The pan-caspase inhibitor Emricasan (IDN-6556) decreases liver injury and fibrosis in a murine model of non-alcoholic steatohepatitis.

BACKGROUND & AIMS: Hepatocyte apoptosis, the hallmark of non-alcoholic steatohepatitis (NASH) contributes to liver injury and fibrosis. Although, both the intrinsic and extrinsic apoptotic pathways are involved in the pathogenesis of NASH, the final common step of apoptosis is executed by a family of cysteine-proteases termed caspases. Thus, our aim was to ascertain if administration of Emricasan, a pan-caspase inhibitor, ameliorates liver injury and fibrosis in a murine model of NASH. METHODS: C57/BL6J-mice were fed regular chow or high fat diet (HFD) for 20 weeks. All mice were treated with vehicle or Emricasan. RESULTS: Mice fed a HFD diet demonstrate a five-fold increase in hepatocyte apoptosis by the TUNEL assay and a 1.5-fold and 1.3-fold increase in caspase-3 and-8 activities respectively; this increase in apoptosis was substantially attenuated in mice fed a HFD treated with Emricasan (HFD-Em). Likewise, liver injury and inflammation were reduced in mice fed HFD-Em as compare to HFD by measuring serum aspartate aminotransferase and alanine aminotransferase levels, NAS histological score and IL 1-ß, TNF-α, monocyte chemoattractant protein (MCP-1) and C-X-C chemokine ligand-2 (CXCL2) quantitative reverse-transcription polymerase chain reaction (qPCR). These differences could not be attributed to differences in hepatic steatosis as liver triglycerides content were similar in both HFD groups. Hepatic fibrosis was reduced by Emricasan in HFD animals by decreasing αSMA (a marker for hepatic stellate cell activation), fibrosis score, Sirius red staining, hydroxyproline liver content and profibrogenic cytokines by qPCR. CONCLUSION: In conclusion, these data demonstrate that in a murine model of NASH, liver injury and fibrosis are suppressed by inhibiting hepatocytes apoptosis and suggests that Emricasan may be an attractive antifibrotic therapy in NASH.

Adenovirus-mediated inhibition of SPARC attenuates liver fibrosis in rats.

BACKGROUND: The interaction between fibrogenic cells and extracellular matrix plays a role in liver fibrosis, yet the mechanisms are largely unknown. Secreted protein, acidic and rich in cysteine (SPARC) is a matricellular glycoprotein that is expressed by hepatic stellate cells and is overexpressed in fibrotic livers. We investigated the in vivo role of SPARC in experimentally induced liver fibrosis in rats. METHODS: A recombinant adenovirus carrying antisense SPARC was constructed (AdasSPARC). Advanced liver fibrosis was induced in Sprague-Dawley rats by prolonged intraperitoneal administration of thioacetamide. Animals received injections of AdasSPARC or Ad beta gal (control adenovirus) via the tail vein and directly into the liver 1 week after the first dose. The pathological changes in liver tissues and indices of fibrosis were assessed at eight weeks. Expression of SPARC, transforming growth factor (TGF)-beta and alpha-smooth muscle actin were evaluated by quantitative real-time polymerase chain reaction, western blotting, enzyme-linked immunosorbent assay and immunohistochemistry. RESULTS: Hepatic SPARC expression significantly increased during the development of liver fibrosis. AdasSPARC markedly attenuated the development of hepatic fibrosis in rats treated with thiocetamide, as assessed by decreased collagen deposition, lower hepatic content of hydroxyproline and less advanced morphometric stage of fibrosis. AdasSPARC treatment reduced inflammatory activity (Knodell score) and suppressed transdifferentiation of hepatic stellate cell to the myofibroblasts like phenotype in vivo. Furthermore, in vitro inhibition of SPARC on hepatic stellate cells decreases the production of TGF-beta. CONCLUSIONS: This is the first study to demonstrate that knockdown of hepatic SPARC expression ameliorates thioacetamide-induced liver fibrosis in rats with chronic liver injury. SPARC is a potential target for gene therapy in liver fibrosis.

Atenuación y reversibilidad de la fibrogénesis hepática con inhibidores de la enzima convertidora de la angiotensina en un modelo animal: una nueva potencial terapia para la cirrosis / Attenuation and reversibility of hepatic fibrogenesis with angiotensin converting enzyme inhibitors in an animal model: a new potential therapy for cirrhosis

Un variado espectro de enfermedades hepáticas desencadenan el proceso fibrogénico. Habitualmente transcurren meses o años antes de que los procesos reparativos en respuesta a la injuria celular den lugar a distintos estadios de fibrosis. El estadio final del proceso fibrogénico hepático es la cirrosis. La progresión de la disfunción hepatocelular determina la evolución a un estado de insuficiencia hepática, así como las bandas de fibrosis condicionan en parte la hipertensión portal y por último es estímulo de regeneración sostenido observado en éstos pacientes incrementa el riesgo de desarrollo de un hepatocarcinoma. Desde hace algunos años, los esfuerzos realizados en este campo de la investigación permitieron comprender varios de los mecanismos fisiopatogénicos desde el punto de vista celular y molecular implicados en el desarrollo de fibrosis y la progresión a la cirrosis. Sobre la base de estos conocimientos se han podido identificar algunos puntos del proceso que podrían ser susceptibles de intervención farmacológica. Sin embargo, aunque variadas, las herramientas terapéuticas actuales no cubren todas las expectativas deseadas: 1) éxito terapéutico en la mayoría de los pacientes, 2) escasos o nulos efectos adversos, 3) mínimo porcentaje de contraindicaciones, y 4) costo que permita la accesibilidad a la mayoría de los pacientes. Los inhibidores de la enzima de conversión de la angiotensina han comprobado tener efectos antifibrogénicos en otros órganos, dichos hallazgos nos permitieron especular con su posible utilidad en el tratamiento de la cirrosis. Se trabajó en un modelo animal de injuria hepática crónica sin fenómenos de reversibilidad espontánea. El presente trabajo demostró que el enalapril previene el proceso fibrogénico una vez desencadenada la injuria celular hepática. Asimismo, se sugiere que la prolongación del tiempo de tratamiento mejora aún más la respuesta inicial. El enalapril también resultó efectivo en éste modelo en la reversión de la cirrosis recientemente constituida. Se evaluaron algunos probables mecanismos de acción del fármaco sobre la fibrogénesis hepática. El tratamiento disminuyó el grado de fibrosis, mejoró las alteraciones histoarquitecturales propias del proceso, disminuyó el porcentaje de las principales células implicadas en la fibrogénesis y modificó la expresión proteica de mediadores profibrogénicos y de activación celular... (TRUNCADO)

Atenuación y reversibilidad de la fibrogénesis hepática con inhibidores de la enzima convertidora de la angiotensina en un modelo animal: una nueva potencial terapia para la cirrosis / Attenuation and reversibility of hepatic fibrogenesis with angiotensin converting enzyme inhibitors in an animal model: a new potential therapy for cirrhosis

Un variado espectro de enfermedades hepáticas desencadenan el proceso fibrogénico. Habitualmente transcurren meses o años antes de que los procesos reparativos en respuesta a la injuria celular den lugar a distintos estadios de fibrosis. El estadio final del proceso fibrogénico hepático es la cirrosis. La progresión de la disfunción hepatocelular determina la evolución a un estado de insuficiencia hepática, así como las bandas de fibrosis condicionan en parte la hipertensión portal y por último es estímulo de regeneración sostenido observado en éstos pacientes incrementa el riesgo de desarrollo de un hepatocarcinoma. Desde hace algunos años, los esfuerzos realizados en este campo de la investigación permitieron comprender varios de los mecanismos fisiopatogénicos desde el punto de vista celular y molecular implicados en el desarrollo de fibrosis y la progresión a la cirrosis. Sobre la base de estos conocimientos se han podido identificar algunos puntos del proceso que podrían ser susceptibles de intervención farmacológica. Sin embargo, aunque variadas, las herramientas terapéuticas actuales no cubren todas las expectativas deseadas: 1) éxito terapéutico en la mayoría de los pacientes, 2) escasos o nulos efectos adversos, 3) mínimo porcentaje de contraindicaciones, y 4) costo que permita la accesibilidad a la mayoría de los pacientes. Los inhibidores de la enzima de conversión de la angiotensina han comprobado tener efectos antifibrogénicos en otros órganos, dichos hallazgos nos permitieron especular con su posible utilidad en el tratamiento de la cirrosis. Se trabajó en un modelo animal de injuria hepática crónica sin fenómenos de reversibilidad espontánea. El presente trabajo demostró que el enalapril previene el proceso fibrogénico una vez desencadenada la injuria celular hepática. Asimismo, se sugiere que la prolongación del tiempo de tratamiento mejora aún más la respuesta inicial. El enalapril también resultó efectivo en éste modelo en la reversión de la cirrosis recientemente constituida. Se evaluaron algunos probables mecanismos de acción del fármaco sobre la fibrogénesis hepática. El tratamiento disminuyó el grado de fibrosis, mejoró las alteraciones histoarquitecturales propias del proceso, disminuyó el porcentaje de las principales células implicadas en la fibrogénesis y modificó la expresión proteica de mediadores profibrogénicos y de activación celular... (TRUNCADO) (AU)