Microemulsion co-delivering vitamin A and vitamin E as a new platform for topical treatment of acute skin inflammation.

In this study, we developed a water-in-oil microemulsion containing vitamin A (retinol) and vitamin E (α-tocopherol), which serves as a multifunctional nanosystem that co-delivers antioxidants and displayed additive effect against acute skin inflammation. Microemulsion (ME) was prepared by mixing a surfactant blend (Tween 80 and propylene glycol, 5:1) with isopropyl myristate and water (ratio of 50:40:10, respectively). Vitamin A (0.05% w/w concentration) and/or vitamin E (0.1% w/w concentration) were incorporated into the surfactant mixture of ME by stirring with a magnetic stirrer for 30 min. This multifunctional ME displayed physical stability, with low cytotoxicity in 3T3 cell line, as well as cellular internalization into the cytosol. In vivo treatments using ME delivering α-tocopherol reduced dermal expression of TNF-α by 1.3-fold (p < 0.01), when compared to unloaded ME treatment group. When retinol was added into the ME containing α-tocopherol, it further reduced TNF-α expression by 2-fold (p < 0.001), suggesting the additive effect of vitamin E and vitamin A in the treatment against skin inflammation. In conclusion, we successfully developed the use of water-in-oil ME to pack both vitamin E and vitamin A, and demonstrated for the first time its anti-inflammatory potential when applied topically to TPA-induced inflamed skin.

Nanostructured lipid carrier co-delivering tacrolimus and TNF-α siRNA as an innovate approach to psoriasis.

Since psoriasis is an immuno-mediated skin disease, long-term therapies are necessary for its treatment. In clinical investigations, tacrolimus (TAC), a macrolide immunosuppressive inhibitor of calcineurin, arises as an alternative for the treatment of psoriasis, acting in some cytokines involved in the pathogenesis of the disease. Here, we aim to study the psoriasis treatment with TAC and siRNA for one of most cytokines expressed in psoriasis, the TNF-α. A multifunctional nanostructure lipid carrier (NLC) was developed to co-delivery TAC and siRNA. Results showed that the particle size and zeta potential were around 230 nm and + 10 mV, respectively. The release study demonstrated a controlled release of TAC, and the permeation and retention profile in the skin tissue show to be promising for topical application. The cell viability and uptake in murine fibroblast presented low toxicity associated to uptake of NLC in 4 h, and finally, the in vivo animal model demonstrates the efficiency of the NLC multifunctional, exhibiting a reduction of the cytokine TNF-α expression about 7-fold and presenting a synergic effect between the TAC and TNF-α siRNA. The developed system was successfully to treat in vivo psoriatic animal model induced by imiquimod and the synergic combination was reported here for the first time. Graphical abstract.

Evaluation of critical parameters for in vitro skin permeation and penetration studies using animal skin models.

In vitro skin permeation/penetration studies may be affected by many sources of variation. Herein, we aimed to investigate the major critical procedures of in vitro skin delivery studies. These experiments were performed with model drugs according to official guidelines. The influence of skin source on penetration studies was studied as well as the use of a cryopreservation agent on skin freezing evaluated by transepidermal water loss, electrical resistance, permeation/penetration profiles and histological changes of the skin. The best condition for tape stripping procedure was validated through the evaluation of the distribution of corneocytes, mass of stratum corneum (SC) removed and amount of protein removed using finger pressure, a 2kg weight and a roller. The interchangeability of the tape stripping procedures followed by the epidermis and dermis homogenate and the micrometric horizontal cryostat skin sectioning methods were also investigated, besides the effect of different formulations. Noteworthy, different skin sources were able to ensure reliable interchangeability for in vitro permeation studies. Furthermore, an increased penetration was obtained for stored frozen skin compared to fresh skin, even with the addition of a cryoprotectant agent. The best method for tape stripping was the finger pressure followed by the addition of a propylene glycol solvent leading to better SC removal. Finally, no significant difference was found in skin penetration studies performed by different methods suggesting their possible interchangeability.

Liquid Crystalline Systems Based on Glyceryl Monooleate and Penetration Enhancers for Skin Delivery of Celecoxib: Characterization, In Vitro Drug Release, and In Vivo Studies.

Celecoxib (CXB) is a widely used anti-inflammatory drug that also acts as a chemopreventive agent against several types of cancer, including skin cancer. As the long-term oral administration of CXB has been associated with severe side effects, the skin delivery of this drug represents a promising alternative for the treatment of skin inflammatory conditions and chemoprevention of skin cancer. We prepared and characterized liquid crystalline systems based on glyceryl monooleate and water containing penetration enhancers which were primarily designed to promote skin delivery of CXB. Analysis of their phase behavior revealed the formation of cubic and hexagonal phases depending on the systems' composition. The systems' structure and composition markedly affected the in vitro CXB release profile. Oleic acid reduced CXB release rate, but association oleic acid/propylene glycol increased the drug release rate. The developed systems significantly reduced inflammation in an aerosil-induced rat paw edema model. The systems' composition and liquid crystalline structure influenced their anti-inflammatory potency. Cubic phase systems containing oleic acid/propylene glycol association reduced edema in a sustained manner, indicating that they modulate CXB release and permeation. Our findings demonstrate that the developed liquid crystalline systems are potential carriers for the skin delivery of CXB.

Ketoprofen Microemulsion for Improved Skin Delivery and In Vivo Anti-inflammatory Effect.

We have designed a microemulsion (ME) containing Ketoprofen (KET) for anti-inflammatory effect evaluated using the rat paw edema model. The ME was prepared by adding propylene glycol (PG) loaded with 1% KET/water (3:1, w/w), to a mixture of sorbitan monooleate and polysorbate 80 (47.0%) at 3:1 (w/w) and canola oil (38.0%). The physicochemical characterization of KET-loaded ME involved particle size and zeta potential determination, entrapment efficiency, calorimetric analysis, and in vitro drug release. The in vivo anti-inflammatory study employed male Wistar rats. Measurement of the foot volume was performed using a caliper immediately before and 2, 4, and 6 h after injection of Aerosil. KET-loaded ME showed particle size around 20 nm, with zeta potential at -16 mV and entrapment efficiency at 70%. Moreover, KET was converted to the amorphous state when loaded in the formulation and it was shown that the drug was slowly released from the ME. Finally, the in vivo biological activity was similar to that of the commercial gel, but ME better controlled edema at 4 h. These results demonstrated that the ME formulation is an alternative strategy for improving KET skin permeation for anti-inflammatory effect. Furthermore, our findings are promising considering that the developed ME was loaded with only 1% KET, and the formulation was able to keep a similar release profile and in vivo effect compared to the commercial gel with 2.5% KET. Therefore, the KET-loaded developed herein ME is likely to have a decreased side effect compared with that of the commercial gel, but both presented the same efficacy.

Avaliação da citotoxicidade da microemulsão contendo o fotossensibilizador ZNPCSO4, sobre cultura de célula de linhagem de câncer de mama / Evaluación de la citotoxicidad de la microemulsión que contiene el fotosensibilizador ZNPCSO4, en la cultura celular del cáncer de mama / Cytotoxicity evaluation of microemulsion containing the photosensibilizer ZNPCSO4, on breast cancer cell culture line

Introdução: O câncer de mama tem alta incidência e mortalidade dentre todos os tipos de câncer e, apesar de todos os avanços tecnológicos recentes,mantém-se ainda como um problema mundial de saúde pública. Novas estratégias terapêuticas, como a Terapia Fotodinâmica, têm sido usadas para tratarvários tipos de tumores de tecidos moles e hiperplasia. Objetivo: Caracterizar o efeito citotóxico da microemulsão contendo zinco ftalocianina tetrasulfonada(ZnPcSO4). Material e Método: A microemulsão (ME) foi preparada por adição da fase aquosa (15%) composta de propilenoglicol e água (3:1), em umamistura de fase oleosa composta pelos surfactantes monooleato de sorbitanol e polissorbato 80 (47%) e óleo de canola (38%). Para o teste de citotoxicidadefoi realizado o ensaio de MTT com as células MCF-7 de adenocarcinoma de mama humana. Resultados: Os baixos valores de condutividade obtidos (0,63e 0,53 para ME com e sem ZnPcSO4, respectivamente) indicaram que a ME era de tipo água/óleo. O diâmetro interno das partículas foi na ordem de 60nmna presença e ausência do ZnPcSO4 sugerindo que a presença do fotossensibilizante não alterou as propriedades do sistema nanoestruturado. O índicede polidispersividade foi menor do que 0,10, enquanto que a carga superfi cial da nanopartícula foi negativa, em concordância com as característicasdos compostos utilizados para o preparo da ME. A atividade metabólica das células não sofreu interferências com as MEs não demonstrando toxicidade...

Introduction: Breast cancer has a high incidence and mortality among all types of cancer and, despite all the recent technological advances, still remains aworldwide public health problem. New therapeutic strategies, such as Photodynamic Therapy, have been used to treat various types of soft tissue tumorsand hyperplasia. Objective: To characterize the cytotoxic effect of the zinc-containing microemulsion containing tetrasulf...

Introducción: El cáncer de mama tiene alta incidencia y mortalidad entre todos los tipos de cáncer y, a pesar de todos los avances tecnológicos recientes,sigue siendo un problema mundial de salud pública. Nuevas estrategias terapéuticas, como la Terapia Fotodinámica, se han utilizado para tratar varios tiposde tumores de tejidos blandos e hiperplasia. Objetivo: Caracterizar el efecto citotóxico de la microemulsión que contiene el cinc ftalocianina tetrasulfonada(ZnPcSO4). Material y método: La microemulsión (ME) fue preparada por adición de la fase acuosa (15%) compuesta de propilenglicol y agua (3: 1), enuna mezcla de fase oleosa compuesta por los surfactantes monooleato de sorbitanol y polisorbato 80 (47%), Y el aceite de canola (38%). Para la pruebade citotoxicidad se realizó el ensayo de MTT con las células MCF-7 de adenocarcinoma de mama humana. Resultados: Los bajos valores de conductividadobtenidos (0,63 y 0,53 para ME con y sin ZnPcSO4, respectivamente)...

Sorologia e avaliação clínica: correlação no diagnóstico da Dengue / Sorología y evaluación clínica: correlación en el diagnóstico del Dengue / Sorology and clinical evaluation: correlation in the diagnosis of Dengue

Introdução: A dengue é uma enfermidade infecciosa aguda do tipo arbovirose, transmitida principalmente pela fêmea do mosquito daespécie Aedes aegypti que, após a picada, inocula o vírus que se dissemina pelo organismo do novo hospedeiro. A infecção desencadeiaprocessos imunológicos que são regidos por fatores variantes para cada indivíduo, como a idade. Diante do envelhecimento populacional,devem-se salientar as mudanças fi siopatológicas do organismo idoso, dentre as quais estão alterações do sistema imunológico,identifi cadas e caracterizadas como “imunossenescência”, desencadeando mudanças no padrão de defesa do indivíduo e na manutençãoda homeostase frente a infecções, infl amações, neoplasias e degenerações. À vista disso, o imunossenescente se torna mais suscetívela infecções e apresenta menor resposta às imunizações quando comparado a sistemas imunes mais jovens. Objetivo: Realizar umlevantamento dos pacientes adultos jovens (idade entre vinte e quarenta anos) e idosos (idade igual ou acima de sessenta anos)diagnosticados com dengue, dengue com sinais de alarme e dengue grave, no período entre 2012 e 2015, na cidade de Catanduva-SP.Material e Método...

Introduction: Dengue is an acute infectious disease of the arbovirosis type, transmitted mainly by the female of the Aedes aegyptispecies mosquito, which, after the bite, inoculates the virus which spreads through the body of the new host. The infection triggersimmunologic processes, which are ruled by variant factors for each individual, such as age. Taking in account population aging, we musthighlight the pathophysiological changes of the elderly organism, among which there are changes of the immune system, identifi ed andcharacterized as "immunosenescence", triggering changes in the individual's defensive pattern and in homeostasis maintenance againstinfections, infl ammations, neoplasms and degenerations. Accordingly, the immunosenescent becomes more susceptible to infections andpresents less response to immunizations if compared with younger immune systems. Objective: To carry out a survey of young adult(aged between twenty and forty) and elderly patients (age of sixty or above) diagnosed with dengue, dengue fever with signs of alarmand severe dengue, between 2012 and 2015, in the city of Catanduva-SP. Material and Method: It was a retrospective study, basedon the data provided by the Catanduva’s Municipal Health Secretary. We analyzed how many developed severe forms of the diseaseand how many died due to...

Introdución: El dengue es una enfermedad infecciosa aguda del tipo arbovirosis, transmitida principalmente por la hembra del mosquitode la especie Aedes aegypti que, después de la picadura, inocula el virus que se disemina por el organismo del nuevo huésped.La infección desencadena procesos inmunológicos que se rigen por factores variantes para cada individuo, como la edad. Ante elenvejecimiento poblacional, se deben resaltar los cambios fi siopatológicos del organismo anciano, entre los cuales están alteraciones delsistema inmunológico, identifi cadas y caracterizadas como "inmunosencencia", desencadenando cambios en el patrón de defensa delindividuo y en el mantenimiento de la homeostasis frente a infecciones, infl amaciones, neoplasias y degeneraciones. A la vista de ello, elinmunosinente se vuelve más susceptible a infecciones y presenta menor respuesta a las inmunizaciones cuando comparado a sistemasinmunes más jóvenes. Objetivo: Realizar un levantamiento de los pacientes adultos jóvenes (edad entre veinte y cuarenta años) yancianos (edad igual o superior a sesenta años) diagnosticados con dengue, dengue con señales de alarma y dengue grave, en el períodoentre 2012 y 2015, en la ciudad de Catanduva-SP. Material y Método: Estudio retrospectivo realizado a partir del suministro de datospor la Secretaría Municipal de Salud de Catanduva-SP. Se analizaron cuántas personas desarrollaron formas graves y cuántas fallecierondebido a complicaciones de esa enfermedad, a fi n de establecer una relación entre la inmunosenescencia y la mayor morbimortalidad alas infecciones como la arbovirosis citada. Resultados: Frente al análisis, del total de casos de dengue grave, el 9,5% acomete pacientesadultos jóvenes...

Comparação do perfil de liberação de nitrato de isoconazol em formas farmacêuticas semissólidas usando modelo matemático de diferença (f1) e semelhança (f2) / Comparación de perfiles de liberación del nitrato isoconazol en formas farmacéuticas semisólido utilizando el modelo de diferencia matemática (f1) y semejanza (f2) / Comparison of isoconazole nitrate release profile in pharmaceutical semisolid forms using f1 (differential) and f2 (similarities) mathematical models

Introdução: A comprovação da eficácia e segurança de produtos é dada por meio dos estudos de equivalência farmacêutica e bioequivalência. Abioequivalência entre os dois produtos farmacêuticos pode ser demonstrada por meio de estudos diferentes: farmacocinético, farmacodinâmico,clínicos comparativos ou ensaios in vitro. Objetivo: Comparar o perfil de liberação in vitro do nitrato de isoconazol a partir de medicamentosreferência e genéricos, aplicando dois diferentes modelos estatísticos para a análise dos resultados baseados nos fatores F1 e F2. Material eMétodo: Os perfis de liberação do nitrato de isoconazol foram determinados em condições previamente otimizadas em célula de difusão verticalcontendo solução 0,01M de fosfato de sódio (pH 7,4) como meio receptor (7 mL) e membrana sintética de acetato de celulose (com área dedifusão de 1,77 cm2). Após 1, 2, 3, 4, 6 e 8 horas de experimento, exatos 1,0 mL da solução receptora foi coletada e a quantidade de nitratode isoconazol presente na solução foi analisada por método validado de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência. O fluxo de entrega do nitratode isoconazol foi obtido com base no perfil de liberação utilizando a porção linear da curva. Os valores de diferença e semelhança, F1 e F2,respectivamente, obtidos entre as curvas de liberação de nitrato de isoconazol, foram aplicados como uma ferramenta de análise da equivalênciafarmacêutica de formas semissólidas. Resultados: Houve equivalência farmacêutica entre os medicamentos referência e genérico, considerando osnúmeros de lotes utilizados nestes ensaios...

Introduction: Evidence of efficacy and safety of products is given through pharmaceutical equivalence and bioequivalence studies. Bioequivalencebetween the two pharmaceutical products can be demonstrated by different studies: pharmacokinetics, pharmacodynamics, comparative clinicaltrials or in vitro assay. Objective: To compare the in vitro release profile of isoconazole nitrate from reference and generic drugs using twodifferent statistical models based on factors F1 and F2. Material and Method: The release profiles of isoconazole nitrate were determined underpre-optimized conditions in a vertical diffusion cell containing 0.01M sodium phosphate solution (pH 7.4) as receptor medium (7mL) and syntheticcellulose acetate membrane (with diffusion area of 1.77 cm2). After 1, 2, 3, 4, 6 and 8 hours of permeation, exactly 1.0 mL of the receptor solutionwas collected and the amount of isoconazole nitrate was analyzed by validated High Performance Liquid Chromatography method. The isoconazolenitrate delivery flow was obtained based on the release profile using the linear portion of the curve. The values of difference and similarity, F1 andF2 respectively, obtained between the release curves of isoconazole nitrate from generic and reference products, were applied as a tool for analysisof the pharmaceutical equivalence of semisolid forms. Results: There was a pharmaceutical equivalence between reference and generic drugs,considering the batches number...

Introducción: La prueba de la eficacia y seguridade del producto está dada por los estudios de equivalência farmacéutica y bioequivalência. Labioequivalencia entre las dos productos farmacêuticos puede ser demostrada en diversos estudios: farmacocinética, farmacodinámica, clínicos yencomparación in vitro. Objetivo: Comparar el perfil de liberación in vitro de nitrato de isoconazol de medicamentos genéricos y de referencia,utilizando dos diferentes modelos estadísticos para el análisis de los resultados en función de los factores F1 y F2. Material y Método: Los perfilesde liberación de isoconazol han sido determinados en condiciones de nitrato isoconazol previamente optimizados en la célula de difusión verticalque contiene solución de fosfato de sodio 0,01 M (pH 7,4) como medio receptor (7 ml) y membrana sintética (con 1,77 cm2 área de difusión).Después de 1, 2, 3, 4, 6 y 8 horas de experimento se recogieronexactamente 1,0 ml de solución de receptor y la cantidad de nitrato isoconazolen lasolución se analizó por lacromatografía líquida de alto rendimiento. Se obtuvo el flujo de entrega isoconazol nitrato basado en el perfil deliberación usando la parte lineal de la curva. Las diferencias y semejanza de los valores, F1 y F2, respectivamente, obtenidos a partir de las curvasde liberación de nitrato isoconazol, se aplicaron como una herramienta de análisis de equivalência farmacéutica de formas semisólidas. Resultados:Se demostró la equivalência farmacéutica entre lós...

Combinação terapêutica no tratamento do melasma / Combinada en el tratamiento melasma / Combination therapy in the treatment of melasma terapia

Introdução: Melasma é uma discromia comum crônica, localizada, simétrica e adquirida, que acomete áreas fotoexpostas,preferencialmente a face. Mais frequente entre mulheres adultas, causa por cicatriz inestética, estresse emocional e impacto social,interferindo na autoestima e qualidade de vida pessoal. De patogênese não totalmente compreendida, tem alguns fatores de riscoconhecidos, como a história familiar, exposição solar, gravidez, hormônios sexuais, cosméticos, medicamentos fotossensibilizantes eevidente predisposição genética. A inibição eficiente da tirosinase humana, principal enzima envolvida na produção de melanina, diretae indiretamente promovida por ativos despigmentantes, como também o uso de diversos tipos de laser, fitoterápicos de uso oral como oPolypodium leucotomos, moléculas antioxidantes e indutores de reparação celular, usados de forma combinada, associados à adequadaproteção aos raios ultravioletas têm proporcionado avanços no tratamento, contribuindo para restabelecer a qualidade de vida. Objetivo:Apresentar os resultados de um caso clínico em que se utilizou tratamento combinado a uma paciente com melasma e relatar a eficáciadas combinações terapêuticas...

Introduction: Melasma is a chronic, localized, symmetrical and acquired common dyschromia that affects photo exposed areas, preferablythe face. More frequent among adult women, it causes, due to esthetic cicatrix problems, emotional stress and social impact by interferingin self-esteem and personal quality of life. Its pathogenesis is not fully understood but there are some known risk factors, such as familyhistory, sun exposure, pregnancy, sex hormones, cosmetics, photosensitizing drugs and an obvious genetic predisposition. The efficientinhibition of human tyrosinase, the key enzyme involved in melanin production, directly and indirectly promoted by active lighteners,as well as the use of various types of laser, oral herbal medicines, such as Polypodium Leucotomos, antioxidant molecules and cellularrepair inducers, used in a combined way, associated with adequate protection from ultraviolet rays, have provided advances in thetreatment, helping to restore the quality of life. Objective: To present the results of a clinical case in which we used combined treatmentin a female patient with melasma and to report the effectiveness of therapeutic combinations compared to monotherapy in the treatmentof this disease. Material and Method: It is a descriptive study developed through the report of a clinical trial in which we used for thetreatment of melasma an oral peeling in association with antioxidants for 60 days, as well as a topic and oral sunscreen. Result: Therewas a remarkable improvement in melasma...

Introdución: El melasma es un dischromia crónica común situada, simétrica y adquirida que afecta a las áreas foto expuestas,preferentemente la cara. Más común entre las mujeres adultas, debido a que el esfuerzo de impacto cicatriz antiestético, emocional ysocial, que afecta a la autoestima y la calidad de vida personal. La patogénesis no se entiende completamente y tiene algunos factoresde riesgo conocidos como los antecedentes familiares, la exposición al sol, el embarazo, las hormonas sexuales, cosméticos, fármacosfotosensibilizantes y la predisposición genética obvia. La inhibición eficiente de la tirosinasa humana, la principal enzima implicada en laproducción de melanina, directa e indirectamente promovido por aclaradores activos, así como el uso de varios tipos de láser, uso orala base de hierbas como Polypodium leucotomos, moléculas antioxidantes e inductores de reparación celular utilizados en combinación,asociados a una adecuada protección a los rayos ultravioleta han proporcionado avances en el tratamiento, ayudando a restaurar lacalidad de vida. Objetivo: Presentar los resultados de un caso clínico, que usa el tratamiento combinado a un paciente con el melasma yel informe de la eficacia de las terapias de combinación en comparación con la monoterapia en el tratamiento de esta condición. Materialy Métodos: Se realizó un estudio descriptivo desarrollado por el informe de un ensayo clínico en el que se empleó descamación oral encombinación con antioxidantes durante 60 días y uso de protección sola...

Ética na pesquisa científica e propriedade intelectual / Ethics in scientific research and intellectual property

A ética, emoldurada pela ciência e pela arte, na enfermagem, enriquece e embeleza o cuidado ao paciente, valorizando a essência do “ser”, no contexto da complexidade do existir, em respeito ao princípio norteador que a moraliza1. O cuidado de enfermagem é respaldado no respeito ao ser humano na sua dimensionalidade ética, moral, cultural, ambiental, política e econômica. Na sociedade atual, é necessário refletir sobre a perda do sentido moral do indivíduo que relativiza o certo e o errado, o justo e o injusto1.Paulo Freire, em sua obra “Carta de Paulo Freire aos professores”, descreve a existência de uma responsabilidade ética, política e profissional do docente no ato de ensinar e aprender2. Nenhum docente deve mover suas ações no papel de repassador de conteúdo. O campo da ética na educação acadêmica não se confunde com o das leis, e tampouco com o da moral. Trata-se de um campo suportado por regras que exigem um engajamento autônomo nas questões de convivência entre os semelhantes, fundamentado em torno da fidelidade às regras de determinada prática profissional/social para os indivíduos nela envolvidos3,4.Na Pesquisa Científica, a ética na autoria intelectual é que deverá manter o autor no limite tênue entre a inspiração na ideia de outros autores e sua cópia propriamente dita. Este entendimento tem seu início com a questão sobre o que é ser um autor e, neste contexto, diferentes tipos de abordagens de autoria são descriminados nas leis de direitos do autor, sancionadas pelo Congresso Nacional do Brasil...

Avaliação da pele de cobra brasileira (Crotalus durissus terrificus) como modelo substituto de membrana biológica para ensaios in vitro de permeação cutânea de drogas / Evaluación de la piel de serpiente brasileña (Crotalus durissus terrificus) como membrana de reemplazo para las pruebas biológica de penetración de drogas in vitro / Assessment of brazilian snake (Crotalus durissus terrificus) skin as replacement model for biological membrane used for in vitro studies of drug skin permeation

Introdução: O uso de animais em pesquisa científica vem sendo ponto de discussão na última década, baseado na teoria dos 3Rs - Reduction, Refinement and Replacement. Objetivo: Avaliar o uso da pele de cobra brasileira (Crotalus durissus terrificus) como membrana biológica para ensaios in vitro de permeação cutânea, usando nicotina em adesivos transdérmicos como medicamento modelo. Há muitas similaridades nas taxas de permeação entre o estrato córneo humano e a pele de cobra, a qual sugere o uso da pele de cobra como um modelo de barreira nos ensaios de permeação através do estrato córneo. A pele de cobra pode vir a ser um substituto em potencial para o uso de animais de laboratórios, reduzindo o número de animais utilizados nas pesquisas, a dor e desconforto dos animais durante os experimentos. É importante procurar alternativas para substituição dos animais tanto em ensaios laboratoriais in vitro como nos ensaios in vivo. Material e Método: Experimento de laboratório. Ensaio in vitro de permeação cutânea utilizando pele de cobra pré-hidratada em água durante 12, 24 e 48 horas...

Introduction: Based on the theory of the 3Rs - Reduction, Refinement and Replacement, the use of animals in scientific research has been focused in the past decade. Objective: To assess the use of Brazilian snake (Crotalus durissus terrificus) skin as a biological membrane for in vitro skin permeation studies using nicotine transdermal patches as a drug model. There are many similarities in the permeation rates between the snake skin and the human stratum corneum, which suggest the use of this tissue as a barrier model to test drug permeation through the stratum corneum. The use of snake skin may become a potential replacement for the use of laboratory animals, reducing this way the number of animals used in research, as well as the pain and discomfort of animals during the experiments. It is important to seek alternatives in order to replace these animals both in vitro and in vivo laboratory assays. Materials and Methods: Laboratory Experiment – During in vitro skin permeation studies using pre-treated with water hydration for 12, 24 and 48 hours snake skin, nicotine was used as a model drug, as well as a vertical diffusion cell as apparatus. The nicotine values permeated through snake skin were determined by High Performance Liquid Chromatography, being...

Introducción: El uso de animales en la investigación científica está siendo tema de debate en la última década, basado en la teoría de las 3Rs - Reducción, Refinamiento y Reemplazo. Objetivo: Evaluar el uso de la piel de serpiente brasileña (Crotalus durissus terrificus) como membrana biológica para las pruebas in vitro de la permeabilidad cutánea, el uso de la nicotina en parches transdérmicos como modelo de producto medicinal. Existen muchas similitudes entre los índices de permeabilidad en el estrato córneo y la serpiente humana, lo que sugiere el uso como modelo de barrera en las pruebas de la infiltración a través del estrato córneo. La serpiente puede ser un sustituto potencial para el uso de animales de laboratorio, reduciendo el número de animales utilizados en la investigación, el dolor y el sufrimiento de los animales durante los experimentos. Es importante buscar alternativas para animales de reemplazo tanto en pruebas de laboratorio ensayos in vivo e in vitro. Material y Método: Experimento de laboratorio - En ensayos de permeación in vitro utilizando piel de serpiente pre-tratados con hidratación en agua durante 12, 24 y 48 horas, la nicotina fue utilizado como um modelo de droga y célula de difusión vertical como lo aparato. Los valores de nicotina permeada por la piel de serpiente...

Effects of zinc phthalocyanine tetrasulfonate-based photodynamic therapy on rat brain isolated mitochondria.

PDT has been used in the treatment of malignant brain tumors for the last 2 decades. It is based on the interaction of a photosensitizer (PS) and light of an appropriate wavelength, with generation of oxygen species, mainly singlet oxygen. Brain is particularly susceptible to oxidative stress; therefore the study of PDT effects on cerebral mitochondria might provide mechanistic insights into the action of the therapy, contributing to its optimization. In the present study, we addressed the mitochondrial toxicity of the second generation PS, zinc phthalocyanine tetrasulfonate (ZnPcS4), on rat brain isolated mitochondria, by investigating both intrinsic toxicity and photodynamic action. At higher concentrations (15 and 25 microM/mg protein) ZnPcS4 caused (a) inhibition of state-3 respiration and (b) decrease of RCR and ADP/O. Electrochemical potential, state-4 respiration and Ca2+ retention capacity were not affected. Cytochrome c release was not observed. Coupled with 600 or 1800 mJ/cm2 laser irradiation, ZnPcS4 (5 microM/mg protein) caused more intense effects on state 3, RCR and ADP/O; moreover state-4 respiration and membrane potential were affected. Besides that, Ca2+ and cytochrome c release were induced. Cyclosporine A (CsA) decreased Ca2+ release and ameliorated the electrochemical potential, suggesting that membrane permeability transition (MPT) might be involved in the photodynamic effect. The low intrinsic toxicity and the high photodynamic effect on rat brain mitochondria induced by ZnPcS4, allied to its improved photophysical properties, might indicate its potential for the treatment of malignant brain tumors.