RESUMO
Lytic infection by the Epstein-Barr virus (EBV) poses numerous health risks, such as infectious mononucleosis and lymphoproliferative disorder. Proteins in the bromodomain and extraterminal (BET) family regulate multiple stages of viral life cycles and provide promising intervention targets. Synthetic small molecules can bind to the bromodomains and disrupt function by preventing recognition of acetylated lysine substrates. We demonstrate that JQ1 and other BET inhibitors block two different steps in the sequential cascade of the EBV lytic cycle. BET inhibitors prevent expression of the viral immediate-early protein BZLF1. JQ1 alters transcription of genes controlled by the host protein BACH1, and BACH1 knockdown reduces BZLF1 expression. BET proteins also localize to the lytic origin of replication (OriLyt) genetic elements, and BET inhibitors prevent viral late gene expression. There JQ1 reduces BRD4 recruitment during reactivation to preclude replication initiation. This represents a rarely observed dual mode of action for drugs.
Assuntos
Antivirais/farmacologia , Fatores de Transcrição de Zíper de Leucina Básica/antagonistas & inibidores , Proteínas de Grupos de Complementação da Anemia de Fanconi/antagonistas & inibidores , Regulação Viral da Expressão Gênica/efeitos dos fármacos , Herpesvirus Humano 4/efeitos dos fármacos , Proteínas Nucleares/antagonistas & inibidores , Transativadores/antagonistas & inibidores , Fatores de Transcrição/antagonistas & inibidores , Proteínas Virais/antagonistas & inibidores , Acetilação , Azepinas/farmacologia , Fatores de Transcrição de Zíper de Leucina Básica/química , Fatores de Transcrição de Zíper de Leucina Básica/genética , Fatores de Transcrição de Zíper de Leucina Básica/metabolismo , Proteínas de Ciclo Celular , Linhagem Celular , Proteínas de Grupos de Complementação da Anemia de Fanconi/química , Proteínas de Grupos de Complementação da Anemia de Fanconi/genética , Proteínas de Grupos de Complementação da Anemia de Fanconi/metabolismo , Herpesvirus Humano 4/fisiologia , Interações Hospedeiro-Patógeno/efeitos dos fármacos , Humanos , Lisina/metabolismo , Proteínas Nucleares/química , Proteínas Nucleares/genética , Proteínas Nucleares/metabolismo , Domínios e Motivos de Interação entre Proteínas , Processamento de Proteína Pós-Traducional , Transporte Proteico/efeitos dos fármacos , Interferência de RNA , Origem de Replicação/efeitos dos fármacos , Transativadores/química , Transativadores/genética , Transativadores/metabolismo , Fatores de Transcrição/química , Fatores de Transcrição/genética , Fatores de Transcrição/metabolismo , Triazóis/farmacologia , Proteínas Virais/química , Proteínas Virais/genética , Proteínas Virais/metabolismo , Ativação Viral/efeitos dos fármacos , Fenômenos Fisiológicos Virais/efeitos dos fármacosRESUMO
The human Epstein-Barr virus (EBV) evades the immune system by entering a transcriptionally latent phase in B cells. EBV in tumor cells expresses distinct patterns of genes referred to as latency types. Viruses in tumor cells also display varying levels of lytic transcription resulting from spontaneous reactivation out of latency. We measured this dynamic range of lytic transcription with RNA deep sequencing and observed no correlation with EBV latency types among genetically different viruses, but type I cell lines reveal more spontaneous reactivation than isogenic type III cultures. We further determined that latency type and spontaneous reactivation levels predict the relative amount of induced reactivation generated by cytotoxic chemotherapy drugs. Our work has potential implications for personalizing medicine against EBV-transformed malignancies. Identifying latency type or measuring spontaneous reactivation may provide predictive power in treatment contexts where viral production should be either avoided or coerced.