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2.
Mol Cell Proteomics ; 14(11): 2857-77, 2015 Nov.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-26330543

RESUMO

Macrophages provide the first line of host immune defense. Their activation triggers the secretion of pro-inflammatory cytokines and chemokines recruiting other immune cells. In cancer, macrophages present an M2 anti-inflammatory phenotype promoting tumor growth. In this way, strategies need to be develop to reactivate macrophages. Previously thought to be expressed only in cells with a neural/neuroendocrine phenotype, the proprotein convertase 1/3 has been shown to also be expressed in macrophages and regulated as a function of the Toll-like receptor immune response. Here, we investigated the intracellular impact of the down-regulation of the proprotein convertase 1/3 in NR8383 macrophages and confirmed the results on macrophages from PC1/3 deficient mice. A complete proteomic study of secretomes and intracellular proteins was undertaken and revealed that inhibition of proprotein convertase 1/3 orient macrophages toward an M1 activated phenotype. This phenotype is characterized by filopodial extensions, Toll-like receptor 4 MyD88-dependent signaling, calcium entry augmentation and the secretion of pro-inflammatory factors. In response to endotoxin/lipopolysaccharide, these intracellular modifications increased, and the secreted factors attracted naïve T helper lymphocytes to promote the cytotoxic response. Importantly, the application of these factors onto breast and ovarian cancer cells resulted in a decrease viability or resistance. Under inhibitory conditions using interleukin 10, PC1/3-knockdown macrophages continued to secrete inflammatory factors. These data indicate that targeted inhibition of proprotein convertase 1/3 could represent a novel type of immune therapy to reactivate intra-tumoral macrophages.


Assuntos
Imunoterapia/métodos , Macrófagos Alveolares/imunologia , Macrófagos Peritoneais/imunologia , Pró-Proteína Convertase 1/antagonistas & inibidores , Animais , Linfócitos T CD4-Positivos/efeitos dos fármacos , Linfócitos T CD4-Positivos/imunologia , Linfócitos T CD4-Positivos/patologia , Linfócitos T CD8-Positivos/efeitos dos fármacos , Linfócitos T CD8-Positivos/imunologia , Linfócitos T CD8-Positivos/patologia , Cálcio/metabolismo , Linhagem Celular , Linhagem Celular Tumoral , Citocinas/biossíntese , Citocinas/imunologia , Regulação da Expressão Gênica , Humanos , Células Matadoras Naturais/efeitos dos fármacos , Células Matadoras Naturais/imunologia , Células Matadoras Naturais/patologia , Lipopolissacarídeos/farmacologia , Macrófagos Alveolares/citologia , Macrófagos Alveolares/efeitos dos fármacos , Macrófagos Peritoneais/citologia , Macrófagos Peritoneais/efeitos dos fármacos , Camundongos , Camundongos Knockout , Fator 88 de Diferenciação Mieloide/genética , Fator 88 de Diferenciação Mieloide/imunologia , Cultura Primária de Células , Pró-Proteína Convertase 1/genética , Pró-Proteína Convertase 1/imunologia , Análise Serial de Proteínas , RNA Interferente Pequeno/genética , RNA Interferente Pequeno/metabolismo , Ratos , Transdução de Sinais , Linfócitos T Auxiliares-Indutores/efeitos dos fármacos , Linfócitos T Auxiliares-Indutores/imunologia , Linfócitos T Auxiliares-Indutores/patologia , Receptor 4 Toll-Like/genética , Receptor 4 Toll-Like/imunologia
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