Assessment of complex genomic alterations induced by AZT, 3TC, and the combination AZT +3TC.

Highly active antiretroviral therapy (HAART) regimens are based on the use of nucleoside reverse transcriptase inhibitors (NRTIs), which are the main drugs used by patients infected with the human immunodeficiency virus (HIV). The use of NRTIs combinations has afforded clear clinical benefits to patients undergoing HAART. However, the combination of two NRTIs may increase the risk of genomic instability in comparison with the drugs administered individually. We analyzed the ability of zidovudine (AZT) and lamivudine (3TC), and the combination AZT +3TC to induce complex genomic alterations using the cytokinesis-block micronucleus (CBMN) assay in Chinese hamster ovary (CHO)-K1 cells. The 24-h cell treatment with individual NRTIs showed that AZT increased micronucleus frequencies and nucleoplasmic bridges (NPBs). No significant differences were observed for any parameters investigated after exposure of CHO-K1 cells to 3TC. The combination AZT +3TC significantly increased micronucleus frequencies. Analysis of interaction between these drugs suggested that antagonism occurs in all AZT +3TC concentrations. These results highlight the importance to investigate the genotoxic profile of NRTIs to develop safer intervention strategies in antiretroviral treatment protocols.

Complications of idiopathic thrombocytopenic purpura in pregnancy: a review of literature / Complicações da púrpura trombocitopênica idiopática na gravidez: uma revisão da literatura

ABSTRACT INTRODUCTION: Idiopathic thrombocytopenic purpura (ITP) is an acquired immune disorder that causes a reduction in platelet count, called thrombocytopenia. ITP during pregnancy usually presents some complications that may impair the outcome of pregnancy. OBJECTIVE: This literature review aimed to identify the main complications of ITP in pregnancy and its consequences. METHODOLOGY: The bibliographic search was performed through scientific articles available in the Scielo and PubMed databases, of which 64 articles were selected, both in Portuguese and English. RESULTS: The risk of postpartum hemorrhage, placental abruption, and neonatal thrombocytopenia are some complications that may occur during pregnancy. CONCLUSION: Pregnant women must be properly monitored during pregnancy so that there are no major complications.

RESUMEN INTRODUCCIÓN: La púrpura trombocitopénica idiopática (PTI) es una enfermedad autoinmune adquirida que causa un bajo conteo de plaquetas en la sangre denominado trombocitopenia. La PTI durante el embarazo normalmente presenta algunas complicaciones que pueden afectar el resultado del embarazo. OBJETIVO: Esta revisión de literatura tuvo como objeto identificar las principales complicaciones de la PTI en el embarazo y sus consecuencias. MÉTODO: Se llevó a cabo una búsqueda bibliográfica de artículos científicos disponibles en las bases de datos Scielo y PubMed. Se seleccionaron 64 artículos, tanto en inglés como en portugués. RESULTADOS: El riesgo de hemorragia posparto, desprendimiento prematuro de placenta y trombocitopenia neonatal son algunas complicaciones que pueden ocurrir en la gestación. CONCLUSIÓN: Las mujeres embarazadas deben ser debidamente supervisadas durante el embarazo para que no ocurran mayores complicaciones.

RESUMO INTRODUÇÃO: A púrpura trombocitopênica idiopática (PTI) é uma doença autoimune adquirida que causa redução na contagem de plaquetas denominada trombocitopenia. A PTI durante a gestação normalmente apresenta algumas complicações que podem afetar o desfecho da gravidez. OBJETIVO: Esta revisão da literatura teve como objetivo identificar as principais complicações da PTI na gravidez e suas consequências. METODOLOGIA: A pesquisa bibliográfica foi realizada por meio de artigos científicos disponíveis nas bases de dados Scielo e PubMed. Foram selecionados 64 artigos, tanto em inglês quanto em português. RESULTADOS: O risco de hemorragia pós-parto, descolamento prematuro da placenta e trombocitopenia neonatal são algumas complicações que podem ocorrer na gestação. CONCLUSÃO: As gestantes devem ser devidamente acompanhadas durante a gestação para que não ocorram maiores complicações.

Análise comparativa dos parâmetros de testes rápidos para o diagnóstico da Hepatite B

Objetivo: Determinar qual teste rápido (TR) é mais sensível/específico, qual possui maior valor de precisão, maior valor preditivo positivo e negativo e seus interferentes para orientar os responsáveis técnicos na hora de adquirir um TR. Métodos: Realizou-se uma busca na plataforma online da Agência Nacional de Vigilância Sanitária (Anvisa) onde foram selecionadas nove bulas para uma análise comparativa. Resultados: Entre as bulas analisadas somente três testes (HBsAg ECO Teste, Teste Rápido OnSite HBsAg Combo e HBsAg Bioclin) estariam em concordância com os critérios estabelecidos pelo Ministério da Saúde (MS). Conclusão: É importante a padronização dos critérios para a validação destes testes para que todos possam ser comparados mediante um número aproximado de amostras totais, podendo assim apresentar informações claras ao consumidor. Em geral, os resultados demonstram que os TR podem ser favoráveis para investigação do vírus da hepatite B (HBV) em áreas com pouca infraestrutura e baixos recursos, mesmo que ainda existam limitações nesses testes.

Objective: to gather data and determine which RT is more sensitive / specific, which has the highest accuracy value, the highest positive and negative predictive value and its interference to guide technical managers when acquiring a TR. Methods: a search was carried out on Anvisa's online platform where 9 package inserts were selected for comparative analysis. Results: Among the package inserts analyzed, only three tests (HBsAg ECO Test, Rapid OnSite Test HBsAg Combo and HBsAg Bioclin) would be in agreement with the criteria established by the MS. Conclusion: It is important that the criteria for the validation of these tests are standardized so that all can be compared using an approximate number of total samples, thus being able to present clear information to the consumer. In general, the results demonstrate that RT can be favorable for investigating HBV in areas with little infrastructure and low resources, even though there are still limitations in these tests.

Avaliação dos parâmetros de testes rápidos para o diagnóstico do vírus da imunodeficiência humana / Evaluation of rapid test parameters for the human immunodeficiency virus diagnosis

Objetivo: O objetivo deste trabalho fora realizar uma análise comparativa entre 13 diferentes TR (teste rápido) para HIV que possuem registro na Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA). Os dados foram retirados das bulas fornecidas nos sítios eletrônicos dos fabricantes dos TR. Métodos: Neste trabalho comparou-se os TR em relação aos seus parâmetros como sensibilidade, especificidade, acurácia, Valor Preditivo Positivo (VPP) e Valor Preditivo Negativo (VPN) e seus interferentes relatados em suas respectivas bulas. Resultados: Observou-se que somente um fabricante não foi condizente com os valores estipulados pelo Departamento de DST, AIDS e Hepatites Virais (DDAHV) que foi o ECO Teste com valores de sensibilidade e especificidade de 99,1% e 99,2%, respectivamente. Conclusão: Concluiu-se que os fabricantes Alere Determine, Bioclin, Bioeasy, Imunocrom, MedTeste e OnSite revelaram-se com as bulas mais completas, apresentando todos os parâmetros necessários para avaliação do desempenho dos TR em questão.

Objective: The objective of this work was to carry out a comparative analysis between 13 different RT (rapid test) for HIV that are registered with the National Health Surveillance Agency (Anvisa). The data were taken from the package inserts provided on the websites of the manufacturers of the RT. Methods: In this work, the RT in relation to your parameters such as sensitivity, specificity, accuracy, Positive Predictive Value (PPV) and Negative Predictive Value (NPV) and their interferences reported in their respective package inserts was compared. Results: We conclude that only one manufacturer does not comply with the values stipulated by the DDAHV that was the ECO Test with values of sensitivity and specificity of 99,1% and 99,2% respectively. Conclusion: The manufacturers Alere Determine, Bioclin, Bioeasy, Immunocrom, MedTest and OnSite have revealed themselves with the most complete package inserts presenting all the necessary parameters to evaluate the performance of the RT in question.

The importance of flow cytometry in the diagnosis and monitoring of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria / A importância da citometria de fluxo no diagnóstico e monitoramento da hemoglobinúria paroxística noturna

ABSTRACT Introduction: The paroxysmal nocturnal hemoglobinuria (PNH) is an acquired clonal disease of the hematopoietic stem cells, and it is clinically characterized by chronic intravascular hemolysis, bone marrow failure and hypercoagulability leading to thrombosis. It is a rare disorder of the hematopoietic stem cells that occurs due to a somatic mutation in the gene phosphatidylinositol glycan class A (PIG-A). Objective: Here we reviewed the importance of screening and monitoring of individuals with high risk of developing PNH, since the early diagnosis of the disease is essential for better prognostic and treatment choice for the patient. Method: A review was carried out with great focus on the pathophysiology and diagnosis of PNH, mainly with the use of flow cytometry technique to detect the disease. Results: This gene codifies an enzyme essential to the formation of glycosylphosphatidylinositol (GPI), which acts as a molecular anchor for many membrane proteins. The alteration of GPI synthesis promotes a partial or complete loss of proteins that needs this molecular anchor to bind to the cell surface. Among these proteins are the CD55 and the CD59, which control the activation of the complement cascade. Conclusion: The immunophenotyping exam with flow cytometry is considered the reference test for PNH diagnosis, since the technique is highly sensitive and specific, presenting advantages as the quantitative identification of small populations of cells with PNH phenotype and the capacity to distinguish cells with partial or total deficiency of GPI-anchored proteins.

RESUMEN Introducción: La hemoglobinuria paroxística nocturna (HPN) es una enfermedad clonal adquirida de células madre hematopoyéticas; se caracteriza clínicamente por hemólisis intravascular crónica, insuficiencia medular e hipercoagulabilidad, que conduce a trombosis. Es un trastorno raro de las células madre hematopoyéticas que ocurre debido a una mutación somática en el gen fosfatidilinositol-glicano de clase A (PIG-A). Objetivo: Este estudio tuvo como objetivo revisar la importancia del cribado y seguimiento de individuos con alto riesgo de desarrollar HPN, pues el diagnóstico precoz de la enfermedad es vital para un mejor pronóstico y la elección del tratamiento del paciente. Métodos: Se realizó una revisión con mayor enfoque en la fisiopatología y diagnóstico de la HPN. El foco principal de la investigación fue el uso de la técnica de citometría de flujo para detectar la enfermedad. Resultados: Ese gen codifica una enzima esencial en la formación de glicosilfosfatidil inositol (GPI), que actúa como molécula de anclaje para varias proteínas de membrana en las células hematopoyéticas. Cambiar la síntesis de GPI genera una pérdida parcial o total de proteínas que necesitan esta molécula de anclaje para unirse a la superficie celular. Entre esas proteínas se encuentran CD55 y CD59 presentes en los eritrocitos, que controlan la activación de la cascada del complemento. Conclusión: La técnica de inmunofenotipificación por citometría de flujo se considera la prueba de referencia para el diagnóstico de HPN, ya que es altamente sensible y específica, presenta ventajas como la identificación cuantitativa de pequeñas poblaciones de células con el fenotipo de HPN y la capacidad de distinguir células con deficiencia parcial o total de proteínas ancladas por GPI.

RESUMO Introdução: A hemoglobinúria paroxística noturna (HPN) é uma enfermidade clonal adquirida de células-tronco hematopoiéticas; caracteriza-se clinicamente por hemólise intravascular crônica, falência medular e hipercoagulabilidade, levando a tromboses. É uma rara desordem das células-tronco hematopoiéticas que ocorre devido a uma mutação somática no gene fosfatidilinositol glicano classe A (PIG-A). Objetivo: Este trabalho teve como objetivo revisar a importância do rastreamento e monitoramento de indivíduos com alto risco de desenvolvimento da HPN, pois o diagnóstico precoce da doença é essencial para um melhor prognóstico e a escolha do tratamento para o paciente. Metodologia: Foi realizada uma revisão com mais enfoque na fisiopatologia e no diagnóstico da HPN. O foco principal da pesquisa foi o uso da técnica da citometria de fluxo para a detecção da doença. Resultados: Esse gene codifica uma enzima essencial na formação de glicosilfosfatidil inositol (GPI), a qual atua como molécula âncora de diversas proteínas de membrana nas células hematopoiéticas. A alteração da síntese de GPI gera uma perda parcial ou completa de proteínas que necessitam dessa molécula-âncora para se ligarem à superfície celular. Entre estas proteínas estão o CD55 e o CD59 presente em eritrócitos, que controlam a ativação da cascata do complemento. Conclusão: O exame de imunofenotipagem por citometria de fluxo é considerado o teste de referência para diagnóstico de HPN, pois a técnica é altamente sensível e específica, apresentando vantagens como a identificação quantitativa de pequenas populações de células com fenótipo HPN e a capacidade de distinguir células com deficiência parcial ou total de proteínas ancoradas pela GPI.

Impact of pre-analytical errors on costs of clinical analysis laboratory / Impacto nos custos por erros pré-analíticos em laboratório de análises clínicas

ABSTRACT Introduction: Currently, it is well known that quality assurance systems in healthcare organizations are constantly evolving. Quality improvements can reduce costs by avoiding repetition of exams, which results in a waste of time and money for the company, as well as customer and physician dissatisfaction. Objective: To quantify the cost that errors in the pre-analytical phase generate for the laboratory using the collection indicators, direct material cost, and operating cost. Materials and methods: The database of a large laboratory in the city of Porto Alegre, Rio Grande do Sul, was analyzed between January 2013 and July 2014. Results: A total cost of R$ 23,330.71 spent on recollections was obtained. Discussion: Management cost is committed to efficiency in reducing expenses, through studies and analyzes aimed at changing management and conduct processes. Conclusion: Cost management is necessary in any company because in the case where it fails to be carried out, besides the being able to bring the institution down to bankrupt, it brings negative costs, as well as impacts customers and physician's satisfaction.

RESUMEN Introducción: Actualmente, llama atención que los sistemas de garantía de calidad en organizaciones sanitarias están en constante evolución. Las mejoras en la calidad pueden reducir los costos, evitando la repetición de pruebas, que genera una pérdida de tiempo y dinero para la empresa, así como la insatisfacción de clientes y médicos. Objetivo: Cuantificar el costo que los errores en la fase preanalítica generan para el laboratorio, utilizando los indicadores de nueva extracción, el costo con material directo y el costo de operación. Materiales y métodos: Se analizó la base de datos de un gran laboratorio en la ciudad de Porto Alegre, Rio Grande do Sul, entre enero de 2013 y julio de 2014. Resultados: Obtuvimos un costo total de R$ 23.330,71 gastados en tomas repetidas. Discusión: El costo de gestión se compromete con la eficiencia en la reducción de gastos, mediante estudios y análisis orientados a cambiar los procesos de gestión y conducción. Conclusión: La gestión de costos es necesaria en cualquier empresa, porque si no se hace, además de poder llevar a la institución a la quiebra, trae costos negativos, así como impactos en la satisfacción de clientes y médicos.

RESUMO Introdução: Atualmente, é notório que os sistemas de garantia da qualidade em organizações de assistência à saúde estão em constante evolução. As melhorias na qualidade podem reduzir os custos, evitando a repetição de exames, que gera desperdício de tempo e dinheiro para a empresa, bem como insatisfação do cliente e médico. Objetivo: Quantificar o custo que os erros na fase pré-analítica geram para o laboratório, utilizando os indicadores de recoleta, o custo com material direto e o custo de operação. Materiais e métodos: O banco de dados de um laboratório de grande porte da cidade de Porto Alegre, Rio Grande do Sul, foi analisado entre janeiro de 2013 e julho de 2014. Resultados: Obtivemos um total de R$ 23.330,71 gastos com as recoletas. Discussão: O custo gerencial compromete-se com a eficiência para redução dos gastos, por meio de estudos e análises voltados para mudanças de processos de administração e conduta. Conclusão: O gerenciamento de custo é necessário em qualquer empresa, pois, caso não seja realizado, além de poder levar a instituição à falência, traz custos negativos, assim como impactos na satisfação de clientes e médicos.

Avaliação laboratorial da doença residual mínima na leucemia mielóide crônica por Real-Time PCR: [revisão] / Evaluation diagnosis of minimal residual disease in chronic myeloid leukemia by Real-Time PCR: [review]

A leucemia mielóide crônica (LMC) representa 15 por cento das leucemias e apresenta três fases: crônica, acelerada e crise blástica. A partir da análise citogenética, pode ser identificado o cromossomo Philadelphia, característico da LMC. O transplante de células-tronco é o único tratamento curativo, mas é acompanhado de altas taxas de morbimortalidade, dificultando sua aplicação. A doença residual mínima é de grande importância para avaliar a resposta ao tratamento, tanto na verificação de doença residual, quanto na identificação de pacientes com alto risco de recaída. Muitas técnicas específicas têm sido introduzidas para detectar as translocações ou os produtos do cromossomo Philadelphia. A mais sensível é a Real-Time PCR, que detecta uma célula leucêmica em 10(5) células normais. O objetivo deste trabalho foi realizar uma revisão bibliográfica sobre a LMC, dando ênfase à utilização da técnica por Real-Time PCR.

Chronic myeloid leukemia (CML) represents about 15 percent of all leukemias and has three phases: the chronic phase, accelerated phase and blast crisis. After cytogenetic analysis, the Philadelphia chromosome, characteristic of CML, can be identificated. Stem cell transplantation is the only curative treatment for CML, but it is accompanied by high levels of morbimortality, difficulting its application. The minimal residual disease is very important for the evaluation of the response to treatment, to verify the residual disease and also to identify patients with a high risk of relapse. Many specific techniques have been introduced for the detection of translocations or products of the Philadelphia chromosome; the most sensitive being Real-Time PCR which detects 1 leukemia cell in 10(5) normal cells. The aim of this study was to perform a bibliographic review of CML, with emphasis on the utilization of the Real-Time PCR technique.