Angiotensina-(1-7) durante o processo inicial na cascata da ovulação em bovinos / Angiotensin-(1-7) during the initial process of ovulatory cascade in cattle

O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito da Ang-(1-7) e de seu receptor (MAS) na regulação da ovulação. No experimento I, utilizando um modelo in vitro de cultivo de células foliculares, foi avaliado o efeito do tratamento com Ang-(1-7) ou do bloqueio do receptor MAS através do inibidor d-Ala7-Ang-(1-7) (A-779) na expressão de RNAm para epirregulina (Ereg; um marcador inicial do processo de ovulação) em células da granulosa. No experimento II, foi utilizado um modelo in vivo de injeção intrafolicular no qual vinte vacas tiveram o ciclo estral sincronizado e, quando os folículos atingiram um diâmetro mínimo de 12mm, foi realizada a injeção intrafolicular de A-779 ou solução salina 0,9%. No momento da injeção intrafolicular, foi realizada uma aplicação IM de análogo de GnRH. A suplementação com Ang-(1-7) ou o bloqueio de seu receptor MAS em sistema de cultivo de células da granulosa não alteraram o padrão de expressão de RNAm para Ereg. A aplicação intrafolicular de A-779 (10-5M) não bloqueou a ovulação quando realizada antes do início do pico esperado de LH (100% das vacas ovularam nos grupos A-779 e controle), sugerindo que a Ang-(1-7) não possui papel relevante no início da cascata ovulatória em bovinos.

This study aimed to evaluate the effect of Ang-(1-7) and its receptor (MAS) in the regulation of the ovulatory cascade. In the experiment I, the effect of Ang-(1-7) or d-Ala7-Ang-(1-7) (A-779; Ang-(1-7) antagonist) on the epirregulin (Ereg; initial marker of ovulation process) mRNA expression in granulosa cells was assessed using an in vitro model of follicular cell culture. In experiment II, it was used an in vivo intrafollicular injection model, in which twenty cows had their follicular waves synchronized and the ovarian follicular size was daily monitored by ultrasound. Follicles that reached a minimum diameter of 12mm were injected with A-779 or saline 0.9%. At the time of the intrafollicular injection, cows were challenged with an intramuscular application of GnRH analogue. Ang-(1-7) or the blockade of its receptor MAS had no effect in Ereg mRNA expression in granulosa cells cultured in vitro. Likewise, the intrafollicular injection of MAS receptor inhibitor (10-5M of A-779) did not block ovulation before the expected time of LH peak (100% of the cows ovulated after GnRH challenge in the treatment and control groups), suggesting that Ang-(1-7) has no role in the early ovulatory cascade in cattle.

Controle sobre GnRH durante o anestro pós-parto em bovinos / GnRH control during bovine postpartum anestrous

O pós-parto em bovinos é caracterizado como um momento em que as fêmeas bovinas não ovulam, principalmente devido a uma inadequada liberação de gonadotrofinas. Os conceitos e os mecanismos regulatórios do hormônio liberador de gonadotrofinas (GnRH) têm sido descritos isoladamente. Esta revisão aborda a influência da nutrição e amamentação, com enfoque na regulação do GnRH, e fornece conceitos atuais do controle neuroendocrinológico da secreção de GnRH durante o pós-parto em bovinos. Conhecimentos atuais das funções do hormônio inibitório de gonadotrofinas (GnIH), da leptina, dos estrógenos, da kisspeptina e da adiponectina, bem como suas complexas inter-relações durante este período estão detalhados para melhor entendimento do assunto.

The bovine postpartum period is characterized as a moment when the ovulation is suppressed, mainly in consequence of insufficient release of gonadotropins. Concepts and regulatory mechanisms of gonadotropin-releasing hormone (GnRH) had been described independently. This review covers the influence of nutrition and suckling with emphasis on GnRH regulation, and provides up to date concepts of neuroendocrine control of GnRH secretion during postpartum in cattle. Current knowledge of gonadotropin-inhibitory hormone (GnIH), leptin, estrogens and kisspeptin during this period are presented in order to provide a better understanding of the subject.

Artificial insemination system without estrous observation in suckled beef cows / Sistema de inseminação artificial sem observação de estros em vacas de corte durante período de amamentação

The aim was to develop a timed artificial insemination (TAI) system in suckled beef cows. Cows (n=227), 60-80 days postpartum, received estradiol benzoate (5mg) and a vaginal device containing 250µg of medroxyprogesterone acetate (MPA; day 0). On day six, cloprostenol (125µg) and eCG (400IU) were administrated and calves were weaned for 88h. The devices were removed on day seven (BioRep group) or on day eight (TAI group). All cows of TAI group and cows of BioRep group that did not exhibit standing estrus received GnRH (100µg) on day 9. In experiment I, the follicular growth was monitored daily by transrectal ultrasound exams, from day 6 to day 9. The average size of the dominant follicle on day nine was 11.1±0.99mm (BioRep, n=7) and 11.5±0.65mm (TAI, n=7) and all animals ovulated. In experiment II, the BioRep group cows (n=106) were observed for estrous behavior after withdrawal of the device, twice a day for 48h, and inseminated 12h after detection. In the TAI group (n=107), the devices were withdrawn on day eight and after 24h these cows and those from the BioRep group, which were not stand in estrus, received 100µg of GnRH and TAI 16h later. The pregnancy rates were 57.6 percent (BioRep) and 52.3 percent (TAI). In conclusion, an increase on MPA exposure time did not affect the follicular dynamics and pregnancy rates and allow TAI without estrous observation. Furthermore, the treatment for eight days provides an efficient TAI system in suckled beef cows.

O objetivo deste estudo foi desenvolver um protocolo de inseminação artificial com tempo fixo (IATF) em vacas de corte durante período de amamentação, avaliando o intervalo entre a retirada do progestágeno e a aplicação de GnRH sobre a dinâmica folicular e a prenhez. Para tanto, vacas (n=227) em pós-parto de 60 a 80 dias receberam benzoato de estradiol (5mg) e um pessário vaginal de acetato de medroxiprogesterona (250mg MAP; dia 0). No dia seis, os animais receberam cloprostenol sódico (125µg), gonadotrofina coriônica eqüina (400UI) e desmame temporário (88h). O MAP foi retirado no dia sete (Grupo BioRep) ou no dia oito (Grupo IATF). Todas as vacas do grupo TAI e aquelas que não manifestaram cio do grupo BioRep receberam GnRH (100µg) no dia nove. No experimento I, o monitoramento das estruturas ovarianas de 14 vacas foi realizado a cada 24h, desde o dia seis até 36h após a aplicação de GnRH em ambos os grupos. O tamanho médio do folículo dominante no dia nove foi de 11,1±0,99mm (BioRep n=7) e 11,5±0,65mm (IATF n=7) e todos os animais ovularam. No experimento II, no grupo BioRep (n=106), após a retirada do MAP, as fêmeas foram inseminadas com detecção de estro durante 48 horas. O restante dos animais do grupo BioRep e todos do grupo IATF (n=107) receberam 100µg de GnRH (dia nove) e IATF 16h depois. As taxas de prenhez foram de 57,6 por cento (BioRep) e de 52,3 por cento (IATF). O intervalo de 24h entre a retirada de MAP, mantido por oito dias, e a aplicação de GnRH não interfere na dinâmica folicular e na prenhez, permitindo inseminar vacas de corte amamentando sem observação de estro.

Relationship between clinical and postmortem evaluation in repeat breeder beef cows / Relação entre características clínicas e post-mortem em vacas de corte repetidoras de serviço

The objective of this study was to investigate the causes of the repeat breeder syndrome comparing clinical signs and postmortem findings in beef cows. The identification of factors affecting the reproductive tract can support decisions as to whether treatment of repeat breeder cows is justifiable than culling. Since all animals were submitted to clinical examination before being slaughtered, this study has a differential approach when compared with others, where genital tracts from abattoir were examined. In this study, 130 crossbred cows and heifers that have failed to conceive after three or more services were identified, submitted to a clinical examination and blood collection for karyotyping and sent to an abattoir. postmortem examinations included macroscopic evaluation of the genital tracts, bacteriology and histopathology of the uterus. Uterine alterations were predominant followed by oviduct and ovarian pathologies. Histopathological examination was more sensitive as a diagnostic tool than clinical examination. Repeat breeder cows had a predominance of uterine abnormalities (95 percent), such as inflammatory (42.9 percent) and degenerative (59.7 percent) conditions. Oviduct abnormalities were found in 29.8 percent of animals. Furthermore, 1 out 10 karyotyped cows showed aneuploidy. Thus, this study stressed the importance of laboratory exams in the diagnosis of the causes of infertility of repeat breeder cows.

O objetivo deste estudo foi avaliar as causas de infertilidade em vacas de corte repetidoras de serviço, relacionando sinais clínicos com características laboratoriais post-mortem. A identificação dos fatores que afetam o desempenho reprodutivo pode fornecer uma fundamentação científica para auxiliar na decisão quanto ao destino de vacas repetidoras de serviço; tratamento ou descarte. Este estudo tem abordagem diferencial dos trabalhos que contemplam somente a ocorrência de alterações post-mortem do trato genital. A correlação das alterações post-mortem com o histórico clínico dos animais pode auxiliar na determinação da causa de repetição de serviço de animais sem alteração clínica. Foram utilizadas 130 vacas e novilhas cruzas que não conceberam depois de, no mínimo, três serviços. Todos os animais foram identificados e submetidos à exame clínico e coleta de sangue para cariotipagem. Foram incluídos no estudo apenas animais com histórico de falha reprodutiva. Os animais foram encaminhados para um abatedouro e foram realizados exames post-mortem como inspeção macroscópica do trato genital, cultura bacteriológica e estudo histopatológico do útero. Alterações uterinas foram predominantes seguidas de alterações de oviduto e ovário. Foi observada uma maior freqüência de alterações histopatológicas de útero que alterações clínicas. Os animais utilizados no estudo apresentaram alta freqüência de patologia uterina (95 por cento), tanto inflamatórias (42,9 por cento) quanto degenerativas (59,7 por cento). Patologias diagnosticadas somente por exames post-mortem e laboratoriais como oclusão tubária (29,8 por cento) e trissomia do par sexual também foram observadas (1/10 vacas). Portanto, este estudo evidencia a importância do exame laboratorial no diagnóstico das causas de infertilidade de vacas com histórico de repetição de serviço.

Sistemas de inseminação artificial em dois dias com observação de estro ou em tempo fixo para vacas de corte amamentando / Artificial insemination systems within two days of estrus detection or at fixed time for suckled beef cows

O objetivo do presente experimento foi investigar se a realização exclusiva da inseminação artificial em tempo fixo (IATF), empregando como indutor da ovulação o benzoato de estradiol (BE), proporciona taxas de prenhez semelhantes a uma associação de IA convencional e IATF com GnRH, em vacas de corte no pós-parto. Duzentos e cinqüenta vacas amamentado receberam um pessário vaginal contendo 250mg de acetato de medroxi-progesterona (MAP) e uma injeção intramuscular (IM) de 5mg de BE no dia 0. O pessário vaginal permaneceu por sete dias. No dia 6, foram aplicadas 400UI de gonadotrofina coriônica eqüina por via IM e 5mg de análogo de prostaglandina na submucosa vulvar, realizando nesse momento o desmame por 96h. Após a retirada dos pessários (dia 7), as vacas foram distribuídas em dois grupos. No grupo BioRep (n=150), as fêmeas foram observadas duas vezes por dia para detecção de estro por 48h e inseminadas 12h após sua manifestação. Os animais que não manifestaram estro nesse período receberam uma injeção IM de 100mg de GnRH, sendo submetidas à IATF, 16 a 18h após. No grupo BE (n=100), as vacas receberam uma injeção de 1mg de BE IM no dia 8 e foram inseminadas em tempo fixo no dia 9. A porcentagem de prenhez no grupo BioRep (54,7 por cento) foi maior (P<0,01) do que no grupo BE (33,3 por cento). Em vaca amamentando, a observação de estro por dois dias associada à IATF, utilizando GnRH para induzir a ovulação, proporcionou taxas de prenhez superiores ao uso exclusivo de IATF com BE.

This experiment was aimed at comparing two estrus induction protocols for cows in post partum period, using either GnRH and two-day artificial insemination (AI) or estradiol benzoate (EB) and fixed-time artificial insemination (TAI). A total of 250 suckled beef cows received a vaginal device containing 250mg of medroxyprogesterone acetate (MPA) and an injection of 5mg of EB intramuscularly (IM) on day 0. The vaginal device was removed on day 7. On day 6, cows were injected with 400IU eCG (IM) and 5mg prostaglandin analog (into vulvar submucosa) and calves were removed for 96 hours (h). After removing the vaginal devices (day 7), cows were divided in two groups. In the BioRep group (n=150), estrus detection was carried out twice a day during 48h and the animals were inseminated 12h after detection. Cows which were not detected in estrus received 100mg of GnRH IM and were inseminated 16 to 18h later. In EB group, cows were injected IM with 1mg of EB on day 8 and were inseminated on day 9 without estrus detection. The pregnancy rate was higher (P<0.01) in the BioRep group (54.7 percent) than in the EB group (33.3 percent). In suckled cows, two days of estrus detection associated to fixed-time insemination using GnRH to induce ovulation allowed the attainment of higher pregnancies rates than exclusively TAI using EB.

Annexin II mRNA expression in bovine oocytes during follicular development

We investigated the expression of calcium-dependent phospholipid binding protein annexin-II (Ann-II) messenger RNA (mRNA) during preantral follicle development and in oocytes from antral follicles of different diameters (< 3 mm, 5 to 8 mm and > 8 mm). The action of retinol on Ann-II mRNA expression in mature oocytes was also examined. Only oocytes from secondary preantral follicles expressed Ann-II mRNA and at the germinal vesicle stage expression by oocytes from follicles larger than 8 mm was significantly higher (p < 0.05) compared with oocytes from follicles smaller than 3 mm or between 5 and 8 mm. Ann-II mRNA expression by metaphase II oocytes from follicles larger than 8 mm was significantly higher (p < 0.05) than that from oocytes from follicles smaller than 3 mm, with oocytes from both these size-classes showing similar levels of Ann-II mRNA expression as oocytes recovered from 5-8 mm follicles. In the presence of retinol, Ann-II mRNA expression was higher than when retinol was absent (p < 0.05). Our data indicate that Ann-II mRNA expression is highest in competent oocytes and that retinol increases Ann-II mRNA and may be involved in the regulation of oocyte competence by decreasing the translation and/or degradation of Ann-II mRNA.

Caracterizaçäo de aspectos produtivos de vacas brangus ibagé com distintos graus de fertilidade / Caracterization of productive aspects in brangus ibagé cows with distinct levels of fertility

O presente estudo teve por objetivo caracterizar distintos grupos de fertilidade e averiguar diferenças quanto ao ganho de peso no pós-parto e habilidade materna em uma populaçäo Brangus Ibagé (3/8 Nelore + 5/8 Angus). Foram computados dados de 1145 partos de 287 vacas, sendo considerados apenas os registros de 168 fêmeas com, no mínimo, quatro partos. As fêmeas foram agrupadas de acordo com a média do intervalo de partos em grupos de alta, intermediária, e baixa fertilidade. Adicionalmente, foram levantados dados de peso ao parto (PPAR) e ganho de peso no pós-parto (GPP). A habilidade materna foi inferida a partir do peso à desmama dos terneiros (PP205). As médias e respectivos erros-padräo de intervalos de partos (IP) para os grupos de fertilidade alta, intermediária e baixa foram 404,6 ± 5,44, 523,5 ± 4,77 e 711,2 ± 20,89, respectivamente. Näo foram constatadas diferenças significativas (P>0,05) entre grupos, tanto no desempenho da vaca (PPAR, GPP) como no PP205. Vacas primíparas apresentaram peso ao parto menor (P<0,001), porém a diferença quanto ao ganho de peso no período pós-parto näo foi significativa (P>0,05). O efeito de ano foi significativo (P<0,001) sobre o PPAR, PP205 e GPP. O critério IP permite formar grupos de animais distintos quanto à fertilidade, que, no entanto, têm desempenho produtivo semelhante. Isso sugere que as diferenças de fertilidade entre eles podem ser decorrentes de outros mecanismos fisiológicos relativos ao restabelecimento precoce do anestro pós-parto e näo simples efeitos do nível nutricional e da sua produçäo de leite

Avaliação do hemograma, reticulócitos e mielograma na intoxicaçäo subaguda experimental por aflatoxina em cäes / Experimentally induced sub-acute aflatoxicosis in dogs: evaluation of hemogram, reticulocyte and myelogram

As aflatoxinas estäo entre os produtos metabólicos de natureza tóxica e säo produzidos por fungos do gênero Aspergillus. O presente trabalho tem como objetivo, verificar as possíveis alteraçöes da aflatoxicose através da avaliaçäo do hemograma, contagem de reticulócitos e mielograma em cäes. Foram utilizados vinte cäes (9 fêmeas e 11 machos), os quais foram divididos em dois grupos de dez animais. O grupo I recebeu 14g de aflatoxina/kg/dia e o grupo II 21g de aflatoxina/kg/dia, via oral, durante vinte dias. Após foram realizadas colheitas de sangue e medula óssea, a cada sete dias, durante seis semanas. Ambos os grupos apresentaram sinais clínicos de intoxicaçäo por aflatoxina, o hemograma e a contagem de reticulócitos näo demonstraram variaçöes significativas. No mielograma, observou-se acentuada diminuiçäo da série eritróide e do número de megacariócitos, aumento significativo da série mielóide e proporçäo mielóide: eritróide (M:E).