Short-lived immunity after 17DD Yellow Fever single dose indicates that booster vaccination may be required to guarantee protective immunity in children

A vacinação contra a febre amarela (YF) é recomendada para pessoas que vivem em áreas endêmicas e representa a estratégia mais eficaz para reduzir o risco de infecção. Estudos anteriores alertaram que os regimes de reforço devem ser considerados para garantir a persistência a longo prazo dos componentes de memória específicos da 17DD-YF em adultos que vivem em áreas com circulação do vírus da YF. Considerando as menores taxas de soroconversão observadas em crianças (9 a 12 meses de idade) em comparação aos adultos, este estudo foi desenvolvido para acessar a duração da imunidade em crianças vacinadas em dose única em um período de 10 anos de seção transversal . Os níveis de anticorpos neutralizantes (PRNT) e o status fenotípico / de memória funcional das células T e B foram medidos no início, 30 a 45 dias, 1, 2, 4, 7 e 10 anos após a vacinação primária. Os resultados revelaram que uma dose única induziu 85% de soropositividade entre 30 e 45 dias e uma diminuição progressiva dependente do tempo foi observada em apenas 2 anos e diminui para valores críticos (abaixo de 60%) em períodos de tempo ≥ 4 anos . Além disso, a imunidade celular específica de YF de curta duração, mediada pelas células T e B de memória, também foi observada após 4 anos. A análise de probabilidade prevista e a memória resultante enfatizam que os correlatos de proteção (PRNT; células T CD8 + com memória efetiva; células B com memória não clássica) diminuem para valores críticos dentro de ≥4 anos após a vacinação primária. Juntos, esses resultados demonstram claramente o declínio da resposta da memória específica da 17DD-YF ao longo do tempo em crianças vacinadas principalmente entre 9 e 12 meses de idade e suportam a necessidade de um regime de reforço para garantir a persistência a longo prazo dos componentes da memória para crianças que vivem em áreas com alto risco de transmissão YF.

Multi-parameter approach to evaluate the timing of memory status after 17DD-YF primary vaccination

Nesta investigação, as técnicas melhoradas por máquina foram aplicadas para trazer insights científicos para identificar um conjunto mínimo de biomarcadores relacionados à memória fenotípica / funcional para o acompanhamento pós-vacinação da vacinação contra a febre amarela (FA). Para este propósito, o estado de memória das células T circulantes (Naïve / efetor-precoce / Memória-Central / Memória Efetiva) e células B (Naïve / memória não clássica / memória clássica) juntamente com o perfil de citocinas (IFN / TNF / IL-5 / IL-10) foram monitorizados antes do NV (dia 0) e em pontos de tempo distintos após a vacinação primária com 17DD-YF - VP (dia30-45); PV (ano1-9) e PV (ano10-11). Um conjunto de biomarcadores (eEfCD4; EMCD4; CMCD19; EMCD8; IFNCD4; IL-5CD8; TNFCD4; IFNCD8; TNFCD8; IL-5CD19; IL-5CD4) foi observado em PV (dia30-45), mas não em NV (dia0) , com a maioria deles ainda observada em VP (ano1-9). Deficiências de biomarcadores fenotípicos / funcionais foram observadas em NV (dia 0), enquanto a falta total de atributos relacionados à memória foi observada na PV (ano10-11), independentemente da idade na vacinação primária. Análise de diagrama de Venn pré-selecionada 10 atributos (eEfCD4, EMCD4, CMCD19, EMCD8, IFNCD4, IL-5CD8, TNFCD4, IFNCD8, TNFCD8 e IL-5CD4), dos quais a média geral apresentou moderada precisão para discriminar PV (dia30-45) e PV (year1-9) de NV (day0) e PV (year10-11). Abordagens multi-parâmetro e algoritmos de árvore de decisão definiram os atributos EMCD8 e IL-5CD4 como os dois principais preditores com desempenho moderado. Juntamente com os títulos PRNT, os dois principais biomarcadores levaram a um status de memória resultante observado em 80% e 51% dos voluntários em PV (dia30-45) e PV (ano1-9), contrastando com 0% e 29% encontrados em NV ( day0) e PV (year10-11), respectivamente. A deficiência de atributos relacionados à memória observada na PV (year10-11) ressalta a diminuição conspícua dependente do tempo da memória resultante após a vacinação primária com 17DD-YF, que pode ser útil para monitorar potenciais correlatos de proteção em áreas sob risco de transmissão da FA.

Prevalence and titers of yellow fever virus neutralizing antibodies in previously vaccinated adults

ABSTRACT Introduction: The World Health Organization (WHO) recommends one single dose of the Yellow Fever (YF) vaccine based on studies of antibody persistency in healthy adults. We assessed the prevalence and titers of YF virus neutralizing antibodies in previously vaccinated persons aged ≥ 60 years, in comparison to younger adults. We also evaluated the correlation between antibody titers and the time since vaccination among participants who received one vaccine dose, and the seropositivity among participants vaccinated prior to or within the past 10 years. Methods: previously vaccinated healthy persons aged ≥ 18 years were included. YF virus neutralizing antibody titers were determined by means of the 50% Plaque Reduction Neutralization Test. Results: 46 persons aged ≥ 60 years and 48 persons aged 18 to 59 years were enrolled. There was no significant difference in the prevalence of YF virus neutralizing antibodies between the two groups (p = 0.263). However, titers were significantly lower in the elderly (p = 0.022). There was no correlation between YF virus neutralizing antibody titers and the time since vaccination. There was no significant difference in seropositivity among participants vaccinated prior to or within the past 10 years. Conclusions: the clinical relevance of the observed difference in YF virus neutralizing antibody titers between the two groups is not clear.

Otimização, Padronização, Validação e Avaliação Comparativa de Testes de Quantificação dos Anticorpos Neutralizantes para o Vírus da Febre Amarela

A febre amarela (FA) é uma doença infecciosa aguda, febril, causada pelo vírus protótipo do gênero Flavivirus. A doença permanece como grande problema de saúde pública, principalmente em regiões endêmicas da África e América do Sul. No Brasil, ondas alarmantes de epizootias e epidemias são registradas desde 2016. A vacinação é a maneira mais eficaz de prevenção e controle da FA. As vacinas disponíveis produzidas com as subcepas 17D-204 e 17DD são seguras e imunogênicas, induzindo a formação de anticorpos neutralizantes que aparecem precocemente, são protetores e de longa duração. Apesar de ser considerado referência para a análise da resposta imune protetora após a vacinação, a metodologia clássica do teste de neutralização por redução de placas de lise (PRNT) é trabalhoso, de difícil execução, requer recursos humanos, equipamentos e insumos específicos, além de um tempo longo para a sua finalização, mesmo na versão micro PRNT (em placas de 96 poços). Esta adaptação do método é mais operacional do que o PRNT (em placas de 6 poços), com maior capacidade de processamento das amostras. Mas, além das desvantagens semelhantes ao teste referência, apresenta a dificuldade de leitura das placas de lise por ser realizado em poços menores. A busca por um teste mais rápido, semiautomatizado e eficiente para a quantificação de anticorpos neutralizantes vem ao encontro das necessidades de aumento da capacidade e melhoria de análises das amostras de estudos clínicos O presente estudo objetivou não somente otimizar a metodologia já utilizada na rotina do Laboratório de Tecnologia Virológica para os estudos de avaliação de imunogenicidade das vacinas para FA (micro PRNT), mas também padronizar uma metodologia mais rápida e semiautomatizada denominada \03BCPRN-HRP. A partir da definição dos protocolos de execução, ambas as metodologias foram validadas com os parâmetros de precisão, exatidão, seletividade e robustez. Posteriormente à validação, 200 soros de indivíduos vacinados foram processados pelas três metodologias para a avaliação da concordância (Coeficiente de Correlação Intraclasse, CCI) dos testes índices (micro PRNT e \03BCPRN-HRP) com o teste referência (PRNT). Os critérios de análise predefinidos para todos os ensaios de validação foram alcançados pelas metodologias em placas de 96 poços. O micro PRNT apresentou concordância moderada a substancial com o PRNT tanto para os títulos em log10 da recíproca da diluição (CCI de 0,59 e 0,74) quanto para os títulos em log10 de mUI/mL (CCI de 0,48 e 0,65). O \03BCPRN-HRP apresentou concordância de fraca a moderada com o PRNT para os títulos em log10 da recíproca da diluição (CCI de 0,29 e 0,45). Mas, para os títulos em log10 mUI/mL, os estimadores de concordância apresentaram magnitude substancial a quase completa com o PRNT (CCI de 0,69 e 0,82). Os coeficientes de correlação linear obtidos para os testes índices foram muito próximos, sugerindo correlação moderada (r > 0,70) com o teste referência para os títulos em recíproca da diluição e em mUI/mL. Portanto, tanto o micro PRNT quanto o \03BCPRN-HRP podem ser utilizados na avaliação das vacinas para FA, gerando resultados confiáveis. O \03BCPRN-HRP destaca-se por ser um teste mais rápido, semiautomatizado e com maior capacidade de processamento de amostras.

O diabético tipo 2 e a adesão ao regime terapêutico / Type 2 diabetics and adherence to the therapeutic regimen

A diabetes mellitus (DM) é uma doença metabólica e crónica que afeta um elevado número de pessoas. A morbilidade elevada implica um grande investimento em cuidados de saúde e mudanças profundas nos estilos de vida (Grilo, Sousa e Mclntyre,2008). O seu tratamento exige a adoção de comportamentos de alguma complexidade que têm que ser integrados na rotina diária. A cronicidade, associada às características do regime terapêutico e às responsabilidades do utente, contribui atualmente para a baixa adesão ao regime terapêutico. O principal objetivo desta dissertação é avaliar a adesão ao regime terapêutico por parte dos utentes diabéticos tipo 2, na Extensão de Saúde de Ceira do Centro de Saúde Norton de Matos do ACES BM1, visando a melhoria das suas condições de vida. Procedeu-se à aplicação de um questionário com o intuito de efetuar a caraterização demográfica da população alvo deste estudo e a aplicação das escalas SDSCA ? ?Atividades de Autocuidado com a Diabetes? e MAT ? ? Medida Psicométrica de Adesão aos Tratamentos?. Os dados foram tratados informaticamente, recorrendo ao programa estatístico IBM-S.P.S.S. versão 19.0. Dos 131 participantes, verificou-se que o tempo de diagnóstico é de mais de 10 anos em 54 participantes (41,2%). O tratamento instituído é com antidiabéticos orais, na grande maioria dos participantes (77,1%) e é de salientar que 22,2% fazem tratamento com insulina. As comorbidades mais frequentes são: hipertensão arterial, obesidade e dislipidémias, sendo as complicações tardias os problemas de circulação, as neuropatias, as retinopatias, as nefropatias e as amputações dos membros inferiores. Verificou-se também que a dimensão terapêutica farmacológica (?medicamentos?) é a componente do regime terapêutico com melhor nível de adesão (4,74±1,69), sendo que a ?monitorização da glicemia capilar? apresenta uma média de adesão de 4,64±1,41. Em terceiro lugar surge, os ?cuidados com os pés? com uma média de adesão de 4,09±1,07. A ?alimentação específica? tem uma média de adesão (3,8±1,01) superior à ?alimentação geral? (2,63±1,05). A ?atividade física? é a componente com menor nível de adesão, sendo o score obtido, em média, de 1,50±1,51 dias da semana. Torna-se fulcral a definição de estratégias ao nível da consulta de enfermagem, que englobem o envolvimento integrado do utente, família e rede de apoio social, promovendo a adesão ao regime terapêutico.

Avaliação da acurácia e confiabilidade do teste sorológico de neutralização por redução de placas de lise (micro PRNT) na detecção de anticorpos para o vírus da Febre Amarela

A febre amarela é causada pelo vírus protótipo do gênero Flavivirus e é transmitida ao homem através da picada de mosquitos hematófagos infectados com o agente viral. A doença permanece endêmica em regiões das florestas tropicais da África e América do Sul, apesar da disponibilidade de vacinas eficazes contra o vírus da FA ­ 17D-204 e 17DD ­ consideradas seguras e altamente imunogênicas, capazes de induzir uma rápida resposta imune específica, com a formação de anticorpos neutralizantes que aparecem precocemente, são protetores e de longa duração. O teste de neutralização por redução de placas de lise (PRNT) é considerado o teste mais sensível e mais específico para a detecção e quantificação dos anticorpos neutralizantes, sendo o método de referência para a avaliação da resposta imune protetora após a vacinação. Este estudo avaliou a confiabilidade e a acurácia do micro PRNT50 (aplicado em placas de 96 poços) tomando como referência o PRNT 50 (aplicado em placas de 6 poços) e comparou o desempenho do micro PRNT50 com o micro PRNT90 (redução de 50% e 90% das placas de lise, respectivamente). Foram selecionados 200 soros de indivíduos brasileiros que participaram de um estudo clínico de dose-resposta da vacina 17DD produzida em Bio-Manguinhos. A repetibilidade foi aferida a partir de três repetições independentes do teste para cada um dos 200 soros por uma dupla operadora e o mesmo procedimento foi realizado pelas outras duas duplas operadoras, com a finalidade de determinar a reprodutibilidade do micro PRNT50 . Foram determinados o Coeficiente de Correlação Intraclasse (CCI) e o Coeficiente de Correlação de Pearson. As medidas de acurácia determinadas neste estudo foram sensibilidade, especificidade, acurácia global, prevalência e valores preditivos positivo (VPP) e negativo (VPN). A curva ROC também foi utilizada para determinar o melhor ponto de corte do micro PRNT50 . Na avaliação da repetibilidade, os CCIs das duplas operadoras variaram entre 0,62 e 0,76; e os coeficientes de correlação de Pearson apresentaram-se entre 0,62 e 0,78. Para a reprodutibilidade, o CCI obtido foi de 0,72 e os coeficientes de correlação de Pearson variaram entre 0,70 e 0,76. As melhores medidas de acurácia foram alcançadas considerando o ponto de corte para o micro PRNT50 de 2,9 Log 10 mUI/mL, o qual apresentou sensibilidade de 91,1%, especificidade de 72,9% e acurácia global de 78%. O melhor desempenho do micro PRNT50 com este ponto de corte foi ratificado pela análise da curva ROC. Considerando um cenário hipotético de surto de FA, a prevalência seria de 28%, com VPP de 56,7% e VPN de 95,5%. O micro PRNT50 apresentou níveis satisfatórios de confiabilidade e de acurácia, mas o micro PRNT90 mostrou desempenho superior com sensibilidade de 100%, especificidade de 94,7% e acurácia global de 95%. Modificações na metodologia do teste e alterações nos critérios de classificação nas leituras dos resultados obtidos serão importantes para melhorar a acurácia do micro PRNT.