RESUMO
ABSTRACT Introduction: Epstein-Barr virus (EBV) may serve as a target in therapeutic treatments, thus reliable diagnostic results are necessary. Objective: The aim of this study was to evaluate the accuracy of EBV detection by in situ hybridization (ISH) using five commercial probes in formalin-fixed and paraffin-embedded samples of nodular sclerosis Hodgkin's lymphoma (HL), and to compare the results with immunohistochemistry (IHC) and polymerase chain reaction (PCR). Material and method: Thirty samples were selected, 28 were lymph nodes, one bone marrow and one mediastinum. The following parameters were analyzed: signal intensity; proportionality of positive cells; quality of the reaction according to comfort for evaluation, sign quality and homogeneity of labeled cells; background reaction; morphology; presence of artifacts; and positivity in other non-neoplastic cells. All samples were analyzed for EBV detection using the five probes, IHC for latent membrane protein type 1 (LMP1) and PCR for Epstein Barr virus nuclear antigen 1 (EBNA1). Statistical analyses were performed with the R1 software; Fleiss' test and Cohen Kappa index of 5% were considered significant. Results: The detection by IHC-LMP1 was 26.7% (8/30) and 66.7% (20/30) by PCR-EBNA1. All probes detected EBV. Positivity was observed in 42/90 (46.7%), 38/90 (42.2%), 45/90 (50%), 27/90 (30%) and 61/90 (67.8%) for probes A, B, C, D and E, respectively. Discussion: All five probes demonstrated positivity. Conclusion: Probe E showed better rate (67.8%), sensitivity, specificity and accuracy (100%), a very good correlation among the different observers and with PCR, besides great cost-benefits relation.
RESUMO Introdução: O vírus Epstein-Barr (EBV) pode servir como alvo nos tratamentos terapêuticos, sendo necessário resultado diagnóstico confiável. Objetivo: Avaliar a acurácia da detecção do EBV pela hibridização in situ (ISH), utilizando cinco sondas comerciais em amostras fixadas em formalina e incluídas em parafina de linfoma de Hodgkin (LH) esclerose nodular, comparando os resultados com a imuno-histoquímica (IHQ) e a reação em cadeia pela polimerase (PCR). Material e método: Trinta amostras foram selecionadas, sendo 28 linfonodos, uma medula óssea e um mediastino. Os seguintes parâmetros foram analisados: intensidade do sinal; proporcionalidade das células positivas; qualidade da reação de acordo com o conforto na avaliação, qualidade do sinal e homogeneidade das células marcadas; reação de fundo; morfologia; presença de artefatos; e positividade em outras células não neoplásicas. Todas as amostras foram analisadas para a detecção do EBV usando as cinco sondas, IHQ para proteína da membrana latente tipo 1 (LMP1) e PCR para antígeno nuclear do EBV (EBNA1). As análises estatísticas foram realizadas com o software R1; os índices de 5% para Kappa de Fleiss e Cohen foram considerados significantes. Resultados: A detecção pela IHQ-LMP1 foi de 26,7% (8/30) e 66,7% (20/30) pela PCR-EBNA1. Todas as sondas detectaram EBV. A positividade foi observada em 42/90 (46,7%), 38/90 (42,2%), 45/90 (50%), 27/90 (30%) e 61/90 (67,8%) para as sondas A, B, C, D e E, respectivamente. Discussão: Todas as sondas demonstraram positividade. Conclusão: A sonda E mostrou melhor taxa (67,8%), sensibilidade, especificidade e precisão (100%), boa correlação entre os diferentes observadores e com a PCR, além de ótimo custo/benefício.
Assuntos
VírusRESUMO
Gliomas are the most common type of primary brain tumors. The most aggressive type, Glioblastoma multiforme (GBM), is one of the deadliest human diseases, with an average survival at diagnosis of about 1 year. Previous evidence suggests a link between human cytomegalovirus (HCMV) and gliomas. HCMV has been shown to be present in these tumors and several viral proteins can have oncogenic properties in glioma cells. Here we have investigated the presence of HCMV DNA, RNA and proteins in fifty-two gliomas of different grades of malignancy. The UL83 viral region, the early beta 2.7 RNA and viral protein were detected in 73%, 36% and 57% by qPCR, ISH and IHC, respectively. Positivity of the viral targets and viral load was independent of tumor type or grade suggesting no correlation between viral presence and tumor progression. Our results demonstrate high prevalence of the virus in gliomas from Brazilian patients, contributing to a better understanding of the association between HCMV infection and gliomas worldwide and supporting further investigations of the virus oncomodulatory properties.
Assuntos
Proteínas Virais/genética , Brasil , Humanos , RNA Viral , Imuno-Histoquímica , Hibridização In Situ , Infecções por Citomegalovirus/complicações , Carga Viral , Citomegalovirus/genética , GliomaRESUMO
Introdução: o monitoramento externo de qualidade foi proposto como método capaz de melhorar o desempenho dos laboratórios de citologia da Rede Pública de Saúde por meio da minimização de variação interobservador. Objetivo: avaliar as concordâncias e discordâncias diagnósticas dos exames citopatológicos cervicais no processo de revisão. Métodos: foram revisados 67.954 diagnósticos de amostras cervicais escrutinadas por 140 laboratórios que atendem a pacientes da Rede Pública do Estado de São paulo no período de 2000-2004. Resultados: Houve discordância diagnóstica em 9.641 (14,2 por cento) casos. Observou-se, no período estudado, redução de discordância nas categorias: ASCUS/AGUS de 32,3 por cento para 19,2 por cento; LSIL de 20,6 por cento para 6,3 por cento; HSIL de 27,1 por cento para 10,6 por cento e lesões invasivas de 31,7 por cento para 11,5 por cento. Casos falsos-positivos (1.348) distribuíram-se em: 75,1 por cento, ASCUS/AGUS; 20,2 por cento, LSIL; 3,9 por cento, HSIL e 0,8 por cento, lesões invasivas. Conclusão: Os resultados demonstraram uma melhoria de concordância diagnóstica evolutiva e o reconhecimento da necessidade de programas de garantia de qualidade dos laboratórios que atendem ao Sistema Único de Saúde (SUS).
Assuntos
Humanos , Feminino , Adulto , Controle de Qualidade , Infecções Sexualmente Transmissíveis , Neoplasias do Colo do Útero , Esfregaço Vaginal , Técnicas de Laboratório ClínicoRESUMO
Foram selecionados 1.180 amostras de esfregacos cervicovaginais,provenientes de varias Unidades de Saude do Estado de Sao Paulo,corados pelo metodo de Papaniculau,com achados previos de Flora e Gardnerella vaginalis,para deteccao de Mobiluncus sp,em esfregacos negativos para malignidade.Das amostras diagnosticadas inicialmente como Gardnerella vaginalis ou Flora mista,a revisao foram detectados 10,8 por cento de Mobilluncus sp,distribuidos da seguinte forma:7,1 por cento so Mobiluncus sp e 92,9 por cdento associados a outros agentes infecciosos,tais como:Gardnerella vaginalis,Flora mista,Trichomonas vaginalis,Candida sp e Papilimavirus Humano.Concluiu-se que o metodo de Papaniculau e util na deteccao do Mobilluncus sp e sua introducao na rotina diagnostica em laboratorios de saude publica viabilizara a eventual necessidade de diferenciacao no tratamento das vaginoses bacterianas.
Assuntos
Humanos , Feminino , Vaginose Bacteriana/diagnósticoRESUMO
Cuidados com a colheita, critérios morfológicos, procedimentos técnicos e fases da infecçåo såo fatores fundamentais na integraçåo cito-histológica em Papilomavirus (HPV). Partindo de 22 biópsias cervicais, com infecçåo por HPV, segundo os critérios histológicos definidos por MEISELS e col., revimos as citologias correspondentes seguindo os critérios citológicos de Meisels e os de Schneider. Hibridaçåo "in situ" com sondas biotiniladas para HPV 6, 11, 16, 18, 31, 33, 35, 42, 43, 44, 45, 51, 52 e 56 e ampliaçåo pelo sistema avidina-biotina-peroxidase foi feita em novos cortes das biópsias. A revisåo da citologia revelou 16 casos com alteraçöes por HPV, dos quais 15 com representaçåo endocervical, que nåo foi detectada nos 6 restantes casos negativos. 18 casos (81,8 por cento) foram positivos para DNA-HPV, tendo 2 dos negativos áreas descoladas durante a reaçåo. Todos os casos foram fixados em excesso (m=18,5 dias nos negativos e 11,6 nos positivos). Este trabalho reafirma a importância da revisåo das amostras citológicas dos casos biopsiados, ressaltando a queståo da amostragem como causa dos falsos negativos. A hibridizaçåo mostrou-se útil mesmo em biópsias de rotina, mas a fixaçåo parece interferir com a reatividade do DNA viral