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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-707

Resumo

Brucella abortus é considerada o principal agente etiológico da brucelose bovina, uma zoonose que provoca grandes perdas econômicas em todo o mundo. O objetivo desse estudo foi determinar o perfil diferencial de expressão proteica de células trofoblásticas bovinas nas fases iniciais da infecção por B. abortus. Foi usado o modelo de explantes confeccionados a partir de membrana cório-alantóidea de fetos no último trimestre de gestação infectados por suspensão de B. abortus 2308 (1.0 x 108 bactérias - MOI 1:1000). No estudo da cinética da infecção foram avaliados os tempos de 0,5, 2, 4 e 8 h pós-infecção no qual foi obtida reprodutibilidade alta entre triplicatas dos géis comparados (Match > 84%; IC > 0,77). O perfil de expressão de proteínas foi similar entre os tempos avaliados (Match > 75%). Os tempos de 0,5 e 4 h pósinfecção apresentaram as maiores diferenças qualitativas entre os géis e foram escolhidos para análise diferencial em gel (DIGE). Nessa análise não foram identificados spots com diferenças quantitativas significativas entre os géis comparados. Por outro lado, 103 spots presentes apenas em um grupo experimental foram selecionados para identificação por espectrometria de massa. As proteínas BLVRA, LGALS7, RPLP1, SCAMP2, TOLLIP, GALM, AHCY, PSAPL1/PSAP, OAT, C1QBP, NDUFS8, PRCII, RAB11A, CALM1, MDH1, PRDX3, ABHD14B, KRT14, KRT7, HMGB1, HEXB, AKR1B1, PDIA3 e TPM4 foram identificadas apenas nos extratos proteicos de células trofoblásticas infectadas. As proteínas identificadas nesse estudo servirão como alvos para novas pesquisas relacionadas à interação patógeno-hospedeiro na infecção por B. abortus

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Brucella abortus is considered the main etiological agent of bovine brucellosis, a zoonotic disease that causes great economic losses worldwide. The aim of this study was to determine the differential profile of proteins expression of bovine trophoblast cells in the early stages of infection by B. abortus. Was used the explants model prepared from chorio-alantóidea of fetuses in the last trimester of pregnancy infected by suspending the B. abortus 2308 containing 1.0 x 108 bacteria (MOI 1:1000). In the study of the kinetics of infection was evaluated the times of 0.5, 2, 4 and 8 h post infection with B. abortus. Was obtained high reproducibility between triplicate of gels compared (Match> 84%; CI > 0.77) and the proteins expression profile was similar among the times evaluated (Match > 75%). Times of 0.5 and 4 h post infection showed the highest qualitative differences between the gels and were used for the differential in gel electrophoresis (DIGE). In this analysis have not been identified spots with significant quantitative differences between the compared gels. Moreover, 103 spots are present only in an experimental group were selected for identification by mass spectrometry. The proteins BLVRA, LGALS7, RPLP1, SCAMP2, TOLLIP, GALM, AHCY, PSAPL1/PSAP, OAT, C1QBP, NDUFS8, PRCII, RAB11A, CALM1, MDH1, PRDX3, ABHD14B, KRT14, KRT7, HMGB1, HEXB, AKR1B1, PDIA3 and TPM4 were identified only in protein extracts of trophoblastic cells infected by B. abortus. The proteins identified in this study will serve as targets for further research related to host-pathogen interaction in infection by B. abortus

Biblioteca responsável: BR68.1