Avaliação microbiológica de rações secas irradiadas e autoclavadas oferecidas ad libitum para camundongos da linhagem C57BL/6

RESUMO

A qualidade da ração peletizada disponível para animais de laboratório está ligada diretamente a condição sanitária destes biomodelos. Apesar disso, poucos são os trabalhos publicados que abordam o seu controle microbiológico. Mesmo havendo esterilização prévia das rações que serão utilizadas nos comedouros, estas entram em contato com os animais, com o ambiente e são manuseadas pela equipe técnica durante a manutenção dos animais. Além disso, sua estocagem pode ser inadequada, o que pode levar a uma contaminação e possíveis problemas na qualidade deste alimento. A partir destas possíveis vias de contaminação, este trabalho teve como objetivo verificar a qualidade microbiológica de rações irradiadas e autoclavadas e avaliar por quanto tempo elas mantêm esta qualidade higiênicosanitária. Para atingir esse objetivo foi realizada a pesquisa de micro-organismos indicadores, durante o período de manutenção da ração nas gaiolas dos camundongos e foi verificado se os comedouros e a cavidade oral dos animais apresentaram as mesmas bactérias detectadas nas rações. Antes de iniciar as análises das rações, foram realizados dois ensaios com o corante alimentício líquido, o primeiro para verificar a inocuidade do corante frente a bactérias e o segundo para verificar se a ração marcada era palatável e se não haveria preferência ou repulsa dos animais por determinada cor. No resultado do primeiro ensaio foi constatado que o corante não interferia no crescimento bacteriano enquanto que o no segundo ensaio observou-se que a ração marcada continuava palatável e não houve preferência ou repulsa dos animais por determinada cor. A partir dos resultados destes ensaios, iniciou-se o experimento que foi realizado com quatro grupos de camundongos da linhagem C57BL/6 (10 machos e 10 fêmeas) para cada ração (autoclavada e irradiada), com cinco animais em cada gaiola. As rações foram marcadas para possibilitar a diferenciação entre as rações oferecidas inicialmente e as subsequentes, permitindo comparar a sua qualidade/tempo de exposição. Esse procedimento mimetizou o procedimento padrão de acrescentar novos pellets semanalmente nos comedouros por cima dos pellets antigos, permitindo estimar o tempo em que a ração ficou no comedouro sem ocorrência de contaminação. Após as análises microbiológicas das rações os resultados obtidos foram ausência de Salmonella spp. e a contagem de micro-organismos mesófilos totais, bolores, leveduras, coliformes totais e termotolerantes bem abaixo dos limites máximos estabelecidos na literatura. Mostrando assim que, após todo o período de exposição, as rações mantêm boa qualidade higiênico-sanitária. Em contrapartida, nos comedouros e na análise da microbiota da cavidade oral dos animais não foi identificado nenhum micro-organismo utilizado como indicador para qualidade das rações, mas foram isoladas algumas bactérias potencialmente patogênicas como Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Acinetobacter baumanni complex, Enterobacter cloacae e Klebsiella pneumoniae demonstrando que apesar de não haver ração contaminada, de alguma forma houve quebra de barreira sanitária, portanto todos os procedimentos dessa área devem ser revistos, pra verificar onde está havendo falha

ABSTRACT

The quality of the pelleted feed available for laboratory animals is directly linked to the health condition of these biomodels. Despite this, there are few published works that address its microbiological control. Even with previous sterilization of the feeds that will be used in the feeders, they come into contact with the animals, with the environment and are handled by the technical team during the maintenance of the animals. In addition, its storage may be inadequate, which can lead to contamination and possible problems in the quality of these foods. Based on these possible contamination routes, this study aimed to verify the microbiological quality of irradiated and autoclaved rations and to define how long they lose their hygienicsanitary quality. In order to achieve this objective, the research of indicator microorganisms was carried out during the maintenance period of the feed in the mice cages and it was verified whether the feeders and the oral cavity of the animals showed the same bacteria detected in the feed. Before starting the analysis of the rations, two tests were carried out with liquid food coloring, the first to check the innocuousness of the dye against bacteria and the second to check if the marked diet was palatable and if there would be no preference or repulsion of the animals for a certain color. In the result of the first test it was found that the dye did not interfere with bacterial growth whereas in the second test it was observed that the marked diet was still palatable and there was no preference or repulsion of the animals for a certain color. In the result of the first test it was found that the dye did not interfere with bacterial growth, whereas in the second test it was observed that the marked diet was still palatable and there was no preference or repulsion of the animals for a certain color. From the results of these tests, the experiment was started with four groups of C57BL / 6 mice (10 males and 10 females) for each diet (autoclaved and irradiated), with five animals in each cage. The diets were marked to allow the differentiation between the diets offered initially and the subsequent ones, allowing to compare their quality / exposure time. This procedure mimicked the standard procedure of adding new pellets weekly in the feeders on top of the old pellets, allowing to estimate the time the feed was in the feeder without contamination. After the microbiological analyzes of the diets, the results obtained were absence of Salmonella spp. and counting of total mesophilic microorganisms, molds, yeasts, total coliforms and thermotolerants well below the maximum limits established in the literature. Thus, showing that, after the entire period of exposure, it maintains good hygienic-sanitary quality. In contrast, in the feeders and in the analysis of the microbiota of the oral cavity of the animals, no microorganisms used as an indicator for the quality of the rations were identified, but some pathogenic bacteria were isolated, such as Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Acinetobacter baumanni complex, Enterobacter cloacae and Klebsiella pneumoniae demonstrating that although there is no contaminated feed, somehow there was a break in the sanitary barrier, so all procedures in this area should be reviewed, to see where there is a failure.