Perfis de infecção do vírus Mayaro e do vírus Chikungunya em linhagens de células de mamíferos e mosquitos/Infection profiles of Mayaro virus and Chikungunya virus in mammalian and mosquito cell lineages
Ribeiro, Ana Cláudia da Silva; Carvalho, Carlos Alberto Marques de; Casseb, Samir Mansour Moraes; Rodrigues, Sueli Guerreiro; Vasconcelos, Pedro Fernando da Costa; Carvalho, Valeria Lima.
Rev Pan-Amaz Saude
; 9(4): 25-35, 2018. ilus., graf
Artigo
em Inglês
| Instituto Evandro Chagas (SOPHIA) | ID: iec-17574
OBJECTIVE:
To trace the infection profile of Mayaro virus (MAYV) and Chikungunya virus (CHIKV) in four different cell lineages. MATERIALS ANDMETHODS:
The isolates of these viruses were used to infect cultures of the following cell lineages - C6/36, VERO, BHK-21, and LLC-MK2 - under the multiplicity of infection of 1 PFU/cell, which were monitored for up to 96 h post-infection (hpi) by phase-contrast microscopy to register the cytopathic effect (CPE); and in addition were subjected to indirect immunofluorescence (iIF) and quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (qRT-PCR) assays for virus antigen detection and RNA load determination, respectively.RESULTS:
For both viruses, VERO and BHK-21 cells had CPE of 24 hpi, LLC-MK2 cells presented CPE from 48 hpi, and C6/36 did not present any CPE. In the iIF assays, all cells were already positive at 6 hpi, with the exception of CHIKV-infected LLC-MK2 and BHK-21 cells. Finally, qRT-PCR assays showed that in general cells infected with MAYV presented higher RNA load, although CHIKV-infected LLC-MK2 cells showed the highest RNA load.CONCLUSION:
By evaluating the behavior of these arboviruses in different types of cell cultures, including some not commonly used in the laboratory diagnostic routine, the present study provides not only a better comprehension of the replication kinetics of MAYV and CHIKV, but also opportunities for the optimization of their diagnosis in biological samples.OBJETIVO:
Traçar o perfil infeccioso do vírus Mayaro (MAYV) e do vírus Chikungunya (CHIKV) em quatro diferentes linhagens de células.MATERIAIS E MÉTODOS:
Os isolados desses vírus foram utilizados para infectar culturas das seguintes linhagens celulares - C6/36, VERO, BHK-21 e LLC-MK2 - sob a multiplicidade de infecção de 1 PFU/célula, as quais foram monitoradas por até 96 h pós-infecção (hpi) por microscopia de contraste de fase para registrar o efeito citopático (CPE); e, em seguida, foram submetidos a ensaios de imunofluorescência indireta (iIF) e reação em cadeia da polimerase de transcrição reversa quantitativa (qRT-PCR) para detecção de antígenos virais e determinação da carga de RNA, respectivamente.RESULTADOS:
Para ambos os vírus, as células VERO e BHK-21 apresentaram CPE de 24 hpi, as LLC-MK2 apresentaram CPE a partir de 48 hpi e as C6/36 não apresentaram qualquer CPE. Nos ensaios de iIF, todas as células já se tornaram positivas a 6 hpi, com exceção das células LLC-MK2 e BHK-21 infectadas com CHIKV. Finalmente, os ensaios qRT-PCR mostraram que, em geral, as células infectadas com MAYV apresentaram aumento da carga de RNA, embora as células LLC-MK2 infectadas pelo CHIKV tenham apresentado a maior carga de RNA.CONCLUSÃO:
Ao avaliar o comportamento desses arbovírus em diferentes tipos de culturas de células, incluindo alguns não comumente utilizados na rotina do diagnóstico laboratorial, o presente estudo fornece não apenas uma melhor compreensão da cinética de replicação de MAYV e CHIKV, mas também oportunidades para a otimização de seu diagnóstico em amostras biológicas.Assuntos
Arbovírus Alphavirus Togaviridae Vírus Chikungunya Linhagem Celular Reação em Cadeia da Polimerase Técnica Indireta de Fluorescência para Anticorpo Animais
Biblioteca responsável:
BR275.1
Localização: PCIEC2018 / BR275.1
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