Estudo da oogênese e foliculogênese na fase antral em primatas neotropicais da espécie Cebus apella: aspectos bioquímicos e estruturais
Domingues, Sheyla Farhayldes Souza.
Tese
em Português
| VETTESES
| ID: vtt-7539
Resumo
A espécie Cebus apella (macaco-prego) é um importante modelo experimental para a pesquisa biomédica. Existem poucos trabalhos visando o desenvolvimento de biotécnicas de reprodução em fêmeas desta espécie e especificamente sobre a maturação oocitária. O presente trabalho visou descrever o número de oócitos obtidos pela punção folicular nos dias 05, 07 e 09 do ciclo menstrual em fêmeas adultas de C. apella (n=06), perfil protéico de oócitos e células do cumulus obtidos a partir da punção de folículos antrais pequenos (2 mm), médios (2mm > e < 4 mm) e grandes (> 4 mm) e descrever as dimensões uterinas e ovarianas, a dinâmica folicular, a ovulação, e o fluxo sanguíneo nas artérias uterinas e do ligamento útero-ovariano (LOU), por meio da ultra-sonografia com Doppler colorido e Doppler-fluxometria (HDI 4000; Philips Medical Systems) durante a fase folicular de fêmeas de C. apella. Oócitos obtidos na punção folicular foram classificados em desnudos ou intactos. Os oócitos intactos foram desnudos mecanicamente em PBS para separação das células do cumulus. Em seguida, oócitos e células do cumulus foram lavados separadamente em solução salina (NaCl, 0,15%), lisados em SDS (dodecil sulfato de sódio) a 15% e analisados em SDS-PAGE (5-15%). Uma média (M + EP) de 2,0 + 0,5; 1,7 + 0,2 e 2,2 + 0,7 oócitos por animal nos dias 05, 07 e 09 do ciclo, respectivamente. A média do diâmetro dos oócitos foi de 136,6 + 10,2 ?m. No dia 05, houve um predomínio de proteínas oocitárias de alto peso molecular, enquanto que nos dias 07 e 09 predominou proteínas de baixo peso molecular. A expressão de proteínas pelas células do cumulus modificou-se de acordo com o dia e qualidade do CCO. Na ultra-sonografia, os diâmetros longitudinal (DL), dorsoventral (DDV) e transversal (DT), e o volume (V) uterino foram 1,77+0,03; 1,21+0,4 e 1,37+0,04 cm, e 1,55+0,10 ml e dos ovários foram de 1,35+0,04; 0,82+0,2 e 0,77+0,02 cm, e 0,47+0,04 ml, respectivamente. A ovulação ocorreu no dia 9,3 + 0,5, sendo que 86,0% destas ocorreram no ovário direito. O diâmetro e o volume médio do folículo dominante no dia da ovulação foram 9,6 + 0,4 mm e 0,54 + 0,07 ml. O IR e IP médios das artérias uterinas e do LOU foram de 0,86 + 0,03; 2,19 + 0,11 e 1,11 + 0,15, 1,39+ 0,15. Demonstramos que é possível obter CCO de C. apella, por meio da punção folicular com o uso da laparotomia nos dias 05, 07 e 09 do ciclo, bem como as diferenças no perfil protéico de oócitos e células do cumulus de acordo com o dia do ciclo, qualidade do CCO e tamanho do folículo antral. Foi possível acompanhar o crescimento do diâmetro e volume do folículo dominante a partir do dia 03 do ciclo. A média do IR e IP das artérias uterina e do LUO laterais ao ovário dominante sofreram modificações no período periovulatório. Os presentes dados poderão ser de grande importância na escolha de fêmeas de Cebus apella em programas de reprodução assistida
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BR68.1