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Nucleic Acids Res ; 32(17): e135, 2004 Sep 30.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-15459281

RESUMO

PCR amplification of limited amounts of DNA template carries an increased risk of product redundancy and contamination. We use molecular barcoding to label each genomic DNA template with an individual sequence tag prior to PCR amplification. In addition, we include molecular 'batch-stamps' that effectively label each genomic template with a sample ID and analysis date. This highly sensitive method identifies redundant and contaminant sequences and serves as a reliable method for positive identification of desired sequences; we can therefore capture accurately the genomic template diversity in the sample analyzed. Although our application described here involves the use of hairpin-bisulfite PCR for amplification of double-stranded DNA, the method can readily be adapted to single-strand PCR. Useful applications will include analyses of limited template DNA for biomedical, ancient DNA and forensic purposes.


Assuntos
Reação em Cadeia da Polimerase/métodos , Análise de Sequência de DNA/métodos , Sulfitos/química , Sequência de Bases , Proteína do X Frágil da Deficiência Intelectual , Genoma Humano , Humanos , Masculino , Dados de Sequência Molecular , Proteínas do Tecido Nervoso/genética , Regiões Promotoras Genéticas , Proteínas de Ligação a RNA/genética , Moldes Genéticos
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