Single Cell Analysis Reveals Novel Immune Perturbations in Fibrotic Hypersensitivity Pneumonitis.

Rationale: Fibrotic hypersensitivity pneumonitis is a debilitating interstitial lung disease driven by incompletely understood immune mechanisms. Objectives: To elucidate immune aberrations in fibrotic hypersensitivity pneumonitis in single-cell resolution. Methods: Single-cell 5' RNA sequencing was conducted on peripheral blood mononuclear cells and bronchoalveolar lavage cells obtained from 45 patients with fibrotic hypersensitivity pneumonitis, 63 idiopathic pulmonary fibrosis, 4 non-fibrotic hypersensitivity pneumonitis, and 36 healthy controls in the United States and Mexico. Analyses included differential gene expression (Seurat), transcription factor activity imputation (DoRothEA-VIPER), and trajectory analyses (Monocle3/Velocyto-scVelo-CellRank). Measurements and Main Results: Overall, 501,534 peripheral blood mononuclear cells from 110 patients and controls and 88,336 bronchoalveolar lavage cells from 19 patients were profiled. Compared to controls, fibrotic hypersensitivity pneumonitis has elevated classical monocytes (adjusted-p=2.5e-3) and are enriched in CCL3hi/CCL4hi and S100Ahi classical monocytes (adjusted-p<2.2e-16). Trajectory analyses demonstrate that S100Ahi classical monocytes differentiate into SPP1hi lung macrophages associated with fibrosis. Compared to both controls and idiopathic pulmonary fibrosis, fibrotic hypersensitivity pneumonitis patient cells are significantly enriched in GZMhi cytotoxic T cells. These cells exhibit transcription factor activities indicative of TGFß and TNFα/NFκB pathways. These results are publicly available at https://ildimmunecellatlas.org. Conclusions: Single-cell transcriptomics of fibrotic hypersensitivity pneumonitis patients uncovered novel immune perturbations, including previously undescribed increases in GZMhi cytotoxic CD4+ and CD8+ T cells - reflecting this disease's unique inflammatory T-cell driven nature - as well as increased S100Ahi and CCL3hi/CCL4hi classical monocytes also observed in idiopathic pulmonary fibrosis. Both cell populations may guide the development of new biomarkers and therapeutic interventions.

Increased ER Stress and Unfolded Protein Response Activation in Epithelial and Inflammatory Cells in Hypersensitivity Pneumonitis.

Several types of cytotoxic insults disrupt endoplasmic reticulum (ER) homeostasis, cause ER stress, and activate the unfolded protein response (UPR). The role of ER stress and UPR activation in hypersensitivity pneumonitis (HP) has not been described. HP is an immune-mediated interstitial lung disease that develops following repeated inhalation of various antigens in susceptible and sensitized individuals. The aim of this study was to investigate the lung expression and localization of the key effectors of the UPR, BiP/GRP78, CHOP, and sXBP1 in HP patients compared with control subjects. Furthermore, we developed a mouse model of HP to determine whether ER stress and UPR pathway are induced during this pathogenesis. In human control lungs, we observed weak positive staining for BiP in some epithelial cells and macrophages, while sXBP1 and CHOP were negative. Conversely, strong BiP, sXBP1- and CHOP-positive alveolar and bronchial epithelial, and inflammatory cells were identified in HP lungs. We also found apoptosis and autophagy markers colocalization with UPR proteins in HP lungs. Similar results were obtained in lungs from an HP mouse model. Our findings suggest that the UPR pathway is associated with the pathogenesis of HP.

Mir-155-5p targets TP53INP1 to promote proliferative phenotype in hypersensitivity pneumonitis lung fibroblasts.

Background: Hypersensitivity pneumonitis (HP) is an inflammatory disorder affecting lung parenchyma and often evolves into fibrosis (fHP). The altered regulation of genes involved in the pathogenesis of the disease is not well comprehended, while the role of microRNAs in lung fibroblasts remains unexplored. Methods: We used integrated bulk RNA-Seq and enrichment pathway bioinformatic analyses to identify differentially expressed (DE)-miRNAs and genes (DEGs) associated with HP lungs. In vitro, we evaluated the expression and potential role of miR-155-5p in the phenotype of fHP lung fibroblasts. Loss and gain assays were used to demonstrate the impact of miR-155-5p on fibroblast functions. In addition, mir-155-5p and its target TP53INP1 were analyzed after treatment with TGF-ß, IL-4, and IL-17A. Results: We found around 50 DEGs shared by several databases that differentiate HP from control and IPF lungs, constituting a unique HP lung transcriptional signature. Additionally, we reveal 18 DE-miRNAs that may regulate these DEGs. Among the candidates likely associated with HP pathogenesis was miR-155-5p. Our findings indicate that increased miR-155-5p in fHP fibroblasts coincides with reduced TP53INP1 expression, high proliferative capacity, and a lack of senescence markers compared to IPF fibroblasts. Induced overexpression of miR-155-5p in normal fibroblasts remarkably increases the proliferation rate and decreases TP53INP1 expression. Conversely, miR-155-5p inhibition reduces proliferation and increases senescence markers. TGF-ß, IL-4, and IL-17A stimulated miR-155-5p overexpression in HP lung fibroblasts. Conclusion: Our findings suggest a distinctive signature of 53 DEGs in HP, including CLDN18, EEF2, CXCL9, PLA2G2D, and ZNF683, as potential targets for future studies. Likewise, 18 miRNAs, including miR-155-5p, could be helpful to establish differences between these two pathologies. The overexpression of miR-155-5p and downregulation of TP53INP1 in fHP lung fibroblasts may be involved in his proliferative and profibrotic phenotype. These findings may help differentiate and characterize their pathogenic features and understand their role in the disease.

Persistence of lung structural and functional alterations at one year post-COVID-19 is associated with increased serum PD-L2 levels and altered CD4/CD8 ratio.

BACKGROUND: Persistent respiratory symptoms and lung abnormalities post-COVID-19 are public health problems. This study evaluated biomarkers to stratify high-risk patients to the development or persistence of post-COVID-19 interstitial lung disease. METHODS: One hundred eighteen patients discharged with residual lung abnormalities compatible with interstitial lung disease (COVID-ILD patients) after a severe COVID-19 were followed for 1 year (post-COVID-ILD patients). Physical examination, pulmonary function tests, and chest high-resolution computed tomography (HRCT) were performed. Soluble forms (s) of PD-L1, PD-L2, TIM-3, and GAL-9 were evaluated in serum and cell culture supernatant, as well as T-cells subsets and the transmembrane expression of PD-L1 and PD-L2 on the cell surface. RESULTS: Eighty percent of the post-COVID-ILD patients normalized their lung function at 1-year follow-up, 8% presented COVID-independent ILD, and 12% still showed functional and HRCT alterations. PD-L2 levels were heterogeneous during acute COVID-19 (aCOVID); patients who increased (at least 30%) their sPD-L2 levels at 1 year post-COVID-19 and exhibited altered CD4/CD8 ratio showed persistence of chest tomographic and functional alterations. By contrast, patients who decreased sPD-L2 displayed a complete lung recovery. sPD-L1, sTIM-3, and sGAL-9 increased significantly during aCOVID and decreased in all patients after 1-year follow-up. CONCLUSION: Increased sPD-L2 and an altered CD4/CD8 ratio after 12 months of aCOVID are associated with the persistence of lung lesions, suggesting that they may contribute to lung damage post-COVID-19.

Circulating biomarkers and progression of idiopathic pulmonary fibrosis: data from the INMARK trial.

Background: We used data from the INMARK trial to investigate associations between circulating biomarkers of extracellular matrix (ECM) turnover, inflammation and epithelial dysfunction and disease progression in subjects with idiopathic pulmonary fibrosis (IPF). Methods: Subjects with IPF and forced vital capacity (FVC) ≥80% predicted were randomised 1:2 to receive nintedanib 150 mg twice daily or placebo for 12 weeks followed by open-label nintedanib for 40 weeks. Associations between baseline biomarker levels and the proportion of subjects with disease progression (decline in FVC ≥10% predicted or death) over 52 weeks were assessed in subjects randomised to placebo using logistic regression. Associations between baseline demographic/clinical characteristics and biomarker levels and disease progression over 52 weeks were analysed using multivariate models. Results: Of 230 subjects who received placebo for 12 weeks then open-label nintedanib for 40 weeks, 70 (30.4%) had disease progression over 52 weeks. Baseline levels of CRPM (C-reactive protein (CRP) degraded by matrix metalloproteinase (MMP)-1/8), C3M (collagen 3 degraded by MMP-9), CRP, KL-6 (Krebs von den Lungen-6) and SP-D (surfactant protein D) were not significantly associated with disease progression over 52 weeks in analyses corrected for multiple comparisons. In models including only baseline demographic/clinical characteristics, 61.2-64.2% of subjects were correctly classified as having or not having disease progression over 52 weeks. When both demographic/clinical characteristics and biomarker levels were included in the models, 50.0-64.5% of the test set were correctly classified. Conclusions: Among subjects with IPF and preserved FVC, multivariate models based on demographic/clinical characteristics and biomarker levels at baseline did not provide an accurate prediction of which patients would progress.

Evaluación del posible papel de la osteopontina como marcador biológico en la fibrosis pulmonar idiopática / Evaluation of osteopontin as a potential biological marker in idiopathic pulmonary fibrosis

Introducción: La fibrosis pulmonar idiopática (FPI) es una neumopatía crónica de difícil diagnóstico que puede confundirse con otras enfermedades pulmonares intersticiales difusas (EPID), por lo que es importante buscar nuevos métodos auxiliares para su diagnóstico. La osteopontina (OPN) es una glicoproteína multifuncional con efecto estimulante sobre los fibroblastos y la síntesis de matriz extracelular. Dado su posible papel profibrosante, consideramos de interés evaluar su concentración en el lavado bronquioalveolar (LBA) de pacientes con FPI y compararla con otras EPID. Material y métodos: La OPN se cuantificó por ELISA en 25 pacientes con FPI, 10 con neumonía intersticial no específica (NINE), 16 con neumonitis por hipersensibilidad (NH) y 10 controles sanos. Resultados: La concentración de OPN en pacientes con FPI fue significativamente mayor que en pacientes con NH y sanos (p < 0.0001) así como en pacientes con NINE (p < 0.05). Esta prueba mostró una sensibilidad de 80% y especificidad de 75% para el diagnóstico de FPI cuando el logaritmo de la concentración de OPN es de > 2.0. No hubo correlación entre los niveles de OPN con las pruebas de función pulmonar. Es interesante observar una asociación significativa entre los niveles de OPN y la presencia de hipocratismo digital (RM: 6.69; IC 1.25-10.76; p < 0.05). Conclusiones: La OPN se encuentra elevada en el LBA de pacientes con FPI por lo que podría considerarse como una prueba auxiliar en el diagnóstico diferencial de las EPID. Adicionalmente, nuestros hallazgos sugieren que la OPN puede estar implicada en la patogénesis del hipocratismo digital.

Background: Idiopathic pulmonary fibrosis (IPF) is a chronic pulmonary disease of difficult diagnosis that could be confused with other interstitial lung diseases (ILD). In this context, it is important to seek new methods which can be helpful in the diagnosis of this disease. Osteopontin (OPN) is a multifunctional glycopro-tein that has a stimulating effect over fibroblasts and extracellular matrix accumulation. Because it has a possible pro-fibrosing role, we decided to measure its concentration in bronchioalveolar lavage (BAL) from patients with IPF and to compare it with other ILDs. Methods: OPN concentration was measured by ELISA method in 25 IPF patients, 10 patients with non-specific interstitial pneumonia (NSIP), 16 patients with hypersensitivity pneumonitis (HP) and 10 healthy controls. Results: OPN levels in IPF patients were significantly increased compared with patients with HP and healthy controls (p < 0.0001) as with NSIP patients (p< 0.05). This test showed an 80% sensitivity and 75% specificity when the OPN concentration logarithm is > 2.0. There was no correlation between OPN levels and pulmonary function tests. Interestingly, we observed a significant association between OPN levels and finger clubbing (OR: 6.69; Cl: 1.25-10.76; p < 0.05). Conclusions: IPF patients showed increased OPN levels; this test might be considered as an ancillary tool in the differential diagnosis of ILD. Additionally, our findings suggest that OPN could be implicated in the pathogenesis of clubbing.

Neumonitis por hipersensibilidad en la ciudad de México / hypersensitivity pneumonitis in Mexico City

Objetivo. Determinar la asociación entre la zona urbana de origen del paciente en la ciudad de México y la prevalencia de neumonitis por hipersensibilidad inducida por antígeno aviario. Material y métodos. Se trata de un estudio de casos y controles realizado en el Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias, en la ciudad de México, en el año de 1999. Se estudiaron 109 casos con neumonitis por hipersensibilidad y 184 controles: de éstos, 39, con fibrosis pulmonar idiopática; 63, con tuberculosis pulmonar, y 82, con asma. La ciudad de México y las zonas conurbadas se dividieron en cinco zonas geográficas: centro, noreste, sureste, noroeste y el suroeste. Se calcularon las prevalencias de las diferentes enfermedades por zona urbana de los pacientes que participaron en el estudio; como medida de asociación, se estimó la razón de momios, con un intervalo de confianza al 95 por ciento. Asimismo, se realizó regresión logística múltiple ajustando por edad, sexo y estrato socioeconómico. Resultados. Ochenta casos de neumonitis por hipersensibilidad se concentraron en el sur del noreste de las zonas conurbadas y la parte norte del sureste de la ciudad de México, 48 y 32, respectivamente (RM= 3.86, IC 95 por ciento 2.17-6.96). Treinta y seis controles de asma se localizaron en el suroeste de la ciudad de México, zona donde se ubica el Intituto Nacional de Enfermedades Respiratorias (p<0.05) y cuatro en la zona co-nurbada. Los controles de tuberculosis pulmonar y fibrosis pulmonar idiopática estuvieron dispersos en la ciudad de México y en las zonas conurbadas. Conclusiones. La zona sur del noreste y el norte de la sureste están asociadas a la neumonitis por hipersensibilidad. Las causas de esta asociación no parece ser geográfica, pero existe el antecedente de que esa zona fue basurero de la ciudad, por lo que partículas orgánicas en el ambiente pudieran coadyuvar a la aparición de esta enfermedad.

Diferentes efectos de la adrenalina sobre el músculo liso traqueal de Erythrocebus patas: predominio de los receptores adrenérgicos alfa / Diferent effects of adrenaline on the Erythrocebus patas tracheal smooth muscle: predominance of alpha-adrenergic receptors

Al comparar la reacción del músculo liso traqueal del cobayo a la adrenalina con la obtenida en la tráquea aislada del mono Erythrocebus patas (E. patas), se encontró que en este último la catecolamina producía contracciones repetidas de duración breve en lugar de la relajación ordinaria que induce en la tráquea del cobayo y de otras especies, incluyendo al hombre. En vista de esto se decidió estudiar el efecto de un agonista (metoxamina) y de un antagonista (zolertina) selectivos para los receptores adrenérgicos alfa sobre la cadena traqueal en ambas especies. La administración de metoxamina al baño de tejido aislado produjo contracción de las tráqueas de ambas especies relacionada con la concentración del agonista. Swin embargo, el músculo liso de Erythrocebus patas resultó ser claramente más sensible que el del cobayo al efecto contráctil de la metoxamina. El contacto previo de las preparaciones con zolertina produjo disminución en la magnitud de las reacciones a la metoxamina. Aunque este fenómeno se observó en las tráqueas de las dos especies, el desplazamiento de las curvas de dosis y respuesta de la metoxamina hacia la derecha ocurrió en el tejido del primate a concentraciones diez veces menores que en el caso del cobayo. Estos resultados sugieren que en el músculo liso traqueal de Erythrocebus patas existe un predominio de los receptores adrenérgicos alfa, lo cual si bien difiere del tejido humano normal parecería tener semejanza con lo que ocurre en el músculo liso traqueobronquial del paciente asmático

Comparación de biopsias transbronquial y a pulmón abierto en el padecimiento pulmonar intersticial / Comparasion of transbronchial and open lung biopsies in intestitial lung diseases

Hoy en día, la biopsia pulmonar es el mejor método disponible para obtener un diagnoóstico definitivo en los pacientes con un Padecimiento Pulmonar Intersticial (P.P.I). En este contexto, las indicaciones para una biopsia transvronquial o a pulmón abierto aún están en controversia, y algunos autores consideran que la técnica transbronquial es muy útil en el P.P.I. En este trabajo comparamos los resultados histológicos obtenidos por una biopsia transbronquial y otra a pulmón abierto obtenidas del mismo paciente, en 12 casos que tuvieron un diagnóstico clínico de P.P.I. Nuestros resultados sugieren que en los pacientes con P.P.I., la biopsia a pulmón abierto proporciona un abordaje mejor en términos del diagnóstico morfológico, planeamiento del tratamiento, y con el objeto de analizar el pronóstico

Broncoconstricción alergica aguda en el cobayo: ventajas de la inmunización intratraqueal / Acute allergic bronchoconstriction in the guinea-pig: advantages of intratracheal immunization

De los modelos de broncoconstricción alérgica aguda el modelo animal en cobayos es el habitualmente utilizado. Sin embargo, tiene la desventaja de que la respuesta de broncoconstricción inducida por el antígeno se produce como parte de una reacción anafiláctica generalizada, situación que no ocurre en el asma de los humanos. En este trabajo se presenta un modelo inmunológico de hiperreactividad de las vías aéreas en cobayos inmunizados por vía intratraqueal. Los animales fueron sensibilizados por vía intraperitoneal o por instilación intratraqueal con ovoalbúmina (OA) y Bordetella pertussis (BP) o sólo con ovoalbúmina por vía intratraqueal. La administración intravenosa de OA a los cobayos sensibilizados produjo un aumento en la resistencia pulmonar a la inflación. No obstante en el modelo intraperitoneal los animales presentaron hipotensión severa e irreversible a dosis de l.0 y 3.l mg/kg de O.A. Este fenómeno también se observó en el modelo de inmunización intratraqueal con OA + BP pero sólo a la dosis más alta del antígeno. El estudio en úteros aislados demostró que el músculo liso de los cobayos sensibilizados por vía intraperitoneal fue 1000 veces más sensible a la ovoalbúmina que el de los cobayos inmunizados por vía respiratória. Estos datos sugieren que la inmunización local produce principalmente respuestas bronquiales

Evaluation of adenosine deaminase activity in the Mycobacterium tuberculosis culture supernatants

Background. Adenosine deaminase (ADA) catalyzes hydrolytic and irreversible deamination of deoxyadenosine into deoxyinosine and of adenosine into inosine, and is related to lymphocytic proliferation and differentiation. The measurement of ADA activity in body fluids is a useful tool in the evaluation of mycobacterial infections. Elevated ADA activity has, been found in pleural effusions of patients with pleural tuberculosis relative to those from patients with nontuberculous pleural diseases, and is mainly associated with cellular host factors such as monocyte-macrophages or lymphocytes. In contrast, there is little information about ADA activity measurement in mycobacteria culture supernatants. Methods. We evaluated ADA activity as described by Giusti in the culture supernatants of eight Mycobacterium tuberculosis isolates. Results. Mycobacteria culture supernatants did not display any ADA activity. Conclusions. This results supports the notion that Mycobacterium tuberculosis is not the source of ADA activity. However, increased ADA activity in biological fluids from tuberculosis patients might be due to the interaction of the mycobacterium with host factors

Anticuerpos antifosfolípidos: aspectos inmunoquímicos y patogénicos / Antiphospholipid antibodies: immunochemistry and pathogenetic features

Los anticuepos antifoslípidos (AFL), incluyen varios tipos como los que se describieron inicialmente en las enfermedades infecciosas. Además, se conocen ahora otros AFL como son los reactivos contra cardiolipina o los denominados anticoagulante de lupus. Estos AFL pueden ser isotipo IgG,M o A, la mayor relevancia actualmente se confiere al isotipo IgG. La especificidad parece estar dirigida a fosfolípidos con carga negativa y juega un papel importante a Apolipoproteína H como cofactor o integrante del complejo antigénico reconocido por una proporción de estos AFL. El impacto patogénico de estos AFL no se ha definido con certeza, pero la evidencia muestra intervención potencial en las fases de la coagulación dependientes de fosfolípidos

On the correct determination of reference values for serum antibodies against pigeon serum antigen using a group of healthy blood donors

An ensymatic immunoassay was developed in order to evaluate the statistical distribution of IgG serum antibodies against pooled pigeon ser antigen in 102 healthy blood donors (HBD). A non-normal distribution was obtained as demonstrated by abnormal values of skewness (2.02) and kurtosis (6.50). A cut-off point (0.120) was determined from the mean plus 2 standard derivations of the optical density values obtained in the HBD group. This value was able to segregate 94 percent of subjects. However, when calculation of the mean less 2 SD was performed to delimit 95 percent of the samples, an aberrant negative value was obtained. In contrast, when the nonparametric method of percentile calculation was applied, an optical density value of 0.130 discriminated 97.5 percent of samples. In addition, the interval between p97.5 and p2.5 delimited 95 percent of samples. We conclude that when reference values and cut-off point are determined from an enzymatic immunoassay, careful analysis of the statistical distribution of reference values is necesary in order to avoid the inappropiated in this study for antibodies against pigeon serum antigens

Capacidad de clínica y laboratorio para predecir el grado de fibrosis y el diagnóstico en enfermedades pulmonares intersticiales difusas / Clinical and laboraratory information to predict diagnosis and severity of fibrosis in diffuse interstitial lung diseases

Nuestro objetivo fue valorar la capacidad que tiene la información clínica y de laboratorio rutinaria para predecir los hallazgos, observables en una biopsia pulmonar, en los pacientes con enfermedades pulmonares intersticiales difusas. Para ello estudiamos 121 pacientes con biopsia pulmonar a cielo abierto de una cohorte de pacientes estudiados consecutivamente en el Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias de 1983 a 1987, con diagnósticos de neumonitis por hipersensibilidad (NH) y con neumonía intersticial usual (NIU). El diagnóstico (NIU vs NH) y el grado de fibrosis (< 50 por ciento de la superficie de la biopsia vs ò 50 por ciento), se utilizaron como estándares de oro para comparar con una serie de variables clínicas y de laboratorio obtenidas durante el estudio inicial de los pacientes. Para valorar la capacidad predictiva se utilizó la regresión logística por pasos: se calculó el modelo en la mitad de los pacientes tomados al azar y se aplicó a la mitad restante. Las variables predictorias del grado morfológico de fibrosis fueron (riesgo relativo e intervalo de confianza del 95 por ciento) la presencia de patrón radiológico en panal de abeja (RR 5.0, 0.9-29), el hipocratismo digital (RR 8, 1.4-48) y el género (rr 2.9, 0.4-20). Este modelo pudo clasificar correctamente al 72 por ciento de las biopsias con una sensibilidad de 0.38, especificidad de 0.85, y una kappa de 0.25 ñ 0.19 (p = 0.17 NS). Para el diagnóstico histológico (NIU vs NH), el modelo incluyó al género (RR 6.6, 1.3-33), patrón en panal (RR 1.6, 0.4-6.0), hipocratismo (RR 4.6, 1.2-18) y la capacidad vital como porciento del predicho (RR 0.96, 0.92-1.00). Utilizando este modelo se encontró una clasificasión correcta en el 72 por ciento de la muestra de prueba, con una sensibilidad de 0.56, especificidad de 0.82 y una prueba de concordancia kappa de 0.39 ñ 0.14 (p = 0.008). Aunque la combinación de las variables clínicas utilizadas mejora la predicción de los resultados de la biopsia esperada por azar, lo hace con una efectividad baja. Es posible separar grupos de riesgo muy alto o muy bajo (extremos) pero la mayor parte de la información obtenida por la biopsia no es recuperable de la información clínica y de laboratorio utilizada

Increased levels of leukotriene c4 in bronchoalveolar lavage from patients with pigeon breede's disease

En este estudio se midió la concentración de Leucotriene C4 (LTC4) y de complejos inmunes en el líquido obtenido po lavado broncoalveolar en pacientes con neumonitis por hipersensibilidad inducida por antígeno aviario (n=14), fibrosis pulmonar idiopática (n=5), neumonitis secundaria a artritis reumatoide (n=5), y en sujetos normales (n=4). Se encontró que los pacientes con neumonitis por hipersensibilidad tenían valores de LTC4 maiores que los sujetos normales (mediana, 5 ng/ml y 2.25 ng/ml, respectivamente) con p < 0.05, mientras que los pacientes con fibrosis pulmonar y artritis reumatóide tenían intermedios. Además, de 5 pacientes con neumonitis por hipersensibilidad y LTC4 < 4 ng/ml sólo uno tenía complejos inmunes elevados, mientras que de 9 pacientes con esta enfermedad y LTC4 > 4 ng/ml, 8 tenían complejos inmunes elevados (p < 0.03). Estos resultados sugieren que probablemente el LTC4 constituye uno de los mediadores biológicos que participan en la inflamación pulmonar de la neumonitis por hipersensibilidad inducida por antígeno aviario