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1.
Nature ; 506(7488): 334-8, 2014 Feb 20.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-24522531

RESUMO

The assembly of 30S ribosomes requires the precise addition of 20 proteins to the 16S ribosomal RNA. How early binding proteins change the ribosomal RNA structure so that later proteins may join the complex is poorly understood. Here we use single-molecule fluorescence resonance energy transfer (FRET) to observe real-time encounters between Escherichia coli ribosomal protein S4 and the 16S 5' domain RNA at an early stage of 30S assembly. Dynamic initial S4-RNA complexes pass through a stable non-native intermediate before converting to the native complex, showing that non-native structures can offer a low free-energy path to protein-RNA recognition. Three-colour FRET and molecular dynamics simulations reveal how S4 changes the frequency and direction of RNA helix motions, guiding a conformational switch that enforces the hierarchy of protein addition. These protein-guided dynamics offer an alternative explanation for induced fit in RNA-protein complexes.


Assuntos
Simulação de Dinâmica Molecular , RNA Ribossômico 16S/química , RNA Ribossômico 16S/metabolismo , Proteínas Ribossômicas/metabolismo , Subunidades Ribossômicas Menores de Bactérias/química , Subunidades Ribossômicas Menores de Bactérias/metabolismo , Escherichia coli/química , Escherichia coli/genética , Transferência Ressonante de Energia de Fluorescência , Cinética , Modelos Moleculares , Conformação de Ácido Nucleico , Ligação Proteica , Conformação Proteica , Proteínas de Ligação a RNA/química , Proteínas de Ligação a RNA/metabolismo , Proteínas Ribossômicas/química
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