RESUMO
Southeastern Brazil has been suffering a rapid expansion of a severe sylvatic yellow fever virus (YFV) outbreak since late 2016, which has reached one of the most populated zones in Brazil and South America, heretofore a yellow fever-free zone for more than 70 years. In the current study, we describe the complete genome of 12 YFV samples from mosquitoes, humans and non-human primates from the Brazilian 2017 epidemic. All of the YFV sequences belong to the modern lineage (sub-lineage 1E) of South American genotype I, having been circulating for several months prior to the December 2016 detection. Our data confirm that viral strains associated with the most severe YF epidemic in South America in the last 70 years display unique amino acid substitutions that are mainly located in highly conserved positions in non-structural proteins. Our data also corroborate that YFV has spread southward into Rio de Janeiro state following two main sylvatic dispersion routes that converged at the border of the great metropolitan area comprising nearly 12 million unvaccinated inhabitants. Our original results can help public health authorities to guide the surveillance, prophylaxis and control measures required to face such a severe epidemiological problem. Finally, it will also inspire other workers to further investigate the epidemiological and biological significance of the amino acid polymorphisms detected in the Brazilian 2017 YFV strains.
Assuntos
Febre Amarela/virologia , Vírus da Febre Amarela/genética , Brasil/epidemiologia , Surtos de Doenças , Genoma Viral , Genômica , Genótipo , Humanos , Modelos Moleculares , Filogenia , Proteínas Virais/química , Proteínas Virais/genética , Proteínas Virais/metabolismo , Febre Amarela/epidemiologia , Vírus da Febre Amarela/química , Vírus da Febre Amarela/classificação , Vírus da Febre Amarela/isolamento & purificaçãoRESUMO
A vacina contra a febre amarela (FA) é constituída pela partícula infecciosa do vírus FA da cepa 17D e atenuada por meio de diversas passagens em células de tecidos e hospedeiros diferentes. A vacina é altamente eficaz e segura, pois induz a uma resposta robusta e duradoura no hospedeiro e apresenta uma baixa taxa de efeitos adversos em vacinados sendo então considerada uma das vacinas mais bem desenvolvidas propostas até hoje. Somando-se a estas características, a cepa 17D tem sido visto como um vetor promissor para a expressão de proteínas heterólogas. Nosso laboratório utiliza uma estratégia única que consiste na inserção de cassetes heterólogos na região intergênica E/NS1 do genoma viral de FA. O Vírus da imunodeficiência humana do tipo 1 (HIV-1) é um dos vírus responsáveis pela maior pandemia vista até hoje. Diversos esforços têm sido feitos para o controle da doença, porém o tratamento ainda é feito através da terapia antirretroviral (HAART). Entretanto ainda é possível que haja falha na terapia, o que justifica a necessidade do desenvolvimento de uma vacina. Neste trabalho utilizamos a plataforma de inserção de cassetes heterólogos na região intergênica E/NS1 para expressar as proteínas do envelope, gp41, gp120 e, a associação destas, a gp 140 do HIV-1. A clonagem plasmidial inicial para a obtenção de cDNA viral recombinante para a forma nativa ou trimérica da gp140 foi inviável. Entretanto, conseguimos vírus FA recombinantes para gp 120 e gp 41, que apresentaram grande instabilidade genética Adicionalmente, a detecção de um painel de anticorpos monoclonais específicos para epítopos conformacionais da gp120 detectaram este antígeno em células Vero indicando que a proteína expressa pelo vírus FA adota alguma conformação semelhante à forma nativa. Estes resultados substanciam os estudos de aprimoramento do vetor FA 17D para expressão de antígenos de patógenos humanos visando seu uso para o desenvolvimento de novas vacinas