RESUMEN
Cost-effective production of enzymes for industrial processes makes the appropriate selection of the host-vector expression system critical. We have developed two systems for the bulk production of bleaching enzymes from thermophiles. Kluyveromyces lactis has been developed as a secretion host employing expression vectors based on the 2mu-like plasmid pKD1 of Kluyveromyces drosophilarium. Our second system involves the filamentous fungus Trichoderma reesei. Fusion and nonfusion vectors have been constructed using the strong cellobiohydrolase 1 (cbh1) promoter. The KEX2 protease cleavage site and a 6 x HIS-tag have been incorporated to facilitate both cleavage and purification of the mature foreign proteins.
Asunto(s)
Enzimas/genética , Hongos/enzimología , Secuencia de Aminoácidos , Bacterias/enzimología , Biotecnología/métodos , Enzimas/aislamiento & purificación , Hongos/genética , Calor , Kluyveromyces/enzimología , Modelos Moleculares , Datos de Secuencia Molecular , Reacción en Cadena de la Polimerasa/métodos , Conformación Proteica , Señales de Clasificación de Proteína , Proteínas Recombinantes/biosíntesis , Proteínas Recombinantes/genética , Proteínas Recombinantes/aislamiento & purificación , Trichoderma/enzimología , Xilano Endo-1,3-beta-Xilosidasa , Xilosidasas/biosíntesis , Xilosidasas/genética , Xilosidasas/aislamiento & purificaciónRESUMEN
This is a convergent-assistance research, which has as its objective the identification of the factors affecting the quality of life of people suffering from Chronic Kidney Failure and who are undergoing hemodialysis. Data were collected in a health education program, developed for a companionship group, across hemodialysis sessions. During the analysis, four categories were identified, representing the elements that are considered as causes for the life quality conditions of those people: health assistance; acceptance and coping with the health condition; support received, and hoping for a better future. In spite of living with an illness which has important consequences on the physical well-being and social roles, persons referred to a life where quality can be achieved, although sometimes it may be difficult to perceive or conquer such quality.
Asunto(s)
Fallo Renal Crónico/terapia , Calidad de Vida , Diálisis Renal , Actitud , Emociones , Humanos , Fallo Renal Crónico/psicología , Calidad de la Atención de Salud , Diálisis Renal/psicología , Apoyo SocialRESUMEN
Objetivo de conhecer a trajetória do Fórum Catarinense das Escolas de Enfermagem na formação profissional enfermagem em Santa Catarina. Pesquisa qualitativa, revisão bibliográfica. Utilizou-se como fonte de dados, o acervo de documentos da Associação Brasileira de Enfermagem - Seção Santa Catarina, no recorte temporal de 1991 a 2011. A coleta de dados ocorreu entre novembro e dezembro de 2011, em informes e documentos formais da instituição. O método para organização dos dados, utiliza-se a Análise de Conteúdo. Emergiram duas categorias:Temáticas do Fórum Catarinense das Escolas de Enfermagem e Contribuições do Fórum Catarinense das Escolas de Enfermagem na formação profissional. Os resultados apresentam a preocupação em desenvolver, temas que busquem instrumentalizar as escolas de formação e a formação de parcerias.Conclui-se que houve influência do Fórum na formação da enfermagem catarinense, busca-se desenvolver temas da assistência, inovações tecnológicas e políticas de saúde.
Asunto(s)
Historia del Siglo XX , Historia de la Enfermería , Educación en Enfermería , Enfermería , Facultades de EnfermeríaRESUMEN
Yeast cells of the human pathogenic fungus Paracoccidioides brasiliensis strain Pb01 were transformed to hygromycin B resistance using the plasmid pAN7.1. Transformation was achieved by electroporation, with intact or linearized plasmid DNA. The fungus was transformed using 200 mM manitol, 5 or 7 kV/cm field strength, 25 microF capacitance, 400 omega resistance, 5 microg plasmid DNA and 10(7) yeast cells in 400 microl, and selected in BHI medium overlaid with 30 microg/ml hygromycin B (hygB). Mitotic stability was assessed by growing transformants on non-selective BHI medium, followed by plating on hygromycin B (30 microg/ml). Transformants were analyzed by PCR and Southern blotting, confirming the hph gene integration into the transformants genome. A low level of stability of the integrated hph sequence in the transformant genomes was observed, probably because of the multinuclearity of P. brasiliensis yeast cells.
Asunto(s)
Farmacorresistencia Fúngica/genética , Higromicina B/farmacología , Paracoccidioides/efectos de los fármacos , Paracoccidioides/genética , Plásmidos , Transformación Genética , Southern Blotting , ADN de Hongos/análisis , Electroporación , Reacción en Cadena de la Polimerasa , Recombinación GenéticaRESUMEN
Bulk production of xylanases from thermophilic microorganisms is a prerequisite for their use in industrial processes. As effective secretors of gene products, fungal expression systems provide a promising, industrially relevant alternative to bacteria for heterologous enzyme production. We are currently developing the yeast Kluyveromyces lactis and the filamentous fungus Trichoderma reesei for the extracellular production of thermophilic enzymes for the pulp and paper industry. The K. lactis system has been tested with two thermophilic xylanases and secretes gram amounts of largely pure xylanase A from Dictyoglomus thermophilum in chemostat culture. The T. reesei expression system involves the use of the cellobiohydrolase I (CBHI) promoter and gene fusions for the secretion of heterologous thermostable xylanases of both bacterial and fungal origin. We have reconstructed the AT-rich xynB gene of Dictyoglomus thermophilum according to Trichoderma codon preferences and demonstrated a dramatic increase in expression. A heterologous fungal gene, Humicola grisea xyn2, could be expressed without codon modification. Initial amounts of the XYN2 protein were of a gram per liter range in shake-flask cultivations, and the gene product was correctly processed by the heterologous host. Comparison of the expression of three thermophilic heterologous microbial xylanases in T. reesei demonstrates the need for addressing each case individually.
Asunto(s)
Bacterias/enzimología , Kluyveromyces/genética , Trichoderma/genética , Xilosidasas/genética , Secuencia de Aminoácidos , Secuencia de Bases , ADN Bacteriano , Electroforesis en Gel de Poliacrilamida , Proteínas Recombinantes/genética , Homología de Secuencia de Aminoácido , Xilano Endo-1,3-beta-Xilosidasa , Xilosidasas/químicaRESUMEN
We report the cloning and sequence analysis of a genomic clone encoding a Paracoccidioides brasiliensis ClpB chaperone homologue (PbClpB). The clpb gene was identified in a lambda Dash II library. Sequencing of Pbclpb revealed a long open reading frame capable of encoding a 792 amino acid, 87.9 kDa protein, pI of 5.34. The predicted polypeptide contains several consensus motifs of the ClpB proteins. Canonical sequences such as two putative nucleotide-binding sites, chaperonins ClpA/B signatures and highly conserved casein kinase phosphorylation domains are present. ClpB is 69% to 49% identical to members of the ClpB family from several organisms from prokaryotes to eukaryotes. The transcript of PbclpB was detected as a mRNA species of 3.0 kb, preferentially expressed in the yeast parasitic phase of the fungus. A 89 kDa protein was also detected in yeast cells of P. brasiliensis.
Asunto(s)
Proteínas de Escherichia coli , Proteínas de Choque Térmico/química , Proteínas de Choque Térmico/genética , Paracoccidioides/metabolismo , Secuencia de Aminoácidos , Secuencia de Bases , Clonación Molecular , Endopeptidasa Clp , Proteínas de Choque Térmico/metabolismo , Respuesta al Choque Térmico , Humanos , Datos de Secuencia Molecular , Paracoccidioides/genética , Paracoccidioides/crecimiento & desarrollo , Alineación de Secuencia , Análisis de Secuencia de ADN , Homología de Secuencia de AminoácidoRESUMEN
Resumo: Inicialmente, o plasmidio pBH100 (95 Kb) que codifica resistência, canamicina, cloranfenicol, estreptomicina e mercúrio inorgânico, foi transferido, por conjugaçäo, da linhagem selvagem Escherichia coli BH100 para a receptora. E. coli 5K. Para clonar o operon Hg plasmideos recombinantes foram construidos in vitro a partira ligaçäo (ligase) de fragmentos de pBH100, contendo os marcadores de resistência ao mercúrio, com o veiculo de clonagem pAT153, ambos digeridos coma endonuclease BamH I. Após transformaçäo de Escherihia coli 5K análises genéticas e eletroforética permitiram a detecçäo dos plasmídios recombinantes pATHg 1, pATHg2, pATHg3. Análise de restriçäo do plasmídio pATHg1, digerido com BamHI e Hind III, evidenciou três bandas de 24, 4 e 1 Kb e duas bandas de 21 e 8 Kb, respectivamente. O pATHg3 apresentou menor tamanho (12 Kb) e menor estabilidade 37 (por cento)(au)
Asunto(s)
Animales , Clonación de Organismos , Escherichia coli/efectos de los fármacos , Mercurio/efectos adversos , Técnicas In VitroRESUMEN
Trata-se de uma revisão do conceito de grupo e sua aplicabilidade no desenvolvimento de educação em saúde. Definimos grupo como interação entre duas ou mais pessoas, com propósitos comuns, que se influenciam mutuamente na construção de um viver mais saudável. A partir da literatura e da reflexão de nossa prática assistencial, propomos quatro tipos de grupos que podem ser utilizados com diferentes propósitos e em diferentes situações, visando o desenvolvimento da educação em saúde: grupo de convivência, grupo comunitário, grupo terapêutico e grupo focal. Trabalhar com educação em saúde na Enfermagem através de grupos vem favorecendo resultados efetivos na produção de um viver mais saudável...
A review of the group concept is offered, and its applicability in the development of education in health. Group is defined as the interaction between two or more persons, having common purposes, mutually influenced in the building up of a healthier living. Staring from the literature and reflection of our assistance practice, four types of groups are suggested, capable of being utilized with different purposes and within different situations, seeking to develop education in health: joint-living group, community group, therapeutic group, and focal group. To work with health education in Nursing through groups has favored effective results in the production of a healthier living...
Se trata de una revisión del concepto de grupo y su aplicabilidad en el desarrollo de la educación en Salud. Definimos grupo como una interacción entre dos o más personas, con propósitos comunes, que influyen recíprocamente en la construcción de un vivir más saludable. A partir de la literatura y de la reflexión sobre nuestra práctica asistencial, proponemos cuatro tipos de grupos que pueden ser utilizados con diferentes propósitos y en diferentes situaciones, en el desarrollo de la educación en salud : grupo de convivencia, grupo comunitario, grupo terapéutico y grupo focal.. Trabajar con educación en salud en enfermería mediante grupos está ofreciendo resultados efectivos en la producción de un vivir más saludable...
Asunto(s)
Educación en Salud , Enfermería , Grupo de Atención al Paciente , Grupos FocalesRESUMEN
Trata-se de uma pesquisa convergente-assistencial que teve como objetivo conhecer os elementos que influenciam a qualidade de vida de pessoas com Insuficiência Renal Crônica, em tratamento hemodialítico. Os dados foram obtidos a partir de uma proposta de educação em saúde, desenvolvida em um grupo de convivência, durante o tratamento hemodialítico. Decorrente do processo de análise foram identificadas quatro categorias que representam os elementos considerados como interferindo na qualidade de vida dessas pessoas: assistência à saúde; processo de aceitação e de enfrentamento da condição de saúde; apoio recebido e esperança de um futuro melhor. Mesmo vivendo com uma doença que tem repercussões importantes no bem-estar físico e no papel social, as pessoas se referiram a uma vida onde existe qualidade, apesar de muitas vezes ser difícil perceber ou conquistar essa qualidade.