Portal de Pesquisa da BVS Veterinária

Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-7821

Resumo

A produção in vitro de embriões suínos tem alcançado altos índices de embriões polispérmicos, os quais atingem o estádio de blastocisto, porém têm qualidade inferior quando comparado aos monospérmicos, apresentado menor massa celular interna, o que pode ser a causa do atraso ou mesmo da paralisação do desenvolvimento embrionário in vitro em suínos. Este trabalho teve como objetivo avaliar os índices de zigotos monospérmicos, observando os efeitos de três tempos de fecundação (2, 4 e 6 horas) e espermatozóides capacitados previamente ou simultaneamente à fecundação in vitro com 2mM de cafeína ou dois tempos de maturação oocitária (36 ou 44 horas) e ativação oocitária com cálcio ionóforo (0 ou 50?M) durante 4 horas de fecundação in vitro. Foram utilizados oócitos de fêmeas suínas pré-púberes maturados no meio TCM 199 enriquecido com 10 UI de hCG, 10 UI de eCG, 50 UI de eGF e 90?L de pFF nas primeiras 20 horas e sem hormônios nas 22 horas subseqüentes. Para a fecundação in vitro foi utilizado o meio m TBM. Os presumíveis zigotos foram cultivados no meio NCSU 23 acrescido de 4 mg/ml de BSA por 12 horas. Na classificação das estruturas em oócitos não fecundados e zigotos monospérmicos ou polispérmicos foi empregado o Hoechst 33342 para visualização dos pró-núcleos. Os índices de oócitos não fecundados foram de 58,9; 38,6 e 30,1%, de zigotos monospérmicos de 23,3; 40,3 e 41,6% e de zigotos polispérmicos de 17,8; 21,1 e 28,3% para o sêmen capacitado previamente, respectivamente, nos tempos 2, 4 e 6 horas. Para o sêmen capacitado simultaneamente, os índices de oócitos não fecundados foram de 51,6; 49,4 e 41,3%, os de zigotos monospérmicos de 23,6; 30,5 e 32.6% e de zigotos polispérmicos de 24,8; 20,0 e 26,1%, respectivamente, nos tempos de 2, 4 e 6 horas. Para o tempo de 36 de maturação com 0 ou 50?M de CaA, as médias dos quadrados mínimos e desvios padrão, para os oócitos não fecundados foram, respectivamente, de 31,5 ? 7,3 e 43,5 ? 2,5 e para zigotos monospérmicos de 39,1 ? 4,3 e 29,7 ? 4,9 e para zigotos polispérmicos de 32,3 ? 10,7 e 38,6 ? 9,4. Para os oócitos maturados por 44 horas com 0?M e 50?M de CaA, as médias dos quadrados mínimos e desvios padrão para os oócitos não fecundados foram, respectivamente, de 21,7 ? 2,5 e 43,1 ? 2,5 e para zigotos monospérmicos de 20,0 ? 3,9 e 47,4 ? 7,2 e para zigotos polispérmicos de 17,1 ? 5,1 e 30,8 ? 7,0. Concluiu-se que os índices de zigotos monospérmicos foram melhores nos tempos de 4 e 6 horas de fecundação in vitro e que não houve influência da capacitação espermática prévia ou simultânea, assim como do tempo de maturação oocitária, sendo maior às 36 e às 44 horas, respectivamente, na ausência e presença de cálcio ionóforo

Biblioteca responsável: BR68.1