RESUMO
Many enzymes can self-assemble into higher-order structures with helical symmetry. A particularly noteworthy example is that of nitrilases, enzymes in which oligomerization of dimers into spiral homo-oligomers is a requirement for their enzymatic function. Nitrilases are widespread in nature where they catalyze the hydrolysis of nitriles into the corresponding carboxylic acid and ammonia. Here, we present the Cryo-EM structure, at 3 Å resolution, of a C-terminal truncate nitrilase from Rhodococcus sp. V51B that assembles in helical filaments. The model comprises a complete turn of the helical arrangement with a substrate-intermediate bound to the catalytic cysteine. The structure was solved having added the substrate to the protein. The length and stability of filaments was made more substantial in the presence of the aromatic substrate, benzonitrile, but not for aliphatic nitriles or dinitriles. The overall structure maintains the topology of the nitrilase family, and the filament is formed by the association of dimers in a chain-like mechanism that stabilizes the spiral. The active site is completely buried inside each monomer, while the substrate binding pocket was observed within the oligomerization interfaces. The present structure is in a closed configuration, judging by the position of the lid, suggesting that the intermediate is one of the covalent adducts. The proximity of the active site to the dimerization and oligomerization interfaces, allows the dimer to sense structural changes once the benzonitrile was bound, and translated to the rest of the filament, stabilizing the helical structure.
Assuntos
Aminoidrolases , Microscopia Crioeletrônica , Nitrilas , Multimerização Proteica , Rhodococcus , Aminoidrolases/química , Aminoidrolases/metabolismo , Aminoidrolases/ultraestrutura , Microscopia Crioeletrônica/métodos , Rhodococcus/enzimologia , Nitrilas/química , Nitrilas/metabolismo , Especificidade por Substrato , Modelos Moleculares , Domínio Catalítico , Proteínas de Bactérias/química , Proteínas de Bactérias/metabolismo , Proteínas de Bactérias/ultraestrutura , CatáliseRESUMO
Fundamento: en Cuba, las ametropías constituyen una causa frecuente de asistencia a las consultas oftalmológicas. La existencia de estos defectos se ha convertido en un problema que afecta a la sociedad, tanto por los daños orgánicos y físicos que puede provocar en el sistema visual, como por los trastornos psicológicos que se presentan en quienes los padecen, ya sea por cuestiones estéticas o de incapacidad de realizar determinadas actividades cotidianas. Objetivos: determinar el comportamiento clínico-epidemiológico de las ametropías en el policlínico Previsora del municipio Camagüey, en el mes de octubre de 2008. Método: se realizó un estudio observacional descriptivo de los pacientes que acudieron a la consulta de refracción, el universo y la muestra estuvo conformado por los doscientos pacientes diagnosticados como amétropes. Resultados: el grupo de edades más afectado es el de cuarenta a cuarenta y nueve años y el sexo femenino fue el que más incidió, el astigmatismo fue la ametropía más frecuente, y según el valor dióptrico predominó el grado leve. La mayoría de los casos presentó buena agudeza visual con corrección y sólo una cuarta parte aproximadamente fue regular o mala. Conclusiones: el glaucoma, la retinopatía miópica y la catarata fueron las enfermedades oftalmológicas que más se asociaron a pacientes miopes, mientras que la retinopatía diabética se encontró con más frecuencia en hipermétropes.
Background: In Cuba, ametropia constitutes a frequent cause of attendance in ophthalmologic consultations. The existence of these defects has become a problem that affects society, so much for organic and physical damages that it may cause in the visual system, as for psychological dysfunctions that are presented who suffer them, either for aesthetic matters or for inability of carrying out certain daily activities. Objective: to determine the clinical-epidemic behavior of ametropia at the Previsora polyclinic of Camagüey municipality, in October 2008. Method: a descriptive observational study of patients that assisted to the refraction consultation was carried out, the universe and the sample was comply with two hundred patients diagnosed with ametropia. Results: the most affected age group is the one from forty to forty-nine years and the female sex with the most occurrence, astigmatism was the most frequent ametropia, and according to the dioptric value, light grade prevailed. Most of the cases presented good visual acuity with correction and only a fourth part approximately was regular or bad. Conclusions: glaucoma, myopic retinopathy and cataract were ophthalmologic diseases most associate to myopic patients, while diabetic retinopathy was most frequent in hypermetrope patients.
RESUMO
El queratocono agudo es el resultado de la ruptura de la membrana de Descemet, seguido de la penetración del humor acuoso hacia el interior del estroma corneal, provoca engrosamiento, opacificación y aparición de bullas edematosas en el epitelio corneal. La frecuencia del queratocono agudo ha disminuido notablemente en los últimos tiempos gracias a la precocidad de la indicación de la queratoplastia penetrante en el tratamiento del queratocono progresivo. En el presente trabajo se reportan dos casos de queratocono agudos en niños, y se discuten las características clínicas de esta enfermedad