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1.
Infect Immun ; 88(9)2020 08 19.
Artículo en Inglés | MEDLINE | ID: mdl-32601108

RESUMEN

Chlamydia trachomatis infection of the human fallopian tubes can lead to damaging inflammation and scarring, ultimately resulting in infertility. To study the human cellular responses to chlamydial infection, researchers have frequently used transformed cell lines that can have limited translational relevance. We developed a primary human fallopian tube epithelial cell model based on a method previously established for culture of primary human bronchial epithelial cells. After protease digestion and physical dissociation of excised fallopian tubes, epithelial cell precursors were expanded in growth factor-containing medium. Expanded cells were cryopreserved to generate a biobank of cells from multiple donors and cultured at an air-liquid interface. Culture conditions stimulated cellular differentiation into polarized mucin-secreting and multiciliated cells, recapitulating the architecture of human fallopian tube epithelium. The polarized and differentiated cells were infected with a clinical isolate of C. trachomatis, and inclusions containing chlamydial developmental forms were visualized by fluorescence and electron microscopy. Apical secretions from infected cells contained increased amounts of proteins associated with chlamydial growth and replication, including transferrin receptor protein 1, the amino acid transporters SLC3A2 and SLC1A5, and the T-cell chemoattractants CXCL10, CXCL11, and RANTES. Flow cytometry revealed that chlamydial infection induced cell surface expression of T-cell homing and activation proteins, including ICAM-1, VCAM-1, HLA class I and II, and interferon gamma receptor. This human fallopian tube epithelial cell culture model is an important tool with translational potential for studying cellular responses to Chlamydia and other sexually transmitted pathogens.


Asunto(s)
Células Epiteliales/inmunología , Regulación de la Expresión Génica/inmunología , Interacciones Microbiota-Huesped/inmunología , Linfocitos T/inmunología , Adulto , Sistema de Transporte de Aminoácidos ASC/genética , Sistema de Transporte de Aminoácidos ASC/inmunología , Antígenos CD/genética , Antígenos CD/inmunología , Biomarcadores/metabolismo , Quimiocina CCL5/genética , Quimiocina CCL5/inmunología , Quimiocina CXCL10/genética , Quimiocina CXCL10/inmunología , Quimiocina CXCL11/genética , Quimiocina CXCL11/inmunología , Infecciones por Chlamydia/genética , Infecciones por Chlamydia/inmunología , Infecciones por Chlamydia/microbiología , Chlamydia trachomatis/crecimiento & desarrollo , Chlamydia trachomatis/inmunología , Células Epiteliales/microbiología , Trompas Uterinas/citología , Trompas Uterinas/cirugía , Femenino , Cadena Pesada de la Proteína-1 Reguladora de Fusión/genética , Cadena Pesada de la Proteína-1 Reguladora de Fusión/inmunología , Antígenos de Histocompatibilidad Clase I/genética , Antígenos de Histocompatibilidad Clase I/inmunología , Antígenos de Histocompatibilidad Clase II/genética , Antígenos de Histocompatibilidad Clase II/inmunología , Interacciones Microbiota-Huesped/genética , Humanos , Molécula 1 de Adhesión Intercelular/genética , Molécula 1 de Adhesión Intercelular/inmunología , Antígenos de Histocompatibilidad Menor/genética , Antígenos de Histocompatibilidad Menor/inmunología , Modelos Biológicos , Cultivo Primario de Células , Receptores de Interferón/genética , Receptores de Interferón/inmunología , Receptores de Transferrina/genética , Receptores de Transferrina/inmunología , Salpingectomía , Linfocitos T/microbiología , Molécula 1 de Adhesión Celular Vascular/genética , Molécula 1 de Adhesión Celular Vascular/inmunología , Receptor de Interferón gamma
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