RESUMO
A phage-displayed peptide approach was used to identify ligands mimicking antigenic determinants of hepatitis A virus (HAV) for the first time. Bacteriophages displaying HAV mimotopes were isolated from a phage-display peptide library by affinity selection on serum antibodies from hepatitis A patients. Selected phage-peptides were screened for reactivity with sera from HAV infected patients and healthy controls. Four cloned peptides with different sequences were identified as mimotopes of HAV; three of them showed similarity in their amino acid sequences with at least one of the VP3 and VP1 antigenic proteins of HAV. One clone was recognised by 92% of the positive sera. The phagotopes competed effectively with HAV for absorption of anti-HAV-specific antibodies in human sera, as determined by ELISA. The four phage clones induced neutralising anti-HAV antibodies in immunised mice. These results demonstrate the potential of this method to elucidate the disease related epitopes of HAV and to use these mimotopes in diagnostic applications or in the development of a mimotope-based hepatitis A vaccine without the necessity of manipulation of the virus.
Assuntos
Bacteriófagos/imunologia , Antígenos da Hepatite A/imunologia , Vírus da Hepatite A Humana/imunologia , Mimetismo Molecular/imunologia , Biblioteca de Peptídeos , Sequência de Aminoácidos , Animais , Bacteriófagos/genética , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática , Antígenos da Hepatite A/química , Vírus da Hepatite A Humana/genética , Humanos , Soros Imunes/imunologia , Camundongos , Camundongos Endogâmicos BALB C , Dados de Sequência Molecular , Testes de Neutralização , Peptídeos/imunologia , Peptídeos/isolamento & purificação , Homologia de Sequência de AminoácidosAssuntos
Humanos , Criança , Genes Virais , Hepatovirus/classificação , Hepatovirus/genética , Hepatite A/epidemiologiaRESUMO
Se estudió una muestra de 1.094 escolares seleccionados por conveniencia, del Grupo Escolar "Cerritos Blancos" de Barquisimeto, Estado Lara (1982 - 1983), a los cuales se les aplicó la prueba tuberculínica, siendo un alto porcentaje (95,24 por ciento) negativos, a pesar de que la mayoría (84.82 por ciento) estaban vacunados con B.C.G. No se encontraron diferencias significativas entre los vacunados, el estado nutricional y la respuesta al P.P.D. De esto se concluye que la prueba tuberculínica no parece ser una medida muy eficaz para evaluar la alergia conferida con la vacunación B.C.G, cuando se realiza con dos unidades internacionales (0.1 cc.), que son las condiciones y metodología con las cuales se realizó este trabajo y para juzgarla debidamente hay que emplear reacciones tuberculínicas muy sensibles, y cuando la alergia cutánea disminuya de intensidad, el aumentar la dosis de tuberculina permite obtener reacciones positivas