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Sci Rep ; 9(1): 11191, 2019 08 01.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-31371771

RESUMO

During vertebrate embryogenesis, the cranial neural crest (CNC) forms at the neural plate border and subsequently migrates and differentiates into many types of cells. The transcription factor Snai2, which is induced by canonical Wnt signaling to be expressed in the early CNC, is pivotal for CNC induction and migration in Xenopus. However, snai2 expression is silenced during CNC migration, and its roles at later developmental stages remain unclear. We generated a transgenic X. tropicalis line that expresses enhanced green fluorescent protein (eGFP) driven by the snai2 promoter/enhancer, and observed eGFP expression not only in the pre-migratory and migrating CNC, but also the differentiating CNC. This transgenic line can be used directly to detect deficiencies in CNC development at various stages, including subtle perturbation of CNC differentiation. In situ hybridization and immunohistochemistry confirm that Snai2 is re-expressed in the differentiating CNC. Using a separate transgenic Wnt reporter line, we show that canonical Wnt signaling is also active in the differentiating CNC. Blocking Wnt signaling shortly after CNC migration causes reduced snai2 expression and impaired differentiation of CNC-derived head cartilage structures. These results suggest that Wnt signaling is required for snai2 re-expression and CNC differentiation.


Assuntos
Encéfalo/embriologia , Crista Neural/fisiologia , Fatores de Transcrição/metabolismo , Proteínas Wnt/metabolismo , Proteínas de Xenopus/metabolismo , Xenopus laevis/embriologia , Proteínas ADAM/genética , Proteínas ADAM/metabolismo , Animais , Animais Geneticamente Modificados , Diferenciação Celular/efeitos dos fármacos , Diferenciação Celular/genética , Embrião não Mamífero , Desenvolvimento Embrionário/efeitos dos fármacos , Desenvolvimento Embrionário/fisiologia , Regulação da Expressão Gênica no Desenvolvimento/efeitos dos fármacos , Regulação da Expressão Gênica no Desenvolvimento/genética , Técnicas de Silenciamento de Genes , Genes Reporter/genética , Proteínas de Fluorescência Verde/química , Proteínas de Fluorescência Verde/genética , Compostos Heterocíclicos com 3 Anéis/farmacologia , Imidas/farmacologia , Proteínas de Membrana/genética , Proteínas de Membrana/metabolismo , Crista Neural/citologia , Quinolinas/farmacologia , Proteínas Wnt/antagonistas & inibidores , Proteínas Wnt/genética , Via de Sinalização Wnt/efeitos dos fármacos , Via de Sinalização Wnt/genética , Via de Sinalização Wnt/fisiologia , Proteínas de Xenopus/genética , Xenopus laevis/genética
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