Detection of Plasmodium falciparum and Plasmodium vivax subclinical infection in non-endemic region: implications for blood transfusion and malaria epidemiology.

BACKGROUND: In Brazil, malaria is endemic in the Amazon River basin and non-endemic in the extra-Amazon region, which includes areas of São Paulo state. In this state, a number of autochthonous cases of malaria occur annually, and the prevalence of subclinical infection is unknown. Asymptomatic infections may remain undetected, maintaining transmission of the pathogen, including by blood transfusion. In these report it has been described subclinical Plasmodium infection in blood donors from a blood transfusion centre in São Paulo, Brazil. METHODS: In this cross-sectional study, representative samples of blood were obtained from 1,108 healthy blood donors at the Fundação Pró-Sangue Hemocentro de São Paulo, the main blood transfusion centre in São Paulo. Malaria exposure was defined by the home region (exposed: forest region; non-exposed: non-forest region). Real-time PCR was used to detect Plasmodium falciparum and Plasmodium vivax. Subclinical malaria cases were geo-referenced. RESULTS: Eighty-four (7.41%) blood donors tested positive for Plasmodium; 57 of these were infected by P. falciparum, 25 by P. vivax, and 2 by both. The prevalence of P. falciparum and P. vivax was 5.14 and 2.26, respectively. The overall prevalence ratio (PR) was 3.23 (95% confidence interval (CI) 2.03, 5.13); P. falciparum PR was 16.11 (95% CI 5.87, 44.21) and P. vivax PR was 0.47 (95% CI 0.2, 1.12). Plasmodium falciparum subclinical malaria infection in the Atlantic Forest domain was present in the mountain regions while P. vivax infection was observed in cities from forest-surrounded areas. CONCLUSIONS: The presence of Plasmodium in healthy blood donors from a region known as non-endemic, which is important in the context of transfusion biosafety, was described. Infected recipients may become asymptomatic carriers and a reservoir for parasites, maintaining their transmission. Furthermore, P. falciparum PR was positively associated with the forest environment, and P. vivax was associated with forest fragmentation.

Intermittent target inhibition with dasatinib 100 mg once daily preserves efficacy and improves tolerability in imatinib-resistant and -intolerant chronic-phase chronic myeloid leukemia.

PURPOSE: Dasatinib is a BCR-ABL inhibitor, 325-fold more potent than imatinib against unmutated BCR-ABL in vitro. Phase II studies have demonstrated efficacy and safety with dasatinib 70 mg twice daily in chronic-phase (CP) chronic myelogenous leukemia (CML) after imatinib treatment failure. In phase I, responses occurred with once-daily administration despite only intermittent BCR-ABL inhibition. Once-daily treatment resulted in less toxicity, suggesting that toxicity results from continuous inhibition of unintended targets. Here, a dose- and schedule-optimization study is reported. PATIENTS AND METHODS: In this open-label phase III trial, 670 patients with imatinib-resistant or -intolerant CP-CML were randomly assigned 1:1:1:1 between four dasatinib treatment groups: 100 mg once daily, 50 mg twice daily, 140 mg once daily, or 70 mg twice daily. RESULTS: With minimum follow-up of 6 months (median treatment duration, 8 months; range, < 1 to 15 months), marked and comparable hematologic (complete, 86% to 92%) and cytogenetic (major, 54% to 59%; complete, 41% to 45%) response rates were observed across the four groups. Time to and duration of cytogenetic response were similar, as was progression-free survival (8% to 11% of patients experienced disease progression or died). Compared with the approved 70-mg twice-daily regimen, dasatinib 100 mg once daily resulted in significantly lower rates of pleural effusion (all grades, 7% v 16%; P = .024) and grade 3 to 4 thrombocytopenia (22% v 37%; P = .004), and fewer patients required dose interruption (51% v 68%), reduction (30% v 55%), or discontinuation (16% v 23%). CONCLUSION: Dasatinib 100 mg once daily retains the efficacy of 70 mg twice daily with less toxicity. Intermittent target inhibition with tyrosine kinase inhibitors may preserve efficacy and reduce adverse events.

Dez anos de experiência em controle de qualidade em imuno-hematologia / Ten years of experience of quality control in immunohematology

A medicina transfusional tem como objetivo garantir a qualidade e quantidade do sangue, componentes e serviços oferecidos à comunidade, e, dentro desse contexto, a análise dos reagentes imuno-hematológicos é crítica para a realização dos testes pré-transfusionais e, consequentemente, uma transfusão segura. É responsabilidade do controle de qualidade o constante aperfeiçoamento de testes que analisam a qualidade dos reagentes e equipamentos utilizados. Esse trabalho tem por objetivo apresentar os resultados alcançados em dez anos de experiência do Departamento de Controle de Qualidade em Imuno-hematologia da Fundação Pró-Sangue / Hemocentro de São Paulo. No período de janeiro de 1997 a dezembro de 2007 foram realizadas análises em 3.417 reagentes imuno-hematológicos por ocasião da aquisição do reagente e por solicitação de reavaliação (durante o uso). As análises incluíram desde a inspeção visual no recebimento a testes laboratoriais específicos para cada tipo de reagente. Dos 3.417 lotes analisados (média=310/ano, mediana=252/ano), 94 (2,7 por cento) foram reprovados (média=8,54/ano, mediana=7,00 ± 7,79/ano). Uma vez aprovado pelo controle de qualidade à aquisição, nenhum reagente imunohematológico foi reprovado durante o uso desde 2004. Podemos concluir que, para implementação de um sistema de controle de qualidade de reagentes imuno-hematológicos, não é necessário uso de reagentes ou equipamentos altamente especializados, pois os mesmos são utilizados na rotina laboratorial, como também não envolvem alta complexidade na execução das análises. Podemos enfim considerar que a implementação do controle de qualidade em Imuno-hematologia contribui para o aumento da segurança transfusional e é factível de realização nos mais diferentes níveis de complexidade dos serviços hemoterápicos.

Transfusion medicine has the purpose of guaranteeing the quality and quantity of blood, blood derivatives and services offered to the community. Thus, the analysis of serological reagents is critical in pre-transfusion testing and, consequently, reliable transfusions. A constant improvement in the tests that analyze the quality of reagents and equipment utilized is the responsibility of quality control. This paper aims at presenting the results and experience achieved over 10 years in the Department of Quality Control in Immunohematology at Fundação Pró-Sangue / Hemocentro de São Paulo. In the period of January 1997 to December 2007 we carried out analyses of 3,417 serological reagents at acquisition and/or during their use. The analyses included from visual inspection to specific laboratory tests for each kind of reagent. Of the 3,417 lots analyzed (mean = 310/year, median = 252/year), 94 (2.7 percent - median=8.54/year) failed the tests. From 2004 to date, once the reagents were approved, none failed during use. The implementation of a quality control system with standardized techniques is important for the adequate utilization of serological reagents. This system accomplished by retroactive control of the reagents, contributed to the safety and reliability of results in immunohematology testing.

Detecção de Aspergillus sp pela técnica de PCR-nested em pacientes submetidos a transplante de medula óssea: [carta ao editor] / Detection of Aspergillus sp in bone marrow transplant patients by PCR-nested technique: [letter to editor]

Invasive aspergillosis is an important cause of mortality in long-term neutropenic patients, particularly after bone marrow (B.M.T.) and solid organ transplantation. More than 90% of invasive fungal infections in immunocompromised patients can be attributed to Candida and Aspergillus. To date, there is no fast, reliable and feasible test for Aspergillus infection detection in routine procedures. In the present report, a nested PCR technique, developed to detect Aspergillus infection, is described. In our study, the sensitivity, specificity, positive and negative values using this approach were 100%, 94.4%, 83.3%, and 100%, respectively.

Impacto da recusa de candidatos à doacão de sangue devido aos critérios para prevencão da doenca de Creutzfeldt-Jacob e sua variante / Impact of deferral criteria on prevention of Creutzfeldt-Jakob disease and its variant among blood donors in São Paulo, Brazil

A doenca de Creutzfeldt-Jacob (CJD) e sua variante (vCJD) são doencas neurológicas fatais, degenerativas, com longo período de incubacão. Recentemente, um possível caso de transmissão de vCJD por transfusão sangüínea foi descrito. A partir de 2001 adotamos critérios para recusa de candidatos baseados em dados da literatura, Portarias e Resolucões do Ministério da Saúde. Avaliamos retrospectivamente o porcentual de recusas anuais na triagem clínica de 1.015.587 candidatos à doacão, referentes aos critérios relacionados a CJD e vCJD, de janeiro de 2001 a dezembro de 2004. Este porcentual correspondeu a 0,0049 por cento em 2001, 0,0051 por cento em 2002, 0,092 por cento em 2003 e 0,098 por cento em 2004, representando recusa definitiva de 726 (0,068 por cento) candidatos. A causa mais freqüente de recusa por CJD ou vCJD foi permanência no Reino Unido > 6 meses (259 recusas) seguido de transplante de córnea (203 recusas) e uso de hormônio do crescimento de origem humana (151 recusas). Embora o número de recusas relacionados a CJD e sua variante seja baixo em nossa Instituicão, observamos um aumento gradativo anual, que provavelmente relaciona-se à adicão de novos critérios. Diferentemente de outros países, estas recusas não afetaram nosso estoque de sangue e componentes. Com os dados obtidos, consideramos que, na nossa populacão, podemos manter o "Princípio da Precaucão" sem causar prejuízo no fornecimento de sangue e componentes aos nossos pacientes.

Estudo de grupos sangüíneos em doadores de sangue caucasóides e negróides na cidade de Säo Paulo / Blood groups in caucasian and black blood donors from Säo Paulo, Brazil

Apesar do fato de que o grupo de mulatos representa um dos mais comuns grupos raciais encontrados näo só no Brasil, mais em vários outros países, existe pouca informaçäo sobre a distribuiçäo dos grupos sangüíneosnestes indivíduos. Foram estudados 2.462 doadores de sangue classificados como caucasóides, mulatos e negros conforme suas características antropológicas, bem como pelas suas informaçöes sobre seus ancestrais. Foram estudadas as freqüências fenotípicas para os sistemas de grupos sangüíneos ABO, Rh, P, Kell, Rh, Lutheran, Lewis, Duffy e Kidd. Näo foram encontradas diferenças estatisticamente significativas entre negros e mulatos para a maioria dos sistemas de grupos sangüíneos por nós estudados, com exceçäo dos seguintes fenótipos: P 1 positivo, Dccee, Le(a-b-), Js(a+b+),Js(a-b+),Fy(a-b-), Fy(a+b+) e Fy(a-b+). Por outro lado foi observada uma diferença estatisticamente significante entre caucasóides e negróides para os seguintes fenótipos eritrocitários: A, B, M+N-S+s-, M+N-S-s+, P1 positivo, ddccee, Dccee, Dccee, DCCee, DccEe, K+k+K-k+, Kp(a-b+), Kp(a+b+), Js(a-b+), Js(a+b-), Le (a-b+), Le(a-b-), Fy(a-b+), Fy(a+b+), Fy(a-b-), Jk(a+b-), Jk(a+b+) e Jk(a-b+). Os resultados encontrados para o grupo mulato foram intermediários entre caucasóides e negros, com forte influência negróide.

Controle de qualidade interno de regentes em imunohematologia: aspectos práticos / Internal quality control of immunohematological reagents: practical aspects

A hemoterapia tem buscado incessantemente o aumento da segurança transfusional. Para tanto tem envolvido, dentre outros, a padronização de testes que comprovem a qualidade dos reagentes utilizados nos serviços hemoterápicos, as análises, o uso e a manutenção de equipamentos apropriados e treinamento de funcionários. O controle de qualidade é essencial e indispensável para a obtenção de resultados confiáveis nos ensaios para os quais se destinam. Até o momento, não há descrição pré-estabelecida dos requisitos mínimos para os reagentes utilizados nos testes imuno-hematológicos pelo Ministério da Saúde. Este trabalho tem por objetivo apresentar os aspectos práticos que envolvem o controle de qualidade em imuno-hematologia, além de informações básicas sobre os principais reagentes imuno-hematológicos disponíveis no mercado brasileiro.

One of the main objectives of transfusion medicine is to promote safe transfusion. Continuous improvement involves the standardization of techniques used for quality control of reagents, adequate equipment evaluation and its maintenance and staff training. Quality control of reagents is critical for achieving reliable results in immunohematological testing. In Brazil, as far as we know, there are no minimum requirements for immunohematological reagent guidelines. This paper has the purpose of describing practical aspects of quality control in imunohematology, as well as providing information on the most common immunohematological reagents available on the Brazilian market.

Detecçäo precoce de recaída em transplante de medula óssea: revisäo da metodologia atual e uso da técnica de hibridizaçäo in situ (FISH) / Early detection of relapse in bone marrow transplantation. A review of the current diagnostic methodology and the use of in situ hybridization

O método tradicionalmente utilizado para detecçäo de quimerismo e de recaída precoce após transplante de medula óssea é a citogenética com bandeamento. Esta técnica tem como desvantagens o tempo de análise, que pode ser inaceitavelmente prolongado, e a dificuldade de quantificaçäo. A técnica de FISH (hibridizaçäo in situ fluorescente) pode se tornar uma excelente alternativa à citogenética convencional, já que pode ser executada em células em interfase, abreviando o tempo de análise e por fornecer resultados quantificados, permitindo a determinaçäo mais clara de quimerismo. Cento e vinte indivíduos do sexo feminino e 120 do masculino foram analisados inicialmente para a determinaçäo de sensibilidade e especficidade da técnica de FISH para cromossomos X e Y. Quando utilizadas combinadamente, ambas as sondas fornecem níveis de sensibilidade e especificidade maiores que 99 por cento. Quatro pacientes, submentidos a transplante de medula óssea com doadores de sexo diferentes, foram analisados para a observaçäo de recaída precoce. Em dois casos praticamente toda a hematopoese voltou a ser do receptor, indicando recaída da doença antes que análise citogenética pudesse ser utilizada. Em um dos casos encontrou-se um estado de quimera mista sugerindo fortemente a possibilidade de recaída, o que se cofirmou algumas semanas após. O último caso apresentava hematopoese oriunda do doador, indicando que a doença de base näo havia retornado. Concluímos que a técnica de FISH é superior à de citogenética para a detecçäo precoce de recaída pós-transplante em casos onde doador e receptor säo se sexos diferentes