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J Cell Biochem ; 97(4): 813-23, 2006 Mar 01.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-16237705

RESUMO

To investigate on the hypothetical presence of an antiapoptotic gene, we utilized the CODEHOP (COnsensus-DEgenerate Hybrid Oligonucleotide Primers) strategy amplifying unknown sequences from a background of genomic (bovine herpesvirus type-1) BHV-1 DNA. An alignment of carboxyl-terminal domains belonging to three proteins encoded by gamma34.5, MyD116 and GADD34 genes, was carried out to design degenerate PCR primers in highly conserved regions. This allowed the amplification of a 110 bp fragment. This fragment was subjected to automatic sequencing and DNA sequence analysis revealed that its position resided between the nt 14363 and the nt 14438 in bovine herpesvirus type-1 (BHV-1) Cooper strain sharing an identity of 86% (UL14). Transient transfections showed that UL14 protein is efficient in protecting MDBK and K562 cells from sorbitol induced apoptosis. The protein's anti-apoptotic function may derive from its heat shock protein-like properties.


Assuntos
Apoptose/genética , Herpesvirus Bovino 1/genética , Reação em Cadeia da Polimerase/métodos , Proteínas Virais/genética , Motivos de Aminoácidos , Animais , Sequência de Bases , Linhagem Celular , Sequência Consenso , Primers do DNA/química , Bases de Dados como Assunto , Proteínas de Choque Térmico HSP72/genética , Humanos , Células K562 , Dados de Sequência Molecular , Homologia de Sequência de Aminoácidos , Software , Proteínas Virais/fisiologia
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