Brucella sp. como bioagente da bursite cervical em bovinos abatidos no Município de São Luís, Maranhão: uma abordagem sorológica, imunohistoquímica, microbiológica e molecular

RESUMO

GALVÃO, N. R. Brucella sp. como bioagente da bursite cervical em bovinos abatidos no Município de São Luís, Maranhão uma abordagem sorológica, imunohistoquímica, microbiológica e molecular. [Brucella sp. like a bioagent of cervical bursitis in cattle slaughtered in São Luís, Maranhão a serological approach, immunohistochemistry, and molecular microbiological]. 2012. 82f. Dissertação (Mestrado em Ciência Animal) Universidade Estadual do Maranhão, São Luís, 2012. RESUMO A brucelose é uma antropozoonose de evolução preferencialmente crônica, caracterizada pela infecção do sistema fagocítico mononuclear, por bactérias do gênero Brucella. Considerando a hipótese do abate de animais infectados e o seu risco potencial ao homem, a presente pesquisa buscou avaliar a Brucella sp. como bioagente da bursite cervical em bovinos abatidos no Município de São Luís, Maranhão. Foram coletadas amostras de sangue, com e sem E.D.T.A (ácido etilenodiamino tetra-acético), fragmentos de bolsa cervical e linfonodos correspondentes de 47 bovinos abatidos em frigoríficos sob Inspeção Municipal, que apresentaram bursite cervical postmortem. A partir deste material coletado estimou-se a freqüência do bioagente Brucella sp. nas diferentes abordagens diagnósticas sorologia, histopatologia, imunohistoquímica e PCR. Na sorologia de animais acima de 24 meses, 85,1% das amostras foram reagentes ao teste do AAT, confirmando-se a positividade em 78,7% através dos testes de soroaglutinação lenta e 2-mercaptoetanol. Na histopatologia foi possível observar que a maioria das amostras de bolsa cervical e linfonodos apresentaram infiltrado inflamatório linfohistioplasmocitário, mais comumente associado ao quadro crônico da doença. Todas as amostras de sangue total coletadas foram submetidas a PCR convencional, não sendo verificada a amplificação de produto de DNA compatível com Brucella sp. As 47 amostras coletadas foram submetidas ao isolamento bacteriano, sendo, posteriormente, efetuada a PCR a partir de tecidos (bolsa cervical e linfonodos correspondentes). Nesta PCR, evidenciou-se que 63,8% das amostras apresentaram um amplificado de 223pb, condizentes com o gênero Brucella sp. As amostras nas quais foram confirmadas o gênero Brucella, foram submetidas ao PCR multiplex AMOS ENHANCED, objetivando verificar quais espécies desta bactéria estavam presentes nas amostras analisadas, constatou-se que em 28,0% foram identificadas duas bandas de 498 e 178pb, correspondentes ao biovar 1, 2, 4; em 30,0% das amostras foi identificada somente uma banda de 178pb, correspondente ao biovar 3, 5, 6, 9; 6,0% das amostras foram negativas na PCR multiplex e em 36,0% não houve isolamento de colônias, demonstrando padrões diferenciados entre os amplificados. Os resultados obtidos com a conclusão deste estudo puderam fornecer subsídios para futuras publicações científicas, além de contribuir com dados para o entendimento epidemiológico, isolamento e caracterização das espécies de Brucella sp., que acometem o rebanho bovino maranhense. Palavras-chave Brucella sp.; Brucelose bovina; Bursite cervical