Microdissecção e captura a laser na investigação do gene TP53 em tecidos incluídos em parafina / Laser-capture microdissection for TP53 gene analysis in paraffin-embedded tissues
Ihlaseh, Shadia Muhammad; Oliveira, Maria Luiza Cotrim Sartor de; Silva, Glenda Nicioli da; Franchi, Carla Adriene da Silva; Camargo, João Lauro Viana de.
J. bras. patol. med. lab;
43(1): 61-67, fev. 2007. tab, ilus
Artículo
en Portugués
| LILACS | ID: lil-448537
INTRODUÇÃO:
Microdissecção e captura a laser (MCL) é uma técnica de desenvolvimento recente que permite a coleta de células individuais ou pequeno conjunto de células para análise molecular. Atualmente, no Brasil, há raros microscópios para MCL, de modo que a divulgação dos procedimentos inerentes a essa técnica é oportuna para destacar seu amplo potencial para diagnóstico e investigação.OBJETIVO:
Este trabalho descreve a padronização dos procedimentos de MCL e de extração de DNA de material fixado em formalina e incluído em parafina. MATERIAL EMÉTODOS:
Foram estudados o éxon 8 do gene TP53 e o gene da ciclofilina em amostras de tecido normal e de neoplasias de fígado e rim provenientes de modelo de carcinogênese química induzida em rato. A extração do DNA foi comprovada por reação em cadeia da polimerase (nested-PCR).RESULTADOS:
Foram padronizados os procedimentos de preparo dos cortes histológicos, de microdissecção e captura a laser e de obtenção de seqüências gênicas pela reação de nested-PCR para tecidos incluídos em parafina. Obtivemos amplificação de 48,3 por cento das amostras para o éxon 8 do gene TP53 e 51,7 por cento para o gene da ciclofilina. Considerando pelo menos um dos dois segmentos gênicos, foram amplificadas 79,3 por cento das amostras. DISCUSSÃO ECONCLUSÃO:
A extração de DNA de tecidos fixados em formalina e incluídos em parafina e a técnica de nested-PCR foram adequadamente padronizadas para produtos gênicos de interesse, obtidos de material coletado por MCL. Esses procedimentos podem ser úteis para a obtenção de seqüências de DNA de arquivos para análise molecular.
Biblioteca responsable:
BR14.1
Texto completo