RESUMO
Chicken eggs were inoculated with suspensions of ambient air particles (Assuntos
Poluentes Atmosféricos/toxicidade
, Desenvolvimento Embrionário/efeitos dos fármacos
, Monitoramento Ambiental/métodos
, Metais Pesados/toxicidade
, Material Particulado/toxicidade
, Animais
, Brasil
, Embrião de Galinha
, Tamanho da Partícula
, Urbanização
RESUMO
To investigate epidemiological and pathogenetic features of HTLV-I infection, a cohort of carriers has been followed at the USP Teaching Hospital since 1991. This study describes the establishment of cell lines from peripheral blood mononuclear cells (PBMC) of infected subjects. Ex vivo PBMC were cultured with those from a seronegative donor and morphologic evidence of cell transformation was obtained after 90 days with detection of multinucleated cells exhibiting cerebriform nuclei. Integration of HTLV-I proviral DNA and expression of viral antigens was demonstrated in culture by PCR and immunofluorescence. Cell lines were maintained for 240 days, gradually weaned from exogenous IL-2. Immunophenotyping of cell lines on flow cytometry yielded evidence of cell activation. Establishment of HTLV-I-infected cell lines from ex vivo PBMC is feasible and may be useful for studies on lymphocyte phenotypic changes and on mechanisms of HTLV-induced cell proliferation. Moreover they may be used with diagnostic purposes in immunofluorescence tests.
Assuntos
Linhagem Celular Transformada/virologia , Transformação Celular Viral , Vírus Linfotrópico T Tipo 1 Humano , Leucócitos Mononucleares/virologia , Adulto , Antígenos Virais/análise , Brasil , Linhagem Celular Transformada/imunologia , Transformação Celular Viral/imunologia , Estudos de Coortes , Estudos de Viabilidade , Feminino , Técnica Direta de Fluorescência para Anticorpo , Infecções por HTLV-I/imunologia , Vírus Linfotrópico T Tipo 1 Humano/imunologia , Vírus Linfotrópico T Tipo 1 Humano/fisiologia , Humanos , Imunofenotipagem , Pessoa de Meia-Idade , Reação em Cadeia da PolimeraseRESUMO
Para investigar a epidemiologia e patogênese da infecção por HTLV-I seguimos coorte de portadores dessa retrovirose no HC-FMUSP desde 1991. Este estudo descreve o estabelecimento de linhagens celulares a partir de células mononucleares periféricas (CMP) de indivíduos infectados. As CMP foram cultivadas com as de doador soronegativo, verificando-se após 90 dias evidência morfológica de transformação celular com detecção de células multinucleadas com núcleos cerebriformes. Demonstrou-se integração do DNA proviral e expressão in vitro de antígenos virais pela PCR e imunofluorescência. As linhagens celulares transformadas foram mantidas por 240 dias, com retirada gradual de IL-2 exógena. A imunofenotipagem por citometria de fluxo revelou ativação celular. O estabelecimento de linhagens celulares infectadas por HTLV-I a partir de CMP ex-vivo é exeqüível e pode ser útil na investigação de alterações fenotípicas linfocitárias e dos mecanismos de proliferação celular induzida por esse retrovírus. Podem ainda ser utilizadas com intuito diagnóstico em reações de imunofluorescência.