Identification of Plasmodium knowlesi Merozoite Surface Protein-119 (PkMSP-119 ) novel binding peptides from a phage display library.

OBJECTIF: Plasmodium knowlesi, le cinquième parasite du paludisme humain, cause la mortalité chez l'homme. Nous avons cherché à identifier les nouveaux peptides de liaison de P. knowlesi par le biais d'une présentation linéaire aléatoire de phages dodécapeptidiques ciblant le fragment de 19 kDa de la protéine-1 de surface du mérozoïte. MÉTHODES: La protéine rPkMSP-119 a été exprimée de façon hétérologue en utilisant le système de criblage de solubilité et d'expression Expresso® et des cellules compétentes E. cloni® 10G conformément au protocole. Trois cycles de biopanning ont été effectués sur rPkMSP-119 purifié pour identifier les peptides de liaison sur rPkMSP-119 en utilisant la banque de présentation aléatoires de phages Ph.D.™-12. Les sites identifiés de liaison des peptides à PkMSP-119 ont été prédits in silico en utilisant le Web serveur CABS-dock. RÉSULTATS: Quatre variantes de peptides phagiques qui se lient à PkMSP-119 ont été identifiées après trois cycles de biopanning, à savoir Pkd1, Pkd2, Pkd3 et Pkd4. Les séquences de Pkd1 et Pkd2 consistent en un grand nombre de résidus histidine. Pkd1 a montré un signal de liaison positif de 6,1 x par rapport au contrôle BSA. Les résultats d'amarrage ont montré que Pkd1 et Pkd2 étaient des peptides de liaison idéaux pour PkMSP-119 . CONCLUSION: Nous avons identifié deux nouveaux peptides de liaison de PkMSP-119 , Pkd1 (HFPFHHHKLRAH) et Pkd2 (HPMHMLHKRQHG), grâce à la présentation de phages. Ils constituent un point de départ précieux pour le développement de nouvelles thérapies.