RESUMO
The biocidal activity of three strains of Brevibacillus laterosporus upon the post-embryonic developmental stages of Chrysomya megacephala was evaluated. Bioassays were performed to verify lethal and sub-lethal effects including ultra-structural changes in the midgut. Among the strains assayed, Shi3 presented the highest larval mortality rates, achieving 70% at a concentration of 1×108 spores/g of diet. Transmission electron microscopy revealed intestinal alterations caused by all strains tested. The findings of this study indicate that Shi3 represents a promising tool for use in the biocontrol of C. megacephala.
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Agentes de Controle Biológico , Brevibacillus/patogenicidade , Dípteros/microbiologia , Animais , Bioensaio , Dípteros/ultraestrutura , Larva/microbiologia , Microscopia Eletrônica de TransmissãoRESUMO
Antimicrobial-resistant bacteria were isolated from muscoid dipterans collected at five different areas of Rio de Janeiro city, in proximity to hospitals. Extracts obtained by maceration of flies were diluted and used as inocula for different culture media, with or without antibiotic (ceftriaxone 1 mg/L) supplementation. Purified isolates were submitted to antimicrobial susceptibility testing (AST). Bacterial identification was performed by MALDI TOF Microflex LT (Bruker Daltonics). A total of 197 bacterial strains were obtained from 117 dipterous muscoids. Forty-two flies (35.9%) carried bacteria resistant to at least one antimicrobial, while 7 insects (5.9%) carried multidrug-resistant bacteria (MDR), which were all members of the family Enterobacteriaceae. Among 10 MDR bacteria (5%), 5 strains (2,5%) were positive by PCR for one or more of the following antibiotic resistance genes: aac(6')-Ib, blaTEM-1, blaCTX-M-15, blaKPC-2 and blaNDM-1. Analysis of variance (ANOVA) and cluster analysis compared the number of resistant isolates per collection point and showed that a single location was statistically different from the others with regard to resistance. Although there are still no criteria to determine the environmental contamination by resistant bacteria the fact that they have been isolated from flies is an indication of a disseminated contamination. As such, these insects may be useful in monitoring programs of antibiotic resistance in non-hospital environments, where they could function as sentinels.
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Bactérias/isolamento & purificação , Dípteros/microbiologia , Farmacorresistência Bacteriana Múltipla , Animais , Brasil , Humanos , Testes de Sensibilidade MicrobianaRESUMO
INTRODUCTION: This study evaluated whether different strains of Brevibacillus laterosporus could be used to control larvae of the blowfly Chrysomya megacephala, a pest that affects both human and animal health. METHODS: Mortality rates were recorded after 1-mL suspensions of sporulated cells of 14 different strains of B. laterosporus were added to 2.5g of premixed diet consisting of rotting ground beef fed to first instar larvae of C. megacephala. All bioassays were performed using 10 larvae per strain, with a minimum of three replicates for each bioassay. Larval mortality was recorded daily up to seven days. RESULTS: Strains Bon 707, IGM 16-92, and Shi 3 showed the highest toxicity toward the larvae producing 70.5%, 64.5%, and 51.6% of larval mortality, respectively, which was significantly higher than that in the control group (p < 0.05). In contrast, strains NRS 1642, NRS 661, NRS 590 BL 856, NRS 342, ATCC 6457, Bon 712, and NRS 1247 showed limited or no pathogenic activity against the target larvae. CONCLUSIONS: Our preliminary data indicated that B. laterosporus could be used to develop bioinsecticides against C. megacephala.
Assuntos
Brevibacillus/fisiologia , Dípteros/microbiologia , Controle Biológico de Vetores/métodos , Animais , Bioensaio , Dípteros/classificação , Larva/microbiologiaRESUMO
: This study evaluated whether different strains of
Mortality rates were recorded after 1-mL suspensions of sporulated cells of 14 different strains of
Strains Bon 707, IGM 16-92, and Shi 3 showed the highest toxicity toward the larvae producing 70.5%, 64.5%, and 51.6% of larval mortality, respectively, which was significantly higher than that in the control group (p < 0.05). In contrast, strains NRS 1642, NRS 661, NRS 590 BL 856, NRS 342, ATCC 6457, Bon 712, and NRS 1247 showed limited or no pathogenic activity against the target larvae.
Our preliminary data indicated that
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Animais , Brevibacillus/fisiologia , Dípteros/microbiologia , Controle Biológico de Vetores/métodos , Bioensaio , Dípteros/classificação , Larva/microbiologiaRESUMO
Dípteros muscoides desempenham papel significante na disseminação de microrganismos. O principal objetivo deste estudo foi isolar bactérias resistentes aos antimicrobianos, a partir de dípteros muscoides, coletados em 5 pontos diferentes: no entorno e no lixo de um hospital municipal, na Zona Norte do Rio de Janeiro, assim como na Fiocruz e Quinta da Boa Vista, Rio de Janeiro. As moscas foram capturadas utilizando armadilhas de garrafa pet contendo isca atrativa, levadas ao Laboratório de Entomologioa Médica e Forense, IOC/Fiocruz, e identificadas utilizando chaves dicotômicas. Após esse procedimento foram maceradas em salina 0,85% estéril. Este extrato foi diluído e plaqueado em diferentes meios de cultura, contendo ou não antibiótico (ceftriaxona e polimixina, a 1 mg/L e 8 mg/L, respectivamente). Foram realizados o isolamento, a purificação das colônias e o teste de sensibilidade aos antimicrobianos (TSA) por disco difusão, utilizando os antibióticos cefepime, ceftazidima, cefoxitina, meropenem, gentamicina, tetraciclina e ciprofloxacina, cloranfenicol e trimetoprim-sulfametoxazol (Sensifar). Foram realizadas 16 coletas, e um total de 197 isolados bacterianos foram obtidos a partir dos 117 dipteros muscoides. Os isolados foram identificados por sequenciamento parcial do gene 16S rRNA e por MALDITOF-MS (Brucker). Do total, 46 isolados apresentaram perfil de não sensibilidade (perfil resistente e intermediário) a pelo menos dois antimicrobianos diferentes, enquanto dez isolados foram classificados como multirresistentes
Análise de cluster feita pelo programa Statistica revelou diferença significativa entre o Ponto 5 e os demais pontos, quanto ao número de isolados não sensíveis. Setenta e três amostras foram submetidas para detecção de genes de resistência aos ß-lactâmicos, aminoglicosídeos e colistina, através de PCR. Destas, apenas sete foram positivas. Três cepas de importância foram encontradas: Raoultella ornithinolytica positiva para o gene blaKPC-2, e para os principais elementos do transposon Tn4401, além dos grupos de incompatibilidade plasmideal IncK; Escherichia coli positiva para o gene blaNDM-1, Inc A/C, a partir da qual foram obtidas transconjugantes utilizando E. coli J53 como receptora e K. pneumoniae positiva para blaNDM-1 e grupo IncY. Todas as três cepas foram aac(6')-Ib e Int1 (integron de classe 1) 10 positivas. O sequenciamento total da cepa 23 (K. pneumoniae ST 3997 blaNDM-1 positiva) revelou a presença de diversos genes de resistências. A não hibridização com sonda específica e não obtenção de transconjugantes sugerem a presença cromossomal de blaNDM-1. Através da técnica de PFGE, analisamos o perfil genético dos isolados de origem clínica (urinocultura e hemocultura) e os isolados obtidos a partir de mosca, pertencentes à espécie K. pneumoniae, porém não foi detectado o mesmo clone nos dois ambientes. Nesse sentido, destaca-se a importância das moscas na disseminação (e reservatórios) de bactérias resistentes aos antimicrobianos. (AU)
Assuntos
Bactérias , Farmacorresistência Bacteriana , Dípteros , Vetores de Doenças , Anti-InfecciososRESUMO
Chrysomya megacephala, conhecida como mosca-varejeira, tem importânciapara a saúde pública devido ao fato de os adultos serem potenciais vetores depatógenos entéricos, e causadores de miíase, tanto em humanos quanto emanimais. Além disso, trata-se de uma espécie exótica invasora. Os poucos estudosque abordam o controle de C. megacephala empregam os inseticidas químicos,como os piretroides e os organofosfatos e o uso de parasitoides e metabolitossecundßrios de plantas. Bactérias entomopatogênicas são uma alternativainteligente para a redução do uso de agroquímicos, pois possuem maior eficßcia,menor custo e benefícios ambientais, como segurança para os humanos e outrosorganismos não alvo. Nesse sentido, este trabalho avaliou a bioatividade deBrevibacillus laterosporus e Bacillus thuringiensis sobre o desenvolvimento pósembrionßriode Chrysomya megacephala. Foram testadas (bioensaios preliminares)15 cepas da espécie Brevibacillus laterosporus e 3 cepas de Bacillus thuringiensisvar. israelensis contra larvas de primeiro instar de C. megacephala. Anßlisesestatísticas indicaram maior atividade larvicida das cepas Bon 707, IGM 16-92 e Shi3 de B. laterosporus, causando mortalidade significativa e superior a 50%. Foramrealizados bioensaios completos analisando os efeitos letais (mortalidade larval,pupal e total) e subletais (período de desenvolvimento pós-embrionßrio em dias emédia de peso das larvas), das cepas Bon 707, Shi 3 e IGM 16-92. Suspensões deesporos das cepas Shi 3 e Bon 707 apresentaram taxas de mortalidade superiores.A anßlise por microscopia eletrônica de transmissão revelou alterações intestinaisdecorrentes da ingestão pelas larvas de esporos das cepas Bon 707 e IGM 16-92...
Chrysomya megacephala, known as a blowfly species, is important for publichealth due to the fact that adults are potential vectors of enteric pathogens, andcause myiasis, both in humans and in animals. Furthermore, it is an exotic invasivespecies. The few studies that address the control of C. megacephala employchemical insecticides, such as pyrethroids and organophosphates, the use ofparasitoids and secondary plant metabolites. Entomopathogenic bacteria are a smartalternative for reducing the use of pesticides because they have greater efficiency,lower cost and environmental benefits such as safety for humans and other nontargetorganisms. Therefore, this study evaluated the bioactivity of Brevibacilluslaterosporus and Bacillus thuringiensis strains on the post-embryonic developmentChrysomya megacephala. Fifteen strains of Brevibacillus laterosporus species and 3strains of Bacillus thuringiensis var. israelensis were tested (preliminary bioassays)against first instar larvae of C. megacephala. Statistical analysis indicated higherlarvicidal activity of the strains Bon 707, IGM 16-92 and Shi 3 of B. laterosporus,causing significant mortality, higher than 50%. Complete bioassays analyzing thelethal effects (larval, pupal and total mortality) and sublethal effects (period in days ofpost-embryonic development and mean weight of larvae) were performed with strainsBon 707, Shi 3 and IGM 16-92. Spore suspensions of strains Bon 707 and Shi 3presented higher mortality rates. Analysis by transmission electron microscopyrevealed intestinal alterations resulting from the intake of spores of Bon 707 and IGM16-92 strains by the larvae...