EXPRESIÓN GUS EN EXPLANTES DE Solanum phureja (Juz. et. Buk) Var. Criolla Colombia , TRANSFORMADOS CON Agrobacterium tumefaciens / Gus Expression in Solanum phureja Explants (Juz. et. Buk) Cultivar Criolla Colombia , Transformed with Agrobacterium tumefaciens

RESUMEN

La expresión transitoria y estable del gen gusA-intron en explantes internodales de papa criolla variedad Criolla Colombia cocultivados con Agrobacterium tumefaciens es reportada. Con el fin de determinar la susceptibilidad de esta variedad a la transformación mediada por A. tumefaciens, explantes internodales de Solanum phureja fueron infectados con la cepa LBA4404 de A. tumefaciens que contiene el plásmido pCAMBIA2301. Este plásmido contiene el gen ntpII que confiere resistencia a kanamicina y el gen reportero gusA-intron. La selección de los explantes potencialmente transgénicos fue realizada en medios con kanamicina. La eficiencia de transformación estable y transitoria fue calculada con base en la actividad GUS (ß-glucuronidasa), detectada por el ensayo histoquímico X-gluc. La expresión transitoria y estable del gen gusA-intron fue observada en células del explante más bien que en tejidos completos. Estos resultados demuestran que la papa criolla (S. phureja Juz. et. Buk) variedad Criolla Colombia es susceptible a la infección por A. tumefaciens.

ABSTRACT

The stable and transient expression of the gusA-intron reporter gene in internodal explants of "Papa Criolla" cultivar Criolla Colombia co-cultivated with Agrobacterium tumefaciens is reported. In order to determine the susceptibility of this cultivar to the A. tumefaciens-mediated transformation, internodal explants of Solanum phureja were infected by A. tumefaciens containing the vector pCAMBIA2301. This vector contains the kanamycin resistance gene ntpII and the reporter gene gusA-intron. The selection of potential transgenic explants was performed on kanamycin-containing media. The stable and transient transformation efficiency was calculated on the basis of the GUS (ß-glucuronidase) activity, detected by the histochemical X-Gluc essay. Transient and stable expression of the gusA-intron gene is observed in explants cells rather than in whole tissues. Nonetheless, these results demonstrated that "Papa Criolla" (Solanum phureja Juz. et. Buk) Cultivar Criolla Colombia is susceptible to the Agrobacterium tumefaciens infection.