Identificação de mycobacterium bovis emturculosis por PCR

RESUMO

Tuberculose bovina é uma doença infecciosa causada por Mycobacterium bovis, pertencentes ao complexo Mycobacterium tuberculosis (MTB). Este grupo de bactérias é de grande importância em saúde pública e animal. O diagnóstico e a diferenciação dos membros do MTB por técnicas convencionais de microbiologia são caras e demoradas. O presente estudo teve como objetivo analisar os marcadores moleculares para diagnóstico de M. bovis e desenvolver duas reações em cadeia pela polimerase (PCR) em tempo real para o diagnóstico de M. bovis e M. tuberculosis em amostras de suspensão bacteriana. Os iniciadores e as regiões descritas na literatura como específico para M. bovis revelaram-se ineficazes para o diagnóstico específico. A região de diferença (DR4) foi eficiente (0,8843) e específica (0,9404) para o diagnóstico de bacilos bovina em uma PCR convencional. Para a PCR em tempo real para M. Bovis foi escolhido o gene PE-PGRS 20, que codifica uma proteína da família do PE-PGRS. A PCR em tempo real mostrou uma eficiência de 90,969% e um limite de detecção de 0,16 ng de DNA/ul. Para o bacilo humano, a PCR em tempo real foi concebida para a detecção do gene Rv1510, com a especificidade diagnóstica de 0,9120 e de 0,9655 de eficiência. A PCR em tempo real padronizada pode ser utilizado em um grande número de amostras e com testes de robustez, repetibilidade e reprodutibilidade demonstrando alta concordância entre os resultados, tornando-se ensaios exelentes para o diagnóstico da tuberculose humana e bovina