Portal de Pesquisa da BVS Veterinária

Jaboticabal; s.n; 05/02/2007. 64 p.

Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-2866

Resumo

A presente pesquisa foi desenvolvida com o objetivo de avaliar os prováveis efeitos do fator de crescimento semelhante à insulina I (IGF-I) sobre a maturação in vitro (MIV), nuclear e citoplasmática, de oócitos caninos retirados de ovários de cadelas. Os complexos cumulus oócitos (COCs) foram maturados in vitro em meio SOF (?synthetic oviductal fluid?). Foram utilizadas 40 cadelas submetidas ovario-histerectomias para esterilização cirúrgica ou para o tratamento de piometra. As doadoras foram classificadas em grupos conforme raça, faixa etária, condição reprodutiva e fase do ciclo estral. Os COCs (n=1474) foram liberados dos folículos pela técnica de fatiamento dos ovarios e maturados por 72 horas, exceto o grupo M0 (momento zero). O meio de cultivo base, foi o SOF, suplementado ou não com o IGF-I. Foram selecionados apenas COCs classificados como grau 1 para a MIV. Os COCs foram distribuidos em três grupos:: M0 (processados no mesmo dia da colheita da mesma forma que os demais), C (SOF) and E (SOF + IGF-I). Após o período de incubação ou no dia da colheita (M0) os oócitos foram corados para avaliação da maturação nuclear com bis-benzimida (Hoechst 33342) e para a maturação citoplasmática com Lens culinaris. O percentual de COCs/doadora de todas fêmeas foi 35,21% para as fêmeas sem raça definida; 39,69% para adultas (>10 meses); 39,83% para multíparas, e 39,20% para aquelas fêmes em diestro (P<0.05). O percentual de oócitos degenerados foi muito alto tanto na soma total (74.0%) quanto entre os grupos experimentais (M0=59.43; C=75.44; E=80.52%), sendo as diferenças estatisticamente signifcativas (P<0.05). Na maturação nuclear apenas 3,02% de todos os oócitos submetidos a esta avaliação atingiram o estádio de MI (M0=2,83%; C= 4,19%, e E=2,10). Da mesma forma que a retomada meiótica as taxas de maturação citoplasmática foram muito baixas,...

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This study was performed to identify the possible effects of insulin-like growth factor-i (IGF-I) on in vitro maturation (IVM) evaluated by nuclear and cytoplasmic of bitch cumulus oocyte complexes (COCs) matured in vitro in synthetic oviductal fluid (SOF) medium. For this purpose ovaries were collected from 40 bitches undergoing ovariohysterectomy for neutering or due to pyometra. The donors females were classified into groups based on breed, age, reproductive status and stage of the estrous cycle. The COCs (n=1474) were released from the follicles by slicing the ovaries and matured in vitro for 72 hours in the base culture medium SOF supplemented or no with IGF-I. Only grade 1 COCs were used for IVM, and were divided into three groups: M0 (zero collection time), C (SOF) and E (SOF + IGF-I). After incubation period, the maturation of the nucleus was examined by staining the oocytes with Hoechst 33342 and the cytoplasmic maturation by means of Lens culinaris agglutinin. The M0 group also was examined to cytoplasmic and nuclear maturation with the same staining dyes. From all females donors were collected 35.21, 39.69, 39.83 and 39.2% COCs per bitch were collected from mongrel, adult (>10 months), multiparous, and diestrus females, respectively (P<0.05). The percentage of degenerated oocytes was very high in the total sum (74.0%) and amongst experimental groups (M0=59.43; C=75.44; E=80.52%) with significant statistical differences (P<0.05) between them. And from all groups only 3.02% oocytes reached MI (M0= 2.83; C=4.19; E=2.10%). Alike nuclear meiotic resumption the cytoplasmic maturation rates were low, 15.83% in the total and 12.90 (M0); 25.58 (C); E (8.69%)

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