RESUMO
ABSTRACT Several molecules and events involved in cell response to radiation-induced damage have been investigated towards a personalized radiotherapy. Considering the importance of active caspase-3 in the proteolytic cascade that ensures radiation-induced apoptosis execution, this research was designed to evaluate the expression levels of this protein as a bioindicator of individual radiosensitivity. Peripheral blood samples of 10 healthy individuals were gamma-irradiated (cobalt-60 source) with 1, 2 and 4 Gy (control: non-irradiated samples), and active caspase-3 expression levels were measured in lymphocytes, by flow cytometry, ex vivo and after different times of in vitro incubation (24, 48 and 72 hours). Short-term incubation of 24 h was the most adequate condition to evidence correlations between dose radiation and active caspase-3 expression. For each radiation dose, it was observed a significant inter-individual variation in active caspase-3 expression intensity, suggesting that this parameter may be suitable for evidence individual radiosensitivity. The methodology presented and discussed in this work may help to predict healthy tissues response to radiation exposure toward the better patient outcome.
Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Adulto , Tolerância a Radiação/efeitos da radiação , Linfócitos/efeitos da radiação , Radioisótopos de Cobalto , Apoptose/efeitos da radiação , Caspase 3/metabolismo , Linfócitos/enzimologia , Biomarcadores Ambientais , Relação Dose-Resposta à Radiação , Citometria de FluxoRESUMO
El presente estudio fue llevado a cabo para evaluar prospectivamente la correlación entre la actividad de la adenosindesaminasa, (ADA) y la proporción de linfocitos en líquido pleural en una región de alta prevalancia de tuberculosis. Durante el periodo de 1991 a 1996 se estudiaron 222 pacientes que ingresaron al Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias con diagnóstico de derrame pleural tuberculoso (TB) y secundario a cáncer (Ca). Hubo 133 TB y 89 Ca, (146 hombres y 76 mujeres). Todos los pacientes fueron diagnosticados con los métodos convencionales. La edad promedio de los pacientes con TB fue 42 ñ 17 y los Ca 61 ñ 13, (-x ñ D.E.). El nivel medio de la actividad de la ADA en el grupo TB (101.6 ñ 41.3 U/L) fue significativamente más alto (p< 0.0001) que en Ca (24.3 ñ 19.1). El porcentaje de linfocitos en el líquido pleural de los pacientes con TB fue 75.5 ñ 16.6 contra 66.8 ñ 17.1 de los Ca (p < 0.0001). La relación entre los niveles de ADA y el porcentaje de linfocitos en líquido pleural de los dos grupos estudiados produjo una significativa curva de regresión (r = 0.750, p< 0.0001), la cual mostró una correlación positiva entre estos dos parámetros. Estos resultados nos sugieren: 1) que la ADA puede ser un buen marcador de inmunidad mediada por células y 2) que existe una buena correlación entre los niveles de ADA y la proporción de linfocitos en líquido pleural tuberculoso
Assuntos
Humanos , Adolescente , Adulto , Linfócitos/enzimologia , Derrame Pleural/diagnóstico , Tuberculose Pleural/diagnósticoRESUMO
The cells of blood vessel walls and the external surface of all blood cells have an ecto-ATPase which hydrolyzes ATP to ADP and also ADP to AMP. This enzyme has also been called apyrase or ATP-diphosphohydrolase. The enzyme hydrolyzes a broad range of tri-and diphosphate nucleosides such as UTP and UDP, GTP and GDP in additon to the adenine nucleotides and because of that it has also been called a nucleoside triphosphate hydrolase. The possible physiological roles for this ecto-ATPase involve the control of vascular tone by modulation of the levels of ATP and ADP binding to purino-receptors of the vasculature, the modulation of thrombogenesis by controlling the extracellular level of ADP which is known to activate platelet aggregation, and the protection from cytolytic effects of extracellular ATP. An ATP-diphosphohydrolase activity has been characterized on the external surface of Schistosoma mansoni, a parasite that lives in the circulation of the human host, and on the outer surface of Entamoeba histolytica, a parasite that may enter the circulation of the host through ulceration in the intestinal mucosa. The endoparasite Toxoplasma gondii also exhibits a nucleoside triphosphate hydrolase of high activity, although in this case the ecto-localization is still not documented. We raise the possibility that the endoparasites have evolved in a way to possibly mimic some of the conditions on the surface of cells normally present in the host circulation, thus escaping hemostatic defense responses of the host which require extracellular ADP or ATP.
Assuntos
Animais , Apirase , Células Sanguíneas/enzimologia , Entamoeba histolytica/enzimologia , Schistosoma mansoni/enzimologia , Toxoplasma/enzimologia , Vasos Sanguíneos/enzimologia , Trifosfato de Adenosina , Plaquetas/enzimologia , Eritrócitos/enzimologia , Granulócitos/enzimologia , Hidrolases , Linfócitos/enzimologia , Macrófagos/enzimologia , Nucleotidases/metabolismo , Plasma/enzimologiaRESUMO
La demencia tipo Alzheimer (DTA) es una de las más frecuentes entre los adultos mayores de 65 años de edad. En el sistema nervioso central de los pacientes con enfermedad de Alzheimer se observa tempranamente una marcada alteración del sistema colinérgico, lo que se correlaciona con una disminución de la actividad enzimática de la acetilcolinesterasa (AChE) y un aumento de la butirilcolinesterasa (BuChE). Es probable que alguno de estos cambios bioquímicos pueda tener su reflejo también a nivel periférico, considerando que tanto la AChE como la BuChE se expresan en células no-neuronales, incluyendo a células sanguíneas. En el presente trabajo se evaluaron las actividades de la AchE y de la BuChE en linfocitos y plaquetas tanto en individuos normales como en pacientes con DTA, encontrándose que la actividad de la AChE está disminuida (60 por ciento ) en linfocitos obtenidos de pacientes con DTA, sin observarse cambios aparentes en la actividad de la BuChE. En plaquetas no se observaron diferencias en las actividades de la AChE y de la BuChE entre individuos con DTA y controles. Se evaluó también la captación de 14 C-serotonina por las plaquetas. No se observaron diferencias en la velocidad máxima de captación de 14 C-serotonina; sin embargo, la Km para la captación fue menor para los pacientes con DTA que para los controles. Finalmente el recuento de plaquetas y leucocitos evidenció un aumento en el número total de células en los pacientes con DTA
Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Pessoa de Meia-Idade , Acetilcolinesterase/metabolismo , Doença de Alzheimer/fisiopatologia , Butirilcolinesterase/metabolismo , Plaquetas/enzimologia , Contagem de Leucócitos , Linfócitos/enzimologia , Contagem de Plaquetas , SerotoninaRESUMO
Se realizó un estudio citoquímico de la reacción del PAS, beta-glucuronidasa y fosfatasa ácida en linfocitos y neutrófilos de personas con enfermedad de Chagas. Se compararon los valores de estas reacciones con extendidos sanguíneos de personas sanas. En los puntajes y porcentajes encontrados en enfermos de Chagas se notó un incremento significativo en la positividad en los linfocitos con la reacción del PAS y de la beta-glucuronidasa y en los neutrófilos un incremento significativo con la reacción de la beta-glucuronidasa