RESUMEN
La prueba molecular Genotype MTBDRplus, es un método que permite identificar las mutaciones más frecuentes asociadas con la resistencia a las drogas antituberculosas de primera línea: isoniacida (INH) y rifampicina (RIF). El objetivo de este estudio fue evaluar el desempeño de la prueba molecular con cultivos y muestras de esputo con baciloscopía positiva. Se evaluó 95 cultivos y 100 esputos con perfiles de resistencia previamente determinados por el método de referencia proporciones agar en placa (APP). La prueba molecular a partir de cultivos mostró una sensibilidad de 100 por ciento;97,5 por ciento y 96,9 por ciento para RIF, INH y multidrogorresistente (MDR) respectivamente; mientras que para esputo la sensibilidadfue de 95,7 por ciento; 96,8 por ciento y 95,2 por ciento para RIF, INH y MDR respectivamente. Se concluye que Genotype MTBDRplus es una herramienta muy útil para la detección rápida de la resistencia a INH y RIF simultáneamente (MDR) en un máximo de72 h a partir de esputo o de cultivo
Asunto(s)
Humanos , Isoniazida , Mutación , Reproducibilidad de los Resultados , Rifampin , Tuberculosis Resistente a Múltiples Medicamentos , Técnicas de Diagnóstico Molecular , Epidemiología Descriptiva , PerúRESUMEN
OBJECTIVE: To validate the polymerase chain reaction-based universal heteroduplex generator (PCR UHG-Rif) assay for identifying rifampin-resistant and multidrug-resistant (MDR, resistant to isoniazid and rifampin) Mycobacterium tuberculosis in patients with pulmonary tuberculosis from communities in Lima (Peru) with a high incidence of resistant tuberculosis. DESIGN: To compare the results of antituberculosis drug susceptibility testing in clinical samples performed by the proportion method with those obtained by the PCR UHG-Rif assay, with the aim of analyzing the diagnostic capability of PCR UHG-Rif. RESULTS: Concordance for the identification of antituberculosis drug susceptibility was 0.95 (kappa = 0.899; P < .05), with a sensitivity and specificity of 0.973 and 0.922 (P < .05), respectively. The positive predictive value was 0.939 (95% CI: 0.879-0.970) and the negative predictive value was 0.965 (95% CI: 0.902-0.988). Nevertheless, the probability for MDR prediction was 0.981 (P < .05). PCR UHG-Rif allows the detection of mixed populations; discordant results can be explained by the presence of point mutations, missense mutations and mutations outside the rpoB "hot" region associated with rifampin-resistance. CONCLUSIONS: The PCR UHG-Rif assay detects mutations in the rpoB gene with excellent sensitivity and specificity, and suitable predictive values when compared with the standard method for determining susceptibility to antituberculosis drugs. This test can be considered an excellent tool that can contribute to tuberculosis control by correctly identifying patients infected with resistant and MDR bacilli, leading to a reduction in the cases of tuberculosis and resistant tuberculosis.
Asunto(s)
Antibióticos Antituberculosos/uso terapéutico , Análisis Heterodúplex , Mycobacterium tuberculosis/genética , Mycobacterium tuberculosis/aislamiento & purificación , Reacción en Cadena de la Polimerasa , Rifampin/uso terapéutico , Tuberculosis Resistente a Múltiples Medicamentos/microbiología , Método Doble Ciego , Farmacorresistencia Microbiana , Humanos , Perú , Estudios ProspectivosRESUMEN
Este manual ha sido desarrollado en el marco del Proyecto "Haciendo la diferencia: consolidando una respuesta amplia e integral contra la Tuberculosis en el Perú" Octava Ronda Fondo Mundial - Componente Tuberculosis bajo los términos de donación
Asunto(s)
Humanos , Control de Calidad , Mycobacterium tuberculosis , Tuberculosis/diagnóstico , PerúAsunto(s)
Humanos , Masculino , Adolescente , Adulto , Femenino , Niño , Persona de Mediana Edad , Tuberculosis Extensivamente Resistente a Drogas , PerúRESUMEN
El manual, es para dar a conocer los procedimientos técnicos de evaluación externa de la calidad de la prueba de Griess en los laboratorios de referencia de salud pública donde se ha validado e implementado esta prueba
Asunto(s)
Control de Calidad , Rifampin , Nitrato-Reductasa , Isoniazida , Antituberculosos , PerúRESUMEN
El manual busca estandarizar y dar a conocer, en forma clara y definida, la metodología para evaluar la calidad y confiabilidad de las pruebas de susceptibilidad a las drogas antituberculosas en los laboratorios de referencia implementados
Asunto(s)
Control de Calidad , Rifampin , Susceptibilidad a Enfermedades , Isoniazida , Antituberculosos , PerúRESUMEN
El manual da a conocer los procedimientos técnicos de evaluación externa de la calidad de los medios de cultivo sólido Ogawa y Lowestein Jensen, preparados en los laboratorios de la red nacional de tuberculosis
Asunto(s)
Control de Calidad , Tuberculosis , Tuberculosis Resistente a Múltiples Medicamentos , Medios de Cultivo , PerúRESUMEN
El manual da a conocer los procedimientos técnicos de evaluación externa de la calidad de la prueba MODS en los laboratorios de referencia de salud pública donde se ha implementado y validado esta prueba
Asunto(s)
Control de Calidad , Rifampin , Tuberculosis Resistente a Múltiples Medicamentos , Susceptibilidad a Enfermedades , Isoniazida , Antituberculosos , PerúRESUMEN
El presente manual da a conocer los procedimientos técnicos de evaluación externa de la calidad de la prueba MODS en los laboratorios de referencia de salud pública donde se ha implementado y validado esta prueba(AU)
Asunto(s)
Tuberculosis Resistente a Múltiples Medicamentos , Control de Calidad , Antituberculosos , Susceptibilidad a Enfermedades , Isoniazida , Rifampin , PerúRESUMEN
El presente manual da a conocer los procedimientos técnicos de evaluación externa de la calidad de los medios de cultivo sólido Ogawa y Lowestein Jensen, preparados en los laboratorios de la red nacional de tuberculosis(AU)
Asunto(s)
Tuberculosis Resistente a Múltiples Medicamentos , Control de Calidad , Medios de Cultivo , Tuberculosis , PerúRESUMEN
El presente manual, es para dar a conocer los procedimientos técnicos de evaluación externa de la calidad de la prueba de Griess en los laboratorios de referencia de salud pública donde se ha validado e implementado esta prueba(AU)
Asunto(s)
Control de Calidad , Nitrato-Reductasa , Antituberculosos , Isoniazida , Rifampin , PerúRESUMEN
El presente manual busca estandarizar y dar a conocer, en forma clara y definida, la metodología para evaluar la calidad y confiabilidad de las pruebas de susceptibilidad a las drogas antituberculosas en los laboratorios de referencia implementados(AU)
Asunto(s)
Control de Calidad , Antituberculosos , Susceptibilidad a Enfermedades , Isoniazida , Rifampin , PerúRESUMEN
Objetivo. Validar el ensayo de reacción en cadena de la polimerasa basada en generador universal de heterodúplex (PCR UHG-Rif) para la identificación de Mycobacterium tuberculosis resistente a rifampicina y multirresistente (MDR, resistente a isoniazida y rifampicina) en pacientes con diagnóstico de tuberculosis pulmonar procedentes de comunidades de elevada incidencia de tuberculosis resistente en Lima, Perú. Diseño. Comparar la determinación de la sensibilidad a fármacos antituberculosos mediante el método de las proporciones y el PCR UHG-Rif a partir de muestras clínicas, y en función de eso, analizar la capacidad diagnóstica del ensayo de PCR UHG-Rif. Resultados. La concordancia en la identificación de la sensibilidad a fármacos antituberculosos fue 0,95 (k 5 0,899; p < 0,05) mostrando una sensibilidad y especificidad del 0,973 y 0,922 p < 0,05), respectivamente. El valor predictivo positivo fue 0,939 (IC 95%: 0,879-0,970) y el valor predictivo negativo fue 0,965 (IC 95%: 0,902-0,988). Sin embargo, la posibilidad de predicción de MDR fue 0,981 (p < 0,05). Este método permite la detección de poblaciones mixtas y las discordancias pueden explicarse por la presencia de mutaciones silenciosas y no incluidas en la región "caliente" del gen rpoB asociada a la resistencia a rifampicina. Conclusión. El ensayo de PCR UHG-Rif detectó mutaciones en el gen rpoB y mostraba sensibilidad y especificidad excelente y adecuados valores predictivos en comparación con el método estándar en la determinación de la sensibilidad a fármacos antituberculosos. Por lo tanto, este ensayo puede ser considerado como una excelente herramienta cuya aplicación contribuirá al control de la tuberculosis, identificando correcta y oportunamente a los pacientes infectados con bacilos resistentes y MDR, permitiendo la reducción de casos de tuberculosis y tuberculosis resistente (AU)
Objective. To validate the polymerase chain reaction-based universal heteroduplex generator (PCR UHG-Rif) assay for identifying rifampin-resistant and multidrug-resistant (MDR, resistant to isoniazid and rifampin) Mycobacterium tuberculosis in patients with pulmonary tuberculosis from communities in Lima (Peru) with a high incidence of resistant tuberculosis. Design. To compare the results of antituberculosis drug susceptibility testing in clinical samples performed by the proportion method with those obtained by the PCR UHG-Rif assay, with the aim of analyzing the diagnostic capability of PCR UHG-Rif. Results. Concordance for the identification of antituberculosis drug susceptibility was 0.95 (k 5 0.899; P < .05), with a sensitivity and specificity of 0.973 and 0.922 (P < .05), respectively. The positive predictive value was 0.939 (95% CI: 0.879-0.970) and the negative predictive value was 0.965 (95% CI: 0.902-0.988). Nevertheless, the probability for MDR prediction was 0.981 (P < .05). PCR UHG-Rif allows the detection of mixed populations; discordant results can be explained by the presence of point mutations, missense mutations and mutations outside the rpoB "hot" region associated with rifampin-resistance. Conclusions. The PCR UHG-Rif assay detects mutations in the rpoB gene with excellent sensitivity and specificity, and suitable predictive values when compared with the standard method for determining susceptibility to antituberculosis drugs. This test can be considered an excellent tool that can contribute to tuberculosis control by correctly identifying patients infected with resistant and MDR bacilli, leading to a reduction in the cases of tuberculosis and resistant tuberculosis (AU)