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Protocol to select conformation-specific intracellular antibodies for targeted protein degradation in an engineered cell line.
Bery, Nicolas; Favre, Gilles; Olichon, Aurélien.
Afiliação
  • Bery N; Centre de Recherche en Cancérologie de Toulouse (CRCT), UMR1037 INSERM - Université Toulouse III - ERL5294 CNRS, Toulouse, 31100, France.
  • Favre G; Centre de Recherche en Cancérologie de Toulouse (CRCT), UMR1037 INSERM - Université Toulouse III - ERL5294 CNRS, Toulouse, 31100, France.
  • Olichon A; Département de Biologie, Institut Claudius Regaud, Toulouse, 31100, France.
STAR Protoc ; 2(1): 100249, 2021 03 19.
Article em En | MEDLINE | ID: mdl-33437969
ABSTRACT
Here, we provide a protocol for the selection of conformation-specific intracellular antibody degraders using a cell-based screening method. We applied this protocol to select antibody-based degraders targeting the active form of the small GTPase RHOB (i.e., RHOB-GTP) using an engineered H2882 cell line. The protocol can be used to study the function of RHOB active conformation in various cellular settings. This protocol can be broadly applied to select any kind of intracellular antibody degraders, regardless of conformational state. For complete details on the use and execution of this protocol, please refer to Bery et al. (2019).
Assuntos
Palavras-chave

Texto completo: 1 Coleções: 01-internacional Base de dados: MEDLINE Assunto principal: Proteína rhoB de Ligação ao GTP / Anticorpos de Cadeia Única / Engenharia Celular / Proteólise Limite: Humans Idioma: En Revista: STAR Protoc Ano de publicação: 2021 Tipo de documento: Article País de afiliação: França

Texto completo: 1 Coleções: 01-internacional Base de dados: MEDLINE Assunto principal: Proteína rhoB de Ligação ao GTP / Anticorpos de Cadeia Única / Engenharia Celular / Proteólise Limite: Humans Idioma: En Revista: STAR Protoc Ano de publicação: 2021 Tipo de documento: Article País de afiliação: França