Cell-Penetrating Peptides and CRISPR-Cas9: A Combined Strategy for Human Genetic Disease Therapy.

The advent of clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR)-CRISPR-associated nuclease 9 (Cas9) technology has revolutionized the field of genetic engineering, offering unprecedented potential for the targeted manipulation of DNA sequences. Advances in the mechanism of action of the CRISPR-Cas9 system allowed potential applicability for the treatment of genetic diseases. CRISPR-Cas9's mechanism of action involves the use of an RNA guide molecule to target-specific DNA sequences and the Cas9 enzyme to induce precise DNA cleavage. In the context of the CRISPR-Cas9 system, this review covers nonviral delivery methods for gene editing based on peptide internalization. Here, we describe critical areas of discussion such as immunogenicity, emphasizing the importance of safety, efficiency, and cost-effectiveness, particularly in the context of treating single-mutation genetic diseases using advanced editing techniques genetics as prime editor and base editor. The text discusses the versatility of cell-penetrating peptides (CPPs) in forming complexes for delivering biomolecules, particularly ribonucleoprotein for genome editing with CRISPR-Cas9 in human cells. In addition, it emphasizes the promise of combining CPPs with DNA base editing and prime editing systems. These systems, known for their simplicity and precision, hold great potential for correcting point mutations in human genetic diseases. In summary, the text provides a clear overview of the advantages of using CPPs for genome editing with CRISPR-Cas9, particularly in conjunction with advanced editing systems, highlighting their potential impact on clinical applications in the treatment of single-mutation genetic diseases. [Figure: see text].

[Online survey on the reasons for vaccine hesitancy against COVID-19 in children and adolescents in Brazil]. / Inquérito online sobre os motivos para hesitação vacinal contra a COVID-19 em crianças e adolescentes do Brasil.

The objective is to unveil the reasons for vaccine hesitancy among parents and/or guardians of children and adolescents toward the prevention of COVID-19. This is a descriptive study, with a qualitative approach that seeks to analyze the answers to the open question "Why will you not vaccinate or have not vaccinated or are in doubt about vaccinating the children and adolescents under your responsibility, for the prevention of COVID-19?". The research included adult individuals, Brazilians, living in the country, responsible for children and adolescents under 18 years of age. Data collection took place electronically in November and December 2021. The answers were organized and processed with the support of the software Iramuteq. The textual corpus of this research was composed of the response of 1,896 participants, consisting of 87% who were hesitant (1,650) and 13% (246) of parents who intend to vaccinate but who outlined some doubts and considerations about the vaccination of children and adolescents. These are reasons why parents and/or guardians have not vaccinated or are in doubt about vaccinating the children and adolescents under their responsibility for the prevention of COVID-19: fears about vaccination regarding the conception that the vaccine is in the experimental phase, fear of adverse reactions and long-term effects. The reasons for the lack of intention to vaccinate stem from the understanding of the participants that COVID-19 in children is not serious, the risks of vaccination are greater than the benefits, and the right of choice not to vaccinate.

Objetiva-se desvelar os motivos para hesitação vacinal de pais e/ou responsáveis de crianças e adolescentes para prevenção da COVID-19. Trata-se de um estudo descritivo, de abordagem qualitativa, que busca analisar as respostas da pergunta aberta "por que você não vai vacinar, não vacinou ou está na dúvida em vacinar as crianças e os adolescentes sob sua responsabilidade para prevenção da COVID-19?". A pesquisa incluiu indivíduos adultos, brasileiros, residentes no país, responsáveis por crianças e adolescentes menores de 18 anos. A coleta de dados aconteceu de forma eletrônica entre os meses de novembro e dezembro de 2021. As respostas foram organizadas e processadas com suporte do software Iramuteq. O corpus textual desta pesquisa foi composto pela resposta de 1.896 participantes, constituído por 87% de hesitantes (1.650) e 13% (246) de pais que têm intenção de vacinar, mas que esboçaram algumas dúvidas e considerações a respeito da vacinação de crianças e adolescentes. São motivos pelos quais pais e/ou responsáveis não vacinaram ou estão na dúvida em vacinar as crianças e os adolescentes sob sua responsabilidade para prevenção da COVID-19: receio em razão de a vacina estar em fase experimental e medo das reações adversas e dos efeitos a longo prazo. Já os motivos para ausência de intenção de vacinar decorrem dos entendimentos dos participantes de que a COVID-19 em crianças não é grave, os riscos da vacinação são maiores do que os benefícios e o direito de escolha em não vacinar.

El objetivo es revelar los motivos de la indecisión a las vacunas de padres y/o responsables de niños y adolescentes para la prevención de COVID-19. Se trata de un estudio descriptivo con enfoque cualitativo, que busca analizar las respuestas a la pregunta abierta "¿Por qué no va a vacunar o no vacunó o tiene dudas en vacunar a los niños y los adolescentes bajo su responsabilidad para la prevención del COVID-19?". La investigación incluyó individuos adultos, brasileños, residentes en el país, responsables de niños y adolescentes menores de 18 años. La recolección de datos se realizó de forma electrónica entre los meses de noviembre y diciembre de 2021. Las respuestas se organizaron y procesaron con ayuda del software Iramuteq. El corpus textual de esta investigación fue compuesto por la respuesta de 1.896 participantes, siendo constituido por el 87% de indecisos (1.650) y el 13% (246) de padres que tienen la intención de vacunar, pero que esbozaron algunas dudas y consideraciones respecto a la vacunación de niños y adolescentes. Son motivos por los cuales los padres y/o responsables no vacunaron o están en duda en vacunar a los niños y adolescentes bajo su responsabilidad para prevención del COVID-19: temores con la vacunación en cuanto a la concepción de que la vacuna está en fase experimental, miedo a las reacciones adversas y los efectos a largo plazo. Los motivos de la ausencia de intención en vacunar se deben a que los participantes entienden que el COVID-19 en niños no es grave, que los riesgos de la vacunación son mayores que los beneficios y que tienen derecho a decidir no vacunarse.

Trustworthiness of information sources on vaccines for COVID-19 prevention among Brazilians.

OBJECTIVE: This study aims to assess the trustworthiness of information sources, perception of clear information about the vaccine, and strategies to increase adherence to vaccination to provide managers with information that helps establish effective communication with the population about vaccination. METHOD: This is an online survey conducted between January 22 and 29, 2021, preceded by an Informed Consent, that aims to assess vaccine hesitancy, which corresponded to the first week of vaccination initiation to prevent COVID-19 in Brazil. Data were obtained from a questionnaire made available through a free platform and stored in Google Forms and later exported to the SPSS statistical package for analysis. The sample consisted of all questionnaires from participants who self-declared as age 18 or older, Brazilian, and residing in Brazil at the time of the survey. Incomplete records with more than 50% of blank items and duplicates were excluded. All categorical variables were analyzed from their absolute and relative frequencies. Multivariate logistic regression was performed to verify the relationship between dependent variables and independent variables. RESULTS: The results show that trust in information sources diverges between hesitant and non-hesitant. They also showed that some participants show an overall distrust that seems to have deeper foundations than issues related only to the source of information. The high rejection of television and the WHO as sources of information among hesitant suggests that integrated actions with research institutes, public figures vaccinating, and religious leaders can help to combat vaccine hesitation. Two actors become particularly important in this dynamic, both for good and bad, and their anti-vaxxer behavior must be observed: the doctor and the Ministry of Health. CONCLUSION: This study contributes to gathering valuable information to help understand the behavior and thinking relevant to the adherence to vaccination recommendations.

Social Representations of Hesitant Brazilians about Vaccination against COVID-19.

BACKGROUND: The control of the COVID-19 pandemic has been a great challenge. Understanding the thoughts and beliefs underlying vaccine hesitancy can help in the formulation of public policies. The present study aimed to analyze the social representations of hesitant Brazilians about vaccination against COVID-19. METHODS: Qualitative research guided by the Theory of Social Representations, carried out through an online survey among Brazilian adults living in Brazil. The data were analyzed using the IRaMuTeQ software. RESULTS: Of the 173,178 respondents, 10,928 were hesitant and declared reasons for vaccination hesitation. The analysis generated three classes: mistrust of the vaccine and underestimation of the severity of the pandemic; (dis)information and distrust of political involvement; and fear of adverse reactions to COVID-19 vaccines. CONCLUSIONS: Social knowledge, presented by the representations apprehended in this study, demonstrates difficulty in discerning the reliability of information and a social imagination full of doubts and uncertainties. Understanding the internal dynamics of these groups, with their representations of the world, is important to propose policies and actions that echo and cause changes in the understanding of the role of immunization. It is essential to shed light on the sociological imagination so that gaps filled with false information can be dismantled and confronted with scientific knowledge accessible to the population.

Children's Multisystem inflammatory syndrome with myopathy.

This report describes a case of multisystem inflammatory syndrome in a child that evolved with a pattern of toxic shock syndrome with coronary artery ectasia and neurological involvement, documented by magnetic resonance imaging, with changes in the corpus callosum and myopathy in the pelvic girdle and paravertebral musculature.

Low COVID-19 vaccine hesitancy in Brazil.

BACKGROUND: The COVID-19 pandemic has affected the entire world, and the vaccine has emerged as a source of hope for return to normal life. Still, various countries have reported high vaccine hesitancy rates. It is important to know the vaccine hesitancy profile in Brazil to help design adequate communication strategies. METHODS: A voluntary, anonymous online survey was conducted from January 22 to 29, 2021, including resident Brazilian adults to assess factors related to vaccine hesitancy. Sociodemographic and epidemiological data were analyzed. A bivariate analysis was conducted with the independent variables, with vaccine hesitancy as the outcome variable, and a multivariate logistic model was used to calculated adjusted odds ratios. RESULTS: The sample included 173,178 respondents, and vaccine hesitancy was found in 10.5%. The principal factors associated with vaccine hesitancy were the following: assigning importance to the vaccinés efficacy (AOR = 16.39), fear of adverse reactions (AOR = 11.23), and assigning importance to the vaccinés country of origin (AOR = 3.72). Other risk factors were the following: male gender (AOR = 1.62), having children (AOR = 1.29), 9 years of schooling or less (AOR = 1.31), living in the Central-West region (AOR = 1.19), age ≥ 40 years (AOR = 1.17), and monthly income < U$788.68 (AOR = 1.13). The two vaccines available in Brazil, Covishield and CoronaVac, showed similar confidence, 80.13% and 76.36%, respectively, despite the higher rejection of the latter vaccinés Chinese origin. INTERPRETATION: This online survey confirms the low vaccine hesitancy rate among Brazilians and allowed the identification of a profile that can assist the elaboration of communication strategies to increase vaccine adherence. FUNDING: National Institute of Women, Children and Adolescents Health Fernandes Figueira, FIOCRUZ, Rio de Janeiro, Brazil.

Gasto catastrófico em crianças com deficiência visual: estudo transversal com cuidadores no Rio de Janeiro, Brasil / Catastrophic expenditure in children with visual impairment: a cross-sectional study with caregivers in Rio de Janeiro, Brazil / Gasto catastrófico en niños con discapacidad visual: estudio transversal con cuidadores en Río de Janeiro, Brasil

Resumo: O cuidado de um filho com deficiência visual pode vir a afetar a renda do cuidador e, por sua vez, a renda da família. Sob essa realidade, há de se considerar o gasto catastrófico consequente do aumento de despesas e da redução de renda, seja pelo desemprego, pela redução do número de horas trabalhadas ou pela dificuldade de (re)inserção no mercado de trabalho. Perante esse cenário, o objetivo principal deste estudo foi estimar o gasto catastrófico atribuído ao cuidador de crianças cegas ou com baixa visão em centros de referência em educação para cegos, oftalmologia e saúde infantil localizados no Município do Rio de Janeiro, Brasil, identificando quais fatores estão associados a uma maior ou menor prevalência desse gasto. Observou-se que 53,3% dos cuidados de crianças com cegueira comprometem 40% ou mais da renda. Entre os cuidadores de crianças com baixa visão, o gasto catastrófico é mais ameno, comprometendo no mínimo 40% da renda para 36,8% dos cuidadores. Os fatores associados à maior prevalência de gasto catastrófico foram idade do cuidador, número de moradores na residência, maior escolaridade, menor renda domiciliar, reformas na residência, plano de saúde, aquisição de empréstimos, venda de bens, quantidade de unidades de saúde que a criança recebe tratamento e parentesco do cuidador principal. A carga que recai sobre os cuidadores de crianças com deficiência visual indica uma situação de vulnerabilidade que mostra a necessidade de acesso aos mecanismos de proteção financeira e social, por meio de políticas que sejam capazes de atender esse grupo.

Abstract: Caring for a visually impaired child can affect the caregiver's income and, in turn, the family's. Catastrophic spending resulting from increased expenses and reduced income must be taken into account, whether due to unemployment, a reduction in the number of hours worked or the difficulty of entering or reentering the job market. Given this scenario, the main objective of this study was to estimate the catastrophic spending attributed to the caregiver of blind or low-vision children in reference centers for education for the blind, ophthalmology and child health located in the city of Rio de Janeiro, Brazil, identifying which factors are associated with a higher or lower prevalence of this expenditure. It was found that 53.3% of care for blind children involved 40% or more of their income. Among the caregivers of children with low vision, catastrophic spending is milder, compromising at least 40% of income for 36.8% of the caregivers. The factors associated with a higher prevalence of catastrophic spending were the caregiver's age, the number of residents in the household, higher schooling, lower household income, renovations to the home, health insurance, taking out loans, selling assets, the number of health units where the child receives treatment and the relationship of the main caregiver. The burden placed on caregivers of visually impaired children indicates a situation of vulnerability that shows the need for access to financial and social protection mechanisms, through policies that are capable of serving this group.

Resumen: El cuidado de un niño con discapacidad visual puede impactar los ingresos del cuidador y, a su vez, de la familia. En este escenario, es necesario considerar el gasto catastrófico resultante del aumento de los gastos o la reducción de los ingresos, ya sea por desempleo, reducción del número de horas trabajadas o por la dificultad de inserción o reinserción en el mercado laboral. Ante esto, el objetivo principal de este estudio fue estimar el gasto catastrófico atribuido al cuidador de niños ciegos o con baja visión en centros de referencia en educación para ciegos, oftalmología y salud infantil, ubicados en el municipio de Río de Janeiro, Brasil, con el fin de identificar qué factores se asocian con una mayor o menor prevalencia de este gasto. Se observó que el 53,3% de los cuidados de niños con discapacidad visual comprometen más del 40% de los ingresos totales. Mientras tanto, el cuidado de niños con baja visión tiene un menor gasto catastrófico, comprometiendo menos del 40% de los ingresos según el 36,8% de los cuidadores. La mayor prevalencia de gasto catastrófico estuvo asociada a los siguientes factores: edad del cuidador, número de residentes en el hogar, mayor nivel de estudios, bajos ingresos familiares, remodelaciones en el hogar, seguro de salud, adquisición de préstamos, venta de bienes, cantidad de centros de salud en las que el niño acude al tratamiento y parentesco del cuidador principal. Los cuidadores de niños con discapacidad visual enfrentan una situación de vulnerabilidad, lo que apunta a una necesidad de acceder a acciones de protección financiera y social mediante políticas dirigidas a esta población.

Inquérito online sobre os motivos para hesitação vacinal contra a COVID-19 em crianças e adolescentes do Brasil / Online survey on the reasons for vaccine hesitancy against COVID-19 in children and adolescents in Brazil / Encuesta en línea sobre los motivos de la indecisión a las vacunas contra COVID-19 en niños y adolescentes de Brasil

Resumo: Objetiva-se desvelar os motivos para hesitação vacinal de pais e/ou responsáveis de crianças e adolescentes para prevenção da COVID-19. Trata-se de um estudo descritivo, de abordagem qualitativa, que busca analisar as respostas da pergunta aberta "por que você não vai vacinar, não vacinou ou está na dúvida em vacinar as crianças e os adolescentes sob sua responsabilidade para prevenção da COVID-19?". A pesquisa incluiu indivíduos adultos, brasileiros, residentes no país, responsáveis por crianças e adolescentes menores de 18 anos. A coleta de dados aconteceu de forma eletrônica entre os meses de novembro e dezembro de 2021. As respostas foram organizadas e processadas com suporte do software Iramuteq. O corpus textual desta pesquisa foi composto pela resposta de 1.896 participantes, constituído por 87% de hesitantes (1.650) e 13% (246) de pais que têm intenção de vacinar, mas que esboçaram algumas dúvidas e considerações a respeito da vacinação de crianças e adolescentes. São motivos pelos quais pais e/ou responsáveis não vacinaram ou estão na dúvida em vacinar as crianças e os adolescentes sob sua responsabilidade para prevenção da COVID-19: receio em razão de a vacina estar em fase experimental e medo das reações adversas e dos efeitos a longo prazo. Já os motivos para ausência de intenção de vacinar decorrem dos entendimentos dos participantes de que a COVID-19 em crianças não é grave, os riscos da vacinação são maiores do que os benefícios e o direito de escolha em não vacinar.

Abstract: The objective is to unveil the reasons for vaccine hesitancy among parents and/or guardians of children and adolescents toward the prevention of COVID-19. This is a descriptive study, with a qualitative approach that seeks to analyze the answers to the open question "Why will you not vaccinate or have not vaccinated or are in doubt about vaccinating the children and adolescents under your responsibility, for the prevention of COVID-19?". The research included adult individuals, Brazilians, living in the country, responsible for children and adolescents under 18 years of age. Data collection took place electronically in November and December 2021. The answers were organized and processed with the support of the software Iramuteq. The textual corpus of this research was composed of the response of 1,896 participants, consisting of 87% who were hesitant (1,650) and 13% (246) of parents who intend to vaccinate but who outlined some doubts and considerations about the vaccination of children and adolescents. These are reasons why parents and/or guardians have not vaccinated or are in doubt about vaccinating the children and adolescents under their responsibility for the prevention of COVID-19: fears about vaccination regarding the conception that the vaccine is in the experimental phase, fear of adverse reactions and long-term effects. The reasons for the lack of intention to vaccinate stem from the understanding of the participants that COVID-19 in children is not serious, the risks of vaccination are greater than the benefits, and the right of choice not to vaccinate.

Resumen: El objetivo es revelar los motivos de la indecisión a las vacunas de padres y/o responsables de niños y adolescentes para la prevención de COVID-19. Se trata de un estudio descriptivo con enfoque cualitativo, que busca analizar las respuestas a la pregunta abierta "¿Por qué no va a vacunar o no vacunó o tiene dudas en vacunar a los niños y los adolescentes bajo su responsabilidad para la prevención del COVID-19?". La investigación incluyó individuos adultos, brasileños, residentes en el país, responsables de niños y adolescentes menores de 18 años. La recolección de datos se realizó de forma electrónica entre los meses de noviembre y diciembre de 2021. Las respuestas se organizaron y procesaron con ayuda del software Iramuteq. El corpus textual de esta investigación fue compuesto por la respuesta de 1.896 participantes, siendo constituido por el 87% de indecisos (1.650) y el 13% (246) de padres que tienen la intención de vacunar, pero que esbozaron algunas dudas y consideraciones respecto a la vacunación de niños y adolescentes. Son motivos por los cuales los padres y/o responsables no vacunaron o están en duda en vacunar a los niños y adolescentes bajo su responsabilidad para prevención del COVID-19: temores con la vacunación en cuanto a la concepción de que la vacuna está en fase experimental, miedo a las reacciones adversas y los efectos a largo plazo. Los motivos de la ausencia de intención en vacunar se deben a que los participantes entienden que el COVID-19 en niños no es grave, que los riesgos de la vacunación son mayores que los beneficios y que tienen derecho a decidir no vacunarse.

An Efficient Electroporation Protocol for the Genetic Modification of Mammalian Cells.

Genetic modification of cell lines and primary cells is an expensive and cumbersome approach, often involving the use of viral vectors. Electroporation using square-wave generating devices, like Lonza's Nucleofector, is a widely used option, but the costs associated with the acquisition of electroporation kits and the transient transgene expression might hamper the utility of this methodology. In the present work, we show that our in-house developed buffers, termed Chicabuffers, can be efficiently used to electroporate cell lines and primary cells from murine and human origin. Using the Nucleofector II device, we electroporated 14 different cell lines and also primary cells, like mesenchymal stem cells and cord blood CD34+, providing optimized protocols for each of them. Moreover, when combined with sleeping beauty-based transposon system, long-term transgene expression could be achieved in all types of cells tested. Transgene expression was stable and did not interfere with CD34+ differentiation to committed progenitors. We also show that these buffers can be used in CRISPR-mediated editing of PDCD1 gene locus in 293T and human peripheral blood mononuclear cells. The optimized protocols reported in this study provide a suitable and cost-effective platform for the genetic modification of cells, facilitating the widespread adoption of this technology.

Children's Multisystem inflammatory syndrome with myopathy

Abstract This report describes a case of multisystem inflammatory syndrome in a child that evolved with a pattern of toxic shock syndrome with coronary artery ectasia and neurological involvement, documented by magnetic resonance imaging, with changes in the corpus callosum and myopathy in the pelvic girdle and paravertebral musculature.

Neurodevelopment of children exposed intra-uterus by Zika virus: a case series

O principal objetivo deste manuscrito foi investigar o neurodesenvolvimento de crianças expostas ao vírus Zika no período intra-uterino, assintomáticas ao nascimento. Recém-nascidos com exposição documentada ao vírus Zika durante o período intra-uterino que eram assintomáticos ao nascimento foram acompanhados nos dois primeiros anos de vida para o desenvolvimento neurológico usando o teste de Bayley III. As crianças foram classificadas como tendo neurodesenvolvimento normal ou tardio para a idade, com base nos resultados mais recentes da avaliação de Bayley III. Oitenta e quatro crianças foram incluídas no estudo. A primeira avaliação de Bayley III foi realizada com idade cronológica média de 9,7 ± 3,1 meses; 13 crianças (15%) apresentaram atraso em um dos três domínios, distribuídos da seguinte forma: 10 (12%) no domínio da linguagem e 3 (3,5%) no domínio motor. A avaliação mais recente de Bayley III foi realizada com idade média de 15,3 ± 3,1 meses; 42 crianças (50%) apresentaram atraso em um dos três domínios: 4 (5%) em cognição, 31 (37%) em linguagem e 20 (24%) em desempenho motor. Não houve diferenças estatísticas em gênero, idade gestacional, peso ao nascer e circunferência da cabeça ao nascer entre crianças com neurodesenvolvimento normal e tardio para a idade. Uma proporção muito alta de crianças expostas ao ZIKV durante a gravidez, assintomáticas ao nascimento, demonstrou um atraso no desenvolvimento neurológico, principalmente no domínio da linguagem, nos primeiros dois anos de vida.

Molecular alterations in the extracellular matrix in the brains of newborns with congenital Zika syndrome

A infecção pelo vírus zika (ZIKV) durante a gravidez pode causar um conjunto de anormalidades graves no feto, conhecidas como síndrome congênita do zika (CZS). Experimentos com modelos animais e sistemas in vitro contribuíram substancialmente para a nossa compreensão da fisiopatologia da infecção pelo ZIKV. Aqui, para investigar a base molecular da CZS em humanos, usamos uma abordagem de biologia de sistemas para integrar dados transcriptômicos, proteômicos e genômicos dos cérebros post-mortem de neonatos com CZS. Observamos que os colágenos foram bastante reduzidos em expressão nos cérebros de CZS nos níveis de RNA e de proteínas e que os neonatos com CZS tinham vários polimorfismos de nucleotídeo único em genes que codificam colágeno que estão associados à osteogênese imperfeita e à artrogripose. Esses achados foram validados por imuno-histoquímica e análise comparativa da abundância de colágeno em amostras infectadas e não infectadas por ZIKV. Além disso, mostramos um aumento dependente de ZIKV na expressão de fatores de adesão celular que são essenciais para o crescimento de neurites e a orientação do axônio, achados consistentes com os defeitos de migração neuronal observados na CZS. Juntos, esses achados fornecem informações sobre as alterações moleculares subjacentes no cérebro infectado pelo ZIKV e revelam genes hospedeiros associados à suscetibilidade à CZS.

A rapid and accurate methylation-sensitive high-resolution melting analysis assay for the diagnosis of Prader Willi and Angelman patients

Fundo: As síndromes de Prader Willi (PWS) e Angelman (AS) são raros distúrbios genéticos caracterizados por deleções, disomias uniparentais e defeitos de impressão no cromossomo 15. A perda de função de genes específicos causados ​​por alterações genéticas no alelo paterno causa SPW enquanto a ausência na mãe resultados do alelo AS. O diagnóstico laboratorial de SPW e SA é complexo e exige técnicas de biologia molecular e citogenética para identificar o mecanismo genético relacionado ao desenvolvimento da doença. A análise de metilação do DNA no cromossomo 15 no locus SNURF ­ SNRPN através do MS ­ PCR confirma o diagnóstico e distingue entre PWS e AS. Nosso estudo teve como objetivo estabelecer a técnica MS ­ PCR associada ao derretimento de alta resolução (MS ­ HRM) no diagnóstico de SPW e SA com um único par de primers. Métodos: Coletamos amostras de sangue de 43 pacientes suspeitos para uma análise citogenética e de metilação. O DNA extraído foi tratado com bissulfito para realizar análises comparativas de metilação. Resultados: MS ­ HRM e MS ­ PCR concordaram em 100% dos casos, identificando 19 (44%) SPW, 3 (7%) AS e 21 (49%) Normal. A análise FISH detectou quatro casos de SPW causados ​​por deleções no cromossomo 15. Conclusão: O MS ­ HRM apresentou bom desempenho com um par exclusivo de primers, dispensando a análise de gel de eletroforese, oferecendo um diagnóstico rápido e reprodutível.

Early Clinical Infancy Outcomes for Microcephaly and/or SGA Zika-exposed Infants

Antecedentes: bebês expostos ao zika com microcefalia (proporcional ou desproporcional) e aqueles que são pequenos para a idade gestacional sem microcefalia devem ser acompanhados de perto, principalmente suas trajetórias de crescimento. Eles apresentam alto risco de resultados adversos no primeiro ano de vida. A exposição pré-natal ao vírus Zika (ZIKV) pode levar a resultados adversos no bebê, incluindo microcefalia e ser pequena para a idade gestacional (PIG). Bebês expostos ao ZIKV com diagnóstico de microcefalia (proporcional [PM] ou desproporcional [DM]) ou PIG ao nascimento foram avaliados com medidas antropométricas e resultados de saúde. Métodos: Os bebês tiveram exposição ao ZIKV confirmada laboratorialmente no Brasil. A classificação PM, DM ou SGA foi baseada na circunferência da cabeça e peso. Os parâmetros de crescimento do primeiro ano e os resultados clínicos foram registrados com as análises realizadas. Resultados: Entre as 156 crianças expostas ao ZIKV, 14 (9,0%) eram ASG, 13 (8,3%) PM, 13 (8,3%) DM e 116 (74,4%) não eram ASG nem tinham microcefalia (NSNM). Altas taxas de anormalidades neurológicas, oftalmológicas e auditivas foram observadas para PM (100%), DM (100%) e PIG (42,9%) vs RNMN (18,3%; P <0,001); odds ratio [OR], 3,4 (intervalo de confiança de 95% [IC], 1,1-10,7) para SGA vs NSNM. Anormalidades de neuroimagem foram observadas em 100% dos PM e DM e em 42,9% dos PIG vs NSNM 16%; (P <0,001); OR 3,9 (IC 95%, 1,2-12,8) para ASG vs NSNM. As taxas de crescimento pelo escore z, particularmente para bebês com microcefalia, foram ruins após o nascimento, mas apresentaram melhora após os quatro meses de vida. Conclusões: Lactentes expostos ao ZIKV com microcefalia (MP e DM) apresentaram taxas igualmente altas de resultados adversos, mas mostraram melhora nas medidas de crescimento além dos 4 meses de vida. Enquanto os bebês SGA tiveram menos resultados adversos em comparação aos bebês com microcefalia, foram observados resultados adversos notáveis ​​em alguns; as chances de ter resultados adversos eram 3 a 4 vezes maiores em comparação aos RNMN.Lindos bebês expostos ao zika com microcefalia, independentemente de serem proporcionais ou desproporcionais, e aqueles que são pequenos para a idade gestacional sem microcefalia devem ser acompanhados de perto, particularmente suas trajetórias de crescimento . Eles apresentam alto risco de resultados adversos no primeiro ano de vida.

Inhibition by Marine Algae of Chikungunya Virus Isolated From Patients in a Recent Disease Outbreak in Rio de Janeiro

A infecção pelo vírus Chikungunya (CHIKV) é uma das doenças reemergentes mais desafiadoras causadas por um vírus e, sem tratamento antiviral específico, tornou-se um grande problema de saúde pública. Nesta investigação, foram coletadas 25 amostras de sangue de pacientes com sintomas característicos de CHIKV e submetidas a um protocolo de isolamento de vírus, que detectou 3 isolados de CHIKV. Essas amostras foram avaliadas por sequenciamento para caracterização das cepas e qualquer homologia com vírus que circulam no Brasil durante um surto recente. Estes vírus foram utilizados para o desenvolvimento de ensaios antivirais. Posteriormente, foram estudados os efeitos inibitórios dos extratos de algas sobre a replicação do CHIKV. As espécies marinhas de algas testadas foram Bryothamnion triquetrum, Caulerpa racemosa, Laurencia dendroidea, Osmundaria obtusiloba, Ulva fasciata e Kappaphycus alvarezii, encontradas em diferentes países, incluindo o Brasil. Os resultados revelaram altos níveis de inibição do CHIKV, incluindo extratos de O. obtusiloba com valores de inibição de 1,25 µg / mL e um índice de seletividade de 420. A inibição viral dependeu do tempo de adição do extrato de O. obtusiloba às células infectadas, com a inibição ideal ocorrendo até 16 horas após a infecção. Avaliações de neurônios com O. obtusiloba foram realizadas e demonstraram baixa toxicidade, e em neurônios infectados observamos alta atividade inibitória de maneira dose-dependente. Estes resultados indicam que os extratos de algas podem ser novos candidatos promissores para o desenvolvimento de agentes terapêuticos contra infecções por CHIKV.