RESUMO
Porcine circovirus 2 (PCV2) is associated with various clinical signs that are collectively designated as Circovirosis and has a great impact on the pig industry. The virus isolation is classically performed on PK-15 cell line, but other cells have been tested. Despite advances in studies with PCV2, isolation is still a challenge. The difficulty of maintaining these cell lines commonly used associated with the use of toxic substances to the isolation of PCV2 had stimulated the present study, that had the objectives to describe the first isolation of PCV2b in macrophage cell lines, J744 and verify the mutation rate at this system. A sample of lung was pooled and submitted to sequencing in which was classified in genotype PCV2b. This sample was used to inoculate a bottle of J744 with 30% of confluence in RPMI with 10% fetal bovine serum and submitted to five passages, which were accompanied by chain reaction quantitative polymerase (PCRq). The initial and final viral loads were 2.90 × 103 and 4.45 × 108 DNA copies/µL for PCV2b, respectively. Sequencing confirmed the isolation and had eliminated possible co-isolation of more than one genotype. After five passages, the isolate showed 99.7% identity with description of five point of non-synonymous or/and synonymous mutations observed in the cap and rep gene. The results demonstrate that J744 cells exhibit susceptibility, and the instability of the virus in J744 will be important for understanding the virus.
Porcine circovirus 2 (PCV2) está associado a vários sinais clínicos que são designados coletivamente como Circovirose e tem grande impacto na suinocultura. O isolamento viral é classicamente realizado em células da linhagem PK-15, contudo outras células têm sido testadas. Apesar dos avanços nos estudos com PCV2, o isolamento ainda é um desafio. Diante da dificuldade de manutenção dessas linhagens celulares comumente utilizadas associadas à necessidade do uso de substâncias tóxicas para o isolamento de PCV2, os objetivos do presente trabalho foram descrever o primeiro isolamento de Porcine circovirus 2b em linhagens de células de macrófago (J744) e verificar a taxa de mutação nesse sistema. Uma amostra de pulmão foi submetida ao sequenciamento e agrupada ao genótipo PCV2b. Essa amostra foi utilizada para inocular uma garrafa de J744 (com 30% de confluência em meio RPMI com 10% de soro fetal bovino) e submetida a cinco passagens, as quais foram acompanhadas por reação em cadeia da polimerase quantitativa (PCRq). As cargas virais inicial e final foram de 2,90 × 103 e de 4,45 × 108 cópias de DNA/µL para PCV2b, respectivamente. O sequenciamento confirmou o isolamento e descartou o coisolamento de mais de um genótipo. Após cinco passagens, o isolado apresentou identidade de 99,7%, com descrição de cinco mutações pontuais, uma sinônima e quatro não sinônimas, observadas nas regiões do gene cap e rep. Os resultados obtidos demonstram que as células J744 apresentam a susceptibilidade, e a instabilidade do vírus em J744 será importante para a compreensão do vírus.
Assuntos
Animais , Circovirus , Infecções por Circoviridae , Suínos , VírusRESUMO
Porcine circovirus 2 (PCV2) está associado a vários sinais clínicos que são designados coletivamente como Circovirose e tem grande impacto na suinocultura. O isolamento viral é classicamente realizado em células da linhagem PK-15, contudo outras células têm sido testadas. Apesar dos avanços nos estudos com PCV2, o isolamento ainda é um desafio. Diante da dificuldade de manutenção dessas linhagens celulares comumente utilizadas associadas à necessidade do uso de substâncias tóxicas para o isolamento de PCV2, os objetivos do presente trabalho foram descrever o primeiro isolamento de Porcine circovirus 2b em linhagens de células de macrófago (J744) e verificar a taxa de mutação nesse sistema. Uma amostra de pulmão foi submetida ao sequenciamento e agrupada ao genótipo PCV2b. Essa amostra foi utilizada para inocular uma garrafa de J744 (com 30% de confluência em meio RPMI com 10% de soro fetal bovino) e submetida a cinco passagens, as quais foram acompanhadas por reação em cadeia da polimerase quantitativa (PCRq). As cargas virais inicial e final foram de 2,90 × 103 e de 4,45 × 108 cópias de DNA/µL para PCV2b, respectivamente. O sequenciamento confirmou o isolamento e descartou o coisolamento de mais de um genótipo. Após cinco passagens, o isolado apresentou identidade de 99,7%, com descrição de cinco mutações pontuais, uma sinônima e quatro não sinônimas, observadas nas regiões do gene cap e rep. Os resultados obtidos demonstram que as células J744 apresentam a susceptibilidade, e a instabilidade do vírus em J744 será importante para a compreensão do vírus.(AU)
Porcine circovirus 2 (PCV2) is associated with various clinical signs that are collectively designated as Circovirosis and has a great impact on the pig industry. The virus isolation is classically performed on PK-15 cell line, but other cells have been tested. Despite advances in studies with PCV2, isolation is still a challenge. The difficulty of maintaining these cell lines commonly used associated with the use of toxic substances to the isolation of PCV2 had stimulated the present study, that had the objectives to describe the first isolation of PCV2b in macrophage cell lines, J744 and verify the mutation rate at this system. A sample of lung was pooled and submitted to sequencing in which was classified in genotype PCV2b. This sample was used to inoculate a bottle of J744 with 30% of confluence in RPMI with 10% fetal bovine serum and submitted to five passages, which were accompanied by chain reaction quantitative polymerase (PCRq). The initial and final viral loads were 2.90 × 103 and 4.45 × 108 DNA copies/µL for PCV2b, respectively. Sequencing confirmed the isolation and had eliminated possible co-isolation of more than one genotype. After five passages, the isolate showed 99.7% identity with description of five point of non-synonymous or/and synonymous mutations observed in the cap and rep gene. The results demonstrate that J744 cells exhibit susceptibility, and the instability of the virus in J744 will be important for understanding the virus.(AU)
Assuntos
Animais , Suínos , Circovirus , Infecções por Circoviridae , VírusRESUMO
A síndrome circovirose suína e doenças associadas (PCVAD) tem sido descrita em diversas regiões do mundo. Seu agente primário, o circovírus suíno tipo 2 (PCV2), está associado a elevados índices de refugagem nas granjas e a vultuosos prejuízos econômicos. Diversos fatores de risco estão relacionados à manifestação dos quadros clínicos da síndrome, nomeadamente deficiências de manejo, presença de coinfecções e imunização diante do agente. Entre os agentes frequentemente relatados associados ao PCV2 está o Mycoplasma hyopneumoniae. Este estudo objetivou verificar a ocorrência de M. hyopneumoniae em animais diagnosticados estarem acometidos pela PCVAD, em sistemas intensivos de produção de suínos do estado de Goiás. Amostras de secreção nasal de 40 animais foram analisadas para a pesquisa do DNA de M. hyopneumoniae. Do total das amostras de secreção nasal, 6 (15%) foram positivas na reação em cadeia da polimerase (PCR) para o M. hyopneumoniae, apenas em granjas que não praticavam a vacinação contra esse agente. Os resultados relacionados à presença de micoplasma estão de acordo com os achados clínicos dos animais analisados que apresentavam sintomatologia de doenças respiratórias e lesões relacionadas ao trato respiratório. Este é o primeiro relato da associação de PCV2 com M. hyopneumoniae em suínos identificados com PCVAD no estado de Goiás.(AU)
Porcine circovirus associated diseases (PCVAD) have been reported around the world. They are associated with high culling rates and large economic losses. Porcine circovirus type 2 (PCV2) is the primary causative agent. Several risk factors are related to the manifestation of clinical syndrome, including deficiencies of management, presence of co-infections and immunization against involved agents. Mycoplasma hyopneumoniae is often reported as an agent associated to PCV2 infections. The aim of this study was to verify the occurrence of M. hyopneumoniae in animals diagnosed with PCVAD in intensive pig farming systems in Goiás, Brazil. Forty nasal secretion samples were collected for M. hyopneumoniae DNA detection by polymerase chain reaction (PCR). Out of this, 6 (15%) were positive for M. hyopneumoniae DNA. All positive samples were collected from animals in non-vaccinated herds. Mycoplasma has been detected in animals showing clinical signs and lesions of respiratory diseases. To our knowledge, this is the first report of PCV2 association with M. hyopneumoniae in pigs with PCVAD identified in the state of Goiás, Brazil.(AU)
Assuntos
Animais , Suínos , Circovirus , Infecções por Circoviridae , Mycoplasma hyopneumoniae , Aves Domésticas , VacinaçãoRESUMO
This paper reports the occurrence of porcine demodicosis caused by the mite Demodex phylloides in hogs reared in a peri-urban family farm located in Francisco Morato, a municipality of the Metropolitan Region of São Paulo, capital city of the state of São Paulo, Brazil. In a parcel of forty Landrace - Large White cross hogs, approximately four months old, four animals presented severe skin lesions in the form of small nodules over their entire body, especially in the periocular region, snout, lower abdomen and flanks. Two hogs had to be euthanized for animal welfare reasons, which enabled post-mortem examination. Skin scrapings revealed eggs, larvae, nymphs and adults of D. phylloides. Purulent subcutaneous nodules with intense parasitic folliculitis and intense perifollicular inflammatory reaction were present. Enterobacteria and coagulase-positive Staphylococcus spp. were isolated from the skin pustules. Necropsy revealed milk spotted liver, enteritis and enlargement of mesenteric lymph nodes. Protozoa (Eimeria spp. and Balantidium sp.), helminth eggs (Ascaris suum, Trichuris suis and strongyles) and Brachyspira spp. were found in faeces. Staphylococcus spp. and enterobacteria were isolated from internal organs. All remaining hogs were treated with ivermectin at a daily oral dose of 0.45g/kg of feed, during seven days. Fifteen days after treatment, remission of symptoms was observed in the surviving animals with demodicosis; absence of mites was confirmed by skin scraping examinations. The hogs were reared under poor environmental, nutritional and sanitary conditions, resulting in multimorbidity and immunosuppression. Severe clinical porcine demodicosis was triggered when the animals were castrated. Family pig farmers had been suffering economic losses due to the stunted growth of the herd. In addition to that, the lesions found on the skin and in the internal organs would result in condemnation of meat and viscera for human consumption. As part of a Public Policies Project, farm facilities were renovated with governmental aid, while family farmers received training. Good management practices and biosecurity measures were introduced in the herd. Educative policies and financial support were important to guide family pig farmers towards better husbandry practices, allowing them to raise healthy hogs in compliance with market demands.
Assuntos
Infestações por Ácaros/veterinária , Doenças dos Suínos/parasitologia , Criação de Animais Domésticos/normas , Animais , Brasil , Infestações por Ácaros/parasitologia , Infestações por Ácaros/patologia , Infestações por Ácaros/prevenção & controle , Ácaros/fisiologia , Suínos , Doenças dos Suínos/patologia , Doenças dos Suínos/prevenção & controle , População UrbanaRESUMO
Peccaries and pigs, Tayassuidae and Suidae respectively, diverged approximately one million years ago from a common ancestor. Because these families share some pathogens, peccaries can act as reservoirs of infectious pathogens for domestic and wild swine. We evaluated the presence of swine infectious agents in the spleen and lung tissues of white-lipped peccaries (WLP; Tayassu pecari) and collared peccaries (CP; Pecari tajacu) in Brazil. Samples from 10 adult CP and three WLP, which had been hunted by locals or hit by motor vehicles, were obtained from two free-ranging Brazilian populations. The samples were tested by PCR for Mycoplasma hyopneumoniae, Bordetella bronchiseptica, Pasteurella multocida, porcine circovirus 2 (PCV2), Suid herpesvirus 1 (SuHV-1), and porcine parvovirus (PPV). Positive samples were sequenced. Both species were negative for PPV and B. bronchiseptica and positive for PCV2 and SuHV-1. The lungs of two animals were positive for M. hyopneumoniae and P. multocida. This report is the first demonstration of PCV2 and SuHV-1 swine viruses and of M. hyopneumoniae and P. multocida bacteria in peccaries. One factor contributing to this detection was access to tissue samples, which is uncommon. The role of these infectious agents in peccaries is unknown and further epidemiologic studies should be performed. This study identified several infectious agents in peccaries and highlighted the importance of the tissue type used to detect pathogens.
Assuntos
Artiodáctilos , Infecções Bacterianas/veterinária , Doenças dos Suínos/microbiologia , Doenças dos Suínos/virologia , Viroses/veterinária , Animais , Infecções Bacterianas/epidemiologia , Infecções Bacterianas/microbiologia , Brasil/epidemiologia , Especificidade da Espécie , Suínos , Doenças dos Suínos/epidemiologia , Viroses/epidemiologia , Viroses/virologiaRESUMO
Relata-se duas ocorrências de encefalite em suínos causadas por Pseudomonas aeruginosa hemolítica, isoladas em cultura pura a partir de fragmentos de encéfalo e cerebelo, oriundos de animais com suspeita clínica de meningite estreptocócica. Esta é uma notificaçäo primária deste tipo de patologia, näo tendo sido encontrado, na bibliografia consultada, qualquer caso semelhante. Ressalta-se a importância do diagnóstico diferencial com outros processos onde haja comprometimento nervoso, sendo igualmente um alerta aos médicos veterinários clínicos, pois embora rara, esta patologia poderá tornar-se um risco comum na criaçäo de suínos