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Análise da microbiota cultivável associada com uma colônia laboratorial de Ctenocephalides felis felis (Siphonaptera, Pulicidae)

TATIANA WERNECK FRANCO.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-222358

Resumo

A pulga (Ctenocephalides felis) é o principal ectoparasita de cães e gatos em todo o mundo, atuando como vetor de patógenos zoonóticos, incluindo Rickettsia felis e espécies de Bartonella. A diversidade de micróbios associados ao hospedeiro e suas interações dentro de seus hospedeiros, incluindo artrópodes, são fundamentais para as funções ecológicas nessas comunidades e podem contribuir para a evolução do hospedeiro. Além disso, as interações simbióticas podem influenciar as transmissões de patógenos zoonóticos, através de efeitos sobre a competência vetorial. O conhecimento da microbiota de vetores tem sido utilizado para desenvolver novas abordagens de controle com base no conceito de manipulação da microbiota. Uma componente chave nessa estratégia é a presença de uma microbiota estável/ core. O presente estudo caracterizou a estabilidade, durante sete anos, da microbiota cultivável de uma colônia de laboratório de C. felis. As bactérias associadas aos diferentes estágios da vida foram isoladas por cultura em placas de ágar nutriente. As bactérias foram identificadas, ao nível de gênero ou espécie, por amplificação por reação em cadeia da polimerase (PCR) de um fragmento de 500 pares de bases (pb) do gene que codifica o RNA ribossômico 16S procariótico, seguido de sequenciamento de nucleotídeos. As culturas foram caracterizadas quanto à suscetibilidade a sete compostos antimicrobianos (ampicilina, cloranfenicol, cloreto de mercúrio, nitrofurantoína, oxitetraciclina, rifampicina e estreptomicina), utilizando um método de microdiluição. Cada uma das diferentes etapas da vida apresentou uma microbiota única, no entanto, um componente central de todas as amostras era membro do gênero Staphylococcus, com alguns demonstrando fenótipos resistentes a múltiplos antimicrobianos. As espécies mais prevalentes foram S. saprophyticus, S. nepalensis, S. lentus e S. cohnii, as quais foram relatadas previamente como patógenos oportunistas com potencial zoonótico. A presença constante da mesma espécie de Staphylococcus, em múltiplos estágios da vida, sugere que estas bacterias são componentes essenciais da microbiota e por implicação da biologia das pulgas. Pesquisas futuras examinarão os efeitos da manipulação do microbioma core como o primeiro passo no desenvolvimento de novas estratégias para o controle de infestações.
The flea (Ctenocephalides felis) is the principal ectoparasite of dogs and cats worldwide acting as a vector of zoonotic pathogens including Rickettsia felis and Bartonella. The diversity of host associated microbes and their interactions within their hosts, including arthropods, are fundamental to the ecological functions within those communities and may contribute to host evolution. Moreover, symbiotic interactions may influence the transmissions of zoonotic pathogens, via effects upon vectoral competence. Knowledge of the microbiota of vectors has been used to develop novel approaches for control based on the concept of microbiota manipulation. A key component in this strategy is the presence of a stable/core microbiota. The present study characterized the stability, over seven years, of the cultivable microbiota of a laboratory colony of C. felis. Bacteria associated with different life stages were isolated by culture on plates of nutrient agar. Bacteria were identified, to the genus or species level, by polymerase chain reaction (PCR) amplification of a 500 base pair (bp) fragment of the gene encoding prokaryotic 16S ribosomal RNA, followed by nucleotide sequencing. Cultures were characterized for susceptibility to seven antimicrobial compounds (ampicillin, chloramphenicol, mercury chloride, nitrofurantoin, oxytetracycline, rifampicin and streptomycin), using a microdilution method. Each of the different life stages presented a unique microbiota, however a core component of all samples were members of the genus Staphylococcus, with some demonstrating multiple-drug resistant phenotypes. The most prevalent species were S. saprophyticus, S. nepalensis, S. lentus and S. cohnii all of which, have been reported as opportunistic pathogens with zoonotic potential. The constant presence of the same species of Staphylococcus, in multiple life stages, suggests they are essential components of the microbiota and by implication of the biology of the fleas. Future research will examine the effects of manipulating the core microbiome as the first step in the development of novel strategies for infestation control.
Biblioteca responsável: BR68.1