Serological evidence of exposition to Toxoplasma gondii in Saimiri spp. kept in a research institution as biomodels in Rio de Janeiro.

Anti-Toxoplasma gondii antibodies were investigated in 125 Saimiri spp. kept at a research institute. A total of 12% of primates tested positive, all of which were Saimiri sciureus. These results highlight the need to minimize the possibility of this protozoan's circulation, which can lead to fulminant infection in these animals.

Comparison of immunological and molecular methods for laboratory diagnosis of ocular toxoplasmosis in blood, serum and tears in Brazil.

Ocular toxoplasmosis (OT) is caused by protozoan T. gondii. Ophthalmological examination is considered the gold standard for OT diagnosis, and laboratory tests are used for diagnostic confirmation. However, these tests can present different results, which change depending on their basis, on sample type and on patients' clinical alteration. Thus, the aim of the present study is to assess immunodiagnostic and molecular techniques applied in blood, serum and tear fluid to diagnose T. gondii infection in patients seen at an Ophthalmology Clinic. In total, 160 patients were included in the study, 40 of them had OT with active lesions (G1); 40 had OT with healed lesions (G2), 40 had non-toxoplasmic uveitis (G3) and 40 had no ocular alterations (G4). Serum samples were subjected to Immunoenzymatic Assay (ELISA) and to Indirect Immunofluorescence Reaction (IFAT) to search for anti-T. gondii IgM and IgG. Tear fluid samples were analyzed through ELISA for IgA research. All blood and tear fluid samples were subjected to conventional polymerase chain reaction (cPCR) and in a Nested PCR model for T. gondii DNA amplification with targets B1, GRA7 and REP 529. IgG and IgM anti-T. gondii was detected in serum samples from 106 and 15 patients, respectively, when combining ELISA and IFAT results. Anti-T.gondii IgA antibodies were detected in 9.2% of the tear material. Nested PCR with GRA7 target showed higher positivity in blood samples (24.4%); Nested PCR with B1 target showed a higher frequency of positivity in tears (15%). Biological samples of patients with active lesions showed the highest positivity frequencies in all immunodiagnostic assays, as well as in most PCR models. The present results highlighted the need of associating techniques with different fundamentals to confirm OT diagnosis. Furthermore, further tear fluid analyses should be performed to validate this biological material as lesser invasive alternative for the more accurate OT diagnosis.

Humane Endpoints in Swiss Webster Mice Infected with Toxoplasma gondii RH Strain.

The highly virulent Toxoplasma gondii RH strain is maintained through successive passages in mice, but there is still a lack of studies that refine these procedures from a 3Rs perspective, where humanitarian ideals aim to minimize the stress, pain, or suffering of the animals used in the research without the loss of results. The aim of this study was to establish humane endpoints in Swiss Webster mice inoculated with the T. gondii RH strain. A total of 52 mice were infected with 5 × 106 tachyzoites/mL and monitored for periods of up to 5 days. The parameters body weight; hair condition; higher than normal body temperature; hypothermia; respiratory function; pain; soft stools or diarrhea; bloody diarrhea; tense, nervous, or in distress during handling; and ascites were recorded daily in score tables. The results showed that prominent piloerection, respiratory function, pain parameters, and ascites are important clinical signs to be used as a cut-off point for implementing euthanasia. The application of this refinement method helped to avoid animal suffering and pain without compromising the number of parasites recovered. We therefore suggest adopting these parameters in research protocols that require the maintenance of the T. gondii RH strain in murine models to avoid and reduce animal suffering.

Occurrence of Toxoplasma gondii and other gastrointestinal parasites in free-roaming cats from the Rio de Janeiro zoo.

This communication aimed to determine the frequency of infection by T. gondii and other gastrointestinal parasites in free-living cats captured in BioParque do Rio (Fundação RioZoo), Brazil. To this end, 58 blood and 51 fecal samples were collected from 68 cats from July 2019 to September 2020. The serum obtained was analyzed by indirect fluorescent antibody test for anti-T. gondii IgG. Fecal samples were examined by microscopic parasitological techniques. Of the total, 10.3% of the animals presented anti-T. gondii IgG. Parasitic structures were observed in 39.2% of the fecal samples. Hookworms were the most detected parasites (19.6%) followed by Cystoisospora sp. (11.7%), Dipylidium caninum (7.8%) and Toxocara cati (3.9%). These results indicated the exposure of this population of stray cats to potentially zoonotic parasites, which in addition to causing possible damage to domestic and wild animal health, also pose risks to public health.

Esta comunicação teve como objetivo determinar a frequência de infecção por T. gondii e outros parasitas gastrointestinais em gatos de vida livre capturados no BioParque do Rio (Fundação RioZoo), Brasil. Para isso, foram coletadas 58 amostras de sangue e 51 amostras fecais de 68 gatos capturados entre julho de 2019 e setembro de 2020. O soro obtido foi submetido à reação de imunofluorescência indireta para IgG anti-T. gondii. As amostras fecais foram submetidas a técnicas parasitológicas microscópicas. Do total, 10,3% dos animais apresentaram IgG anti-T. gondii. Estruturas parasitárias foram observadas em 39,2% das amostras fecais. Os ancilostomídeos foram os parasitas mais detectados (19,6%), seguidos por Cystoisospora sp. (11,7%), Dipylidium caninum (7,8%) e Toxocara cati (3,9%). Esses resultados indicaram a exposição dessa população de gatos de rua a parasitas potencialmente zoonóticos, que, além de causar possíveis danos à saúde dos animais domésticos e selvagens, também representam riscos à saúde pública.

Lessons from a Multilaboratorial Task Force for Diagnosis of a Fatal Toxoplasmosis Outbreak in Captive Primates in Brazil.

Toxoplasmosis is an important zoonotic disease caused by the parasite Toxoplasma gondii and is especially fatal for neotropical primates. In Brazil, the Ministry of Health is responsible for national epizootic surveillance, but some diseases are still neglected. Here, we present an integrated investigation of an outbreak that occurred during the first year of the COVID-19 pandemic among eleven neotropical primates housed at a primatology center in Brazil. After presenting non-specific clinical signs, all animals died within four days. A wide range of pathogens were evaluated, and we successfully identified T. gondii as the causative agent within four days after necropsies. The liver was the most affected organ, presenting hemorrhage and hepatocellular necrosis. Tachyzoites and bradyzoite cysts were observed in histological examinations and immunohistochemistry in different organs; in addition, parasitic DNA was detected through PCR in blood samples from all specimens evaluated. A high prevalence of Escherichia coli was also observed, indicating sepsis. This case highlights some of the obstacles faced by the current Brazilian surveillance system. A diagnosis was obtained through the integrated action of researchers since investigation for toxoplasmosis is currently absent in national guidelines. An interdisciplinary investigation could be a possible model for future epizootic investigations in animals.

Toxoplasma gondii infection in pig intended for human consumption: seroprevalence, risk factors and influence of biosecurity measures / Infecção por Toxoplasma gondii em suínos destinados ao consumo humano: soroprevalência, fatores de risco e influência de medidas de biosseguridade

Abstract A serologic and epidemiologic study was carried out in order to determinate herd and animal seroprevalence and associated factors for Toxoplasma gondii in commercial pigs from Espírito Santo state, Brazil. Blood samples were collected from 416 pigs from 55 producer farms in 27 municipalities. An indirect immunofluorescent assay (IFA) was performed to estimate the seroprevalence of T. gondii and identify the associated risk factors using a questionnaire. The T. gondii antibody prevalence rate in commercial swine herds was 15.4% (64/416) using a cutoff of 1:64. The seropositivity for T. gondii was related to the presence of cats, water origin and age of swine in the increase of seroprevalence, and the existence of internal isolation fences and use of composting chambers as protective factors. To the best of our knowledge, this is the first study to report anti- T. gondii antibodies in the serum of pigs in the state of Espírito Santo, Brazil. This finding is important to public health because seropositive pigs can harbor tissue cysts in their meat, thereby representing a zoonotic risk for consumers of raw or undercooked porcine meat or its products.

Resumo Um estudo sorológico e epidemiológico foi realizado com o objetivo de determinar a soroprevalência nas granjas e animais e também em fatores associados para Toxoplasma gondii em suínos comerciais do estado do Espírito Santo, Brasil. Foram coletadas amostras de sangue de 416 suínos de 55 granjas produtoras de 27 municípios. A reação de imunofluorescência indireta (RIFI) foi realizada com o uso de questionário, para estimar a soroprevalência do T. gondii e identificar os fatores de risco associados. A taxa de prevalência de anticorpos contra T. gondii, nos rebanhos comerciais de suínos, foi de 15,4% (64/416) com ponto de corte de 1:64. A soropositividade para T. gondii foi relacionada à presença de gatos, origem da água, a idade dos suínos no aumento da soroprevalência, a existência de cercas de isolamento interno e uso de câmaras de compostagem como fatores de proteção. De acordo com este estudo, ele é o primeiro a relatar anticorpos anti-T. gondii no soro de suínos no estado do Espírito Santo, Brasil. Este achado é importante para a saúde pública, pois suínos soropositivos podem abrigar cistos teciduais em suas carnes, representando um risco zoonótico para os consumidores de carne suína crua ou mal cozida ou seus produtos.

Socioeconomic profile, animal care, sanitary practices, and knowledge about parasites among owners of domestic dogs and cats treated in Rio de Janeiro city / Perfil socioeconômico, cuidados com animais, práticas sanitárias e conhecimento sobre parasitoses entre proprietários de cães e gatos domésticos atendidos na cidade do Rio de Janeiro

As populações urbanas de cães e gatos estão em expansão, o que pode facilitar a transmissão de parasitas zoonóticos. Nesse sentido, é necessário conhecer o perfil dos donos de cães e gatos e suas percepções sobre zoonoses para construir estratégias preventivas em uma abordagem em Saúde Única. Este estudo teve como objetivo comparar o perfil dos donos de cães e gatos atendidos no Centro de Medicina Veterinária Jorge Vaitsman, Rio de Janeiro, Brasil. Entre agosto de 2017 e novembro de 2018, proprietários de cães e gatos atendidos na rotina da clínica médica responderam a um questionário estruturado composto por questões fechadas relacionadas ao seu perfil socioeconômico, hábitos de higiene, cuidados com os animais e conhecimento sobre parasitas. A análise comparativa dos dados obtidos de proprietários de cães e gatos foi realizada por meio do Teste Exato de Fischer ou Qui-quadrado de Pearson. No total, 350 indivíduos responderam ao questionário, sendo 244 donos de cães e 106 donos de gatos. A análise comparativa do perfil socioeconômico, cuidados com os animais, práticas sanitárias e conhecimento sobre parasitos não mostrou diferenças entre proprietários de cães e gatos (p≥0,05). As práticas de vacinação e desparasitação dos animais foram significativamente mais frequentes entre os donos de cães do que entre os donos de gatos (p≤0,05). De maneira geral, foi possível evidenciar entre as respostas recuperadas um desconhecimento sobre zoonoses parasitárias. Os resultados obtidos evidenciam a necessidade de mediação e divulgação de informações sobre agentes parasitários potencialmente zoonóticos para os proprietários, destacando os veterinários, no papel de mediadores das medidas de prevenção primária contra esses agentes.

Toxoplasma gondii among captive wild mammals in zoos in Brazil and Cuba: seroprevalence and associated risk factors

Toxoplasma gondii é um parasito zoonótico de distribuição mundial que pode infectar várias espécies de animais homeotérmicos. Poucos estudos avaliaram a exposição de animais silvestres em cativeiro ao T. gondii. Este estudo envolveu uma pesquisa sorológica de anticorpos anti-T. gondii em mamíferos mantidos no Zoológico Nacional de Cuba (PZN) e no Zoológico do Rio de Janeiro (RIOZOO) no Brasil. O estudo consistiu em um total de 231 amostras de soro de mamíferos, sendo 108 do PZN e 123 do RIOZOO. Todas as amostras foram submetidas à pesquisa de IgG anti-T. gondii pelos métodos de ELISA de inibição (PZN) e teste de aglutinação modificado (RIOZOO). Anticorpos de T. gondii foram detectados em 85,2% das amostras do PZN e 32,5% das amostras do RIOZOO. No PZN, Perissodactyla (92,3%) foi a ordem com maior taxa de prevalência sorológica, enquanto no RIOZOO a ordem Primatas (46,7%) se destacou (p <0,05). Além dessa associação, a origem dos animais PZN também foi associada à infecção por T. gondii. Esse achado demonstra a necessidade de monitoramento veterinário constante de mamíferos silvestres em cativeiro, a fim de vincular o diagnóstico sorológico a alterações clínicas indicativas de toxoplasmose.-

Toxoplasma gondii among captive wild mammals in zoos in Brazil and Cuba: seroprevalence and associated risk factors / Toxoplasma gondii entre mamíferos silvestres cativos em zoológicos no Brasil e em Cuba: soroprevalência e fatores de risco associados

Abstract Toxoplasma gondii is a zoonotic parasite of worldwide distribution that can infect several species of homeothermic animals. Few studies have evaluated the exposure of captive wild animals to T. gondii. This study involved a serological survey of anti-T. gondii antibodies in mammals kept in Cuba's National Zoo (PZN) and in the Rio de Janeiro Zoo (RIOZOO) in Brazil. The study consisted of a total of 231 serum samples from mammals, 108 from PZN and 123 from RIOZOO. All the samples were subjected to IgG anti-T. gondii testing by means of the inhibition ELISA method and the modified agglutination test, respectively. T. gondii antibodies were detected in 85.2% samples from PZN and 32.5% samples from RIOZOO. At the PZN, Perissodactyla (92.3%) was the order with the highest serological prevalence rate, whereas at the RIOZOO, the order Primates (46.7%) stood out (p<0.05). In addition to this association, the origin of the PZN animals was also associated with T. gondii infection. This finding demonstrates the need for constant veterinary monitoring of captive wild mammals in order to link the serological diagnosis with clinical alterations indicative of toxoplasmosis.

Resumo Toxoplasma gondii é um parasito zoonótico de distribuição mundial que pode infectar várias espécies de animais homeotérmicos. Poucos estudos avaliaram a exposição de animais silvestres em cativeiro ao T. gondii. Este estudo envolveu uma pesquisa sorológica de anticorpos anti-T. gondii em mamíferos mantidos no Zoológico Nacional de Cuba (PZN) e no Zoológico do Rio de Janeiro (RIOZOO) no Brasil. O estudo consistiu em um total de 231 amostras de soro de mamíferos, sendo 108 do PZN e 123 do RIOZOO. Todas as amostras foram submetidas à pesquisa de IgG anti-T. gondii pelos métodos de ELISA de inibição (PZN) e teste de aglutinação modificado (RIOZOO). Anticorpos de T. gondii foram detectados em 85,2% das amostras do PZN e 32,5% das amostras do RIOZOO. No PZN, Perissodactyla (92,3%) foi a ordem com maior taxa de prevalência sorológica, enquanto no RIOZOO a ordem Primatas (46,7%) se destacou (p <0,05). Além dessa associação, a origem dos animais PZN também foi associada à infecção por T. gondii. Esse achado demonstra a necessidade de monitoramento veterinário constante de mamíferos silvestres em cativeiro, a fim de vincular o diagnóstico sorológico a alterações clínicas indicativas de toxoplasmose.

Estudo das infecções por Toxoplasma gondii e parasitos gastrointestinais em cães e gatos domésticos no município do Rio de Janeiro

As populações urbanas de animais de companhia vêm crescendo nos últimos anos e consequentemente a relação homem-animal torna-se cada vez mais próxima, trazendo consigo benefícios e possíveis malefícios. As zoonoses parasitárias consistem num grave problema de saúde pública onde cães e gatos domésticos configuram como os principais veiculadores destas parasitoses no meio urbano. Uma variedade de protozoários e helmintos gastrointestinais desses animais são capazes de infectar o ser humano acidentalmente. Dentre os parasitos gastrointestinais dos felinos, destaca-se o Toxoplasma gondii, protozoário globalmente distribuído e capaz de infectar aves e mamíferos, incluindo o ser humano. Estes podem contaminar o ambiente por meio de suas fezes contendo oocistos do protozoário. Os cães, além de se infectar por meio do ambiente contaminado, podem carrear mecanicamente oocistos do protozoário por meio da coprofagia. Tendo por base o exposto, o presente estudo teve como objetivo a pesquisa de anticorpos anti- T.gondii e de parasitos gastrointestinais em cães e gatos domésticos atendidos no Instituto Municipal de Medicina Veterinária Jorge Vaitsman, Rio de Janeiro, bem como os fatores de risco associados à estas infecções. Para tanto, foram incluídos 614 animais (400 cães e 214 gatos) encaminhados para a coleta de sangue no período de agosto de 2017 a novembro de 2018 e que os tutores aceitaram em participar do estudo. Após assinatura do termo de consentimento livre e esclarecido foram coletadas amostras de sangue e fezes para a realização das técnicas laboratoriais Paralelamente, os tutores responderam um questionário epidemiológico, composto por determinadas variáveis com o objetivo de detectar possíveis fontes de infecção para esses animais. As amostras de fezes de cães e gatos foram submetidas às técnicas de centrífugo-sedimentação em tubo cônico, centrífugo-flutuação em solução de sacarose e coloração de safranina aquecida. Já as amostras de soro de cães e gatos foram destinadas à pesquisa de anticorpos IgG anti- T. gondii por meio da reação de imunofluorescência indireta. Anticorpos contra T. gondii foram detectados em 34,00% dos cães e em 7,01% dos gatos. A frequências de parasitoses gastrointestinais em cães e gatos foram de 11,25% e 24,52%, respectivamente, sendo os ancilostomídeos os parasitos mais frequentes em cães (8,25%) e Dipylidium caninum o mais frequente em gatos (12,50%). Fatores como fornecimento de vísceras, miúdos crus ou malcozidos e água de toneira e manejo sanitário inadequado foram considerados de risco para as infecções por T. gondii e parasitos gastrointestinais. Medidas de prevenção e controle devem ser adotadas visando minimizar o risco de transmissão desses agentes entre animais e consequentemente humanos.

Estudo das infecções por Toxoplasma gondii e parasitos gastrointestinais em cães e gatos domésticos no município do Rio de Janeiro / Study of Toxoplasma gondii infections and gastrointestinal parasites in dogs and domestic cats in the city of Rio de Janeiro

As populações urbanas de animais de companhia vêm crescendo nos últimos anos e consequentemente a relação homem-animal torna-se cada vez mais próxima, trazendo consigo benefícios e possíveis malefícios. As zoonoses parasitárias consistem num grave problema de saúde pública onde cães e gatos domésticos configuram como os principais veiculadores destas parasitoses no meio urbano. Uma variedade de protozoários e helmintos gastrointestinais desses animais são capazes de infectar o ser humano acidentalmente. Dentre os parasitos gastrointestinais dos felinos, destaca-se o Toxoplasma gondii, protozoário globalmente distribuído e capaz de infectar aves e mamíferos, incluindo o ser humano. Estes podem contaminar o ambiente por meio de suas fezes contendo oocistos do protozoário. Os cães, além de se infectar por meio do ambiente contaminado, podem carrear mecanicamente oocistos do protozoário por meio da coprofagia. Tendo por base o exposto, o presente estudo teve como objetivo a pesquisa de anticorpos anti- T.gondii e de parasitos gastrointestinais em cães e gatos domésticos atendidos no Instituto Municipal de Medicina Veterinária Jorge Vaitsman, Rio de Janeiro, bem como os fatores de risco associados à estas infecções. Para tanto, foram incluídos 614 animais (400 cães e 214 gatos) encaminhados para a coleta de sangue no período de agosto de 2017 a novembro de 2018 e que os tutores aceitaram em participar do estudo. Após assinatura do termo de consentimento livre e esclarecido foram coletadas amostras de sangue e fezes para a realização das técnicas laboratoriais

Paralelamente, os tutores responderam um questionário epidemiológico, composto por determinadas variáveis com o objetivo de detectar possíveis fontes de infecção para esses animais. As amostras de fezes de cães e gatos foram submetidas às técnicas de centrífugo-sedimentação em tubo cônico, centrífugo-flutuação em solução de sacarose e coloração de safranina aquecida. Já as amostras de soro de cães e gatos foram destinadas à pesquisa de anticorpos IgG anti- T. gondii por meio da reação de imunofluorescência indireta. Anticorpos contra T. gondii foram detectados em 34,00 por cento dos cães e em 7,01 por cento dos gatos. A frequências de parasitoses gastrointestinais em cães e gatos foram de 11,25 por cento e 24,52 por cento, respectivamente, sendo os ancilostomídeos os parasitos mais frequentes em cães (8,25 por cento) e Dipylidium caninum o mais frequente em gatos (12,50 por cento). Fatores como fornecimento de vísceras, miúdos crus ou malcozidos e água de toneira e manejo sanitário inadequado foram considerados de risco para as infecções por T. gondii e parasitos gastrointestinais. Medidas de prevenção e controle devem ser adotadas visando minimizar o risco de transmissão desses agentes entre animais e consequentemente humanos. (AU)