguida, realizou-se o cultivo dos prováveis zigotos e foi avaliado o desenvolvimento embrionário nas fases de clivagem, mórula, blastocisto e eclosão dos embriões. Os dados obtidos no experimento foram analisados pelo teste de Qui-quadrado, a 5% de significância. Avaliando a produção embrionária, observou-se diferença estatística entre os grupos Controle e SFN, quando as taxas de clivagem (81,6 % vs 74,5 %), mórula (52,7 % vs 48,6 %) e blastocisto (23,4 % vs 19,6 %) foram comparadas, respectivamente. Para a taxa de eclosão (14,0 % vs 11,3 %) não foi verificada diferença significativa entre os grupos, respectivamente. Evidenciou-se que a adição de Sulforafano no estágio final da fertilização in vitro não foi capaz de promover melhora significativa nas taxas de produção embrionária para a espécie bovina, sendo necessários mais estudos que busquem melhor elucidar os efeitos desse antioxidante em sistemas de cultivo in vitro de células embrionárias.

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The in vitro production of bovine embryos has a prominent role among reproductive biotechnologies, in view of its vast contribution to the genetic improvement of herds, as it enables the selection of both males and females. Although the technique is practiced on a commercial scale, there are still some limitations, such as the low blastocyst hatch rate, production of embryos with little tolerance to cryopreservation, and consequent reduced pregnancy rate, resulting from barriers inherent in the production process, the example, oxidative stress. Thus, several studies have been developed to evaluate the effect of adding antioxidants to in vitro media, with the aim of reducing the damage caused by oxidative stress. In this sense, the objective of this work was to evaluate the antioxidant effect of Sulforaphane on the in vitro production of bovine embryos. For this purpose, ovaries from slaughterhouses were collected to obtain viable oocytes, which were selected and matured for 24 hours in an incubator with a controlled atmosphere. Afterwards, the matured oocytes were fertilized and incubated for nine hours. After this period, 5 M of Sulforaphane was added in the final third of the in vitro fertilization step (last three hours). Afterwards, the probable zygotes were cultured and the embryonic development was evaluated in the cleavage, morula, blastocyst and hatching stages of the embryos. The data obtained in the experiment were analyzed by the Chi-square test, at 5% significance. Assessing embryo production, there was a statistical difference between the Control and SFN groups, when the rates of cleavage (81.6% vs 74.5%), morula (52.7% vs 48.6%) and blastocyst (23 .4% vs 19.6 %) were compared, respectively. For the hatching rate (14.0% vs 11.3%) there was no significant difference between groups, respectively. It was evidenced that the addition of Sulforaphane in the final stage of in vitro fertilization was not able to promote a significant improvement in embryo production rates for the bovine species, and further studies are needed to better elucidate the effects of this antioxidant in in vitro culture systems of embryonic cells.

Biblioteca responsável: BR68.1