Investigation in vivo of Enterococcus faecalis in endodontic retreatment by phenotypic and genotypic methods / Investigação in vivo de Enterococcus faecalis em retratamento endodôntico por meio de métodos fenotípicos e genotípicos

ABSTRACT

This study aimed to investigate the prevalence of E. faecalis in root-filled canals using culture and molecular approaches. It was evaluated the antimicrobial susceptibility to different antibiotics and the virulence factors of E. faecalis isolates. Microbial samples were taken from thirty root-filled canals. Culture methods and 16S rDNA assay were used to identify E. faecalis. The antimicrobial susceptibility of E. faecalis was determined by MIC values using the E test. Cultivable strains of E. faecalis were investigated for virulence factors by PCR technique. E. faecalis were detected by culture (7/30), traditional PCR assay (13/30) and nested PCR (23/30). Both PCR were significantly more effective than culture in detecting E. faecalis (p < 0.05). All tested E. faecalis were highly sensitive to amoxicillin. Some strains of E. faecalis were resistant to antibiotics such as rifampicin (4/12), erythromycin (3/12) and azythromycin (8/12). The genes efaA and ace were detected in all isolates. The other virulence genes were found in 91.6 (gelE), 83.3 (asa), 25 (esp) and 16.6% (cylA). Strains of E. faecalis isolated from root-filled canals showed virulence factors related to adherence. They also showed resistance to some antibiotics commonly used in dentistry.

RESUMO

O objetivo deste estudo foi investigar a prevalência de E. faecalis em dentes tratados endodonticamente utilizando as técnicas de cultura e molecular. Foram avaliados a suscetibilidade antimicrobiana frente a diferentes antibióticos e os fatores de virulência de E. faecalis isolados. As amostras foram coletadas de 30 dentes tratados endodonticamente. Métodos de cultura e 16S rDNA foram utilizados para identificar E. faecalis. A suscetibilidade antimicrobiana de E. faecalis foi determinada por valores de MIC, utilizando o E test. Os fatores de virulência de cepas de E. faecalis cultiváveis foram investigados pela técnica de PCR. E. faecalis foram detectados por cultura (7/30), PCR tradicional (13/30) e nested PCR (23/30). Ambas as técnicas de PCR foram significativamente mais eficazes do que a cultura na detecção de E. faecalis (p < 0,05). Todos os E. faecalis testados foram altamente sensíveis à amoxicilina. Algumas cepas de E. faecalis foram resistentes a antibióticos, como a rifampicina (4/12), eritromicina (3/12) e azitromicina (8/12). Os fatores de virulência efaA e ace foram detectados em todos os isolados. Os outros genes de virulência foram encontrados em 91,6 (gelE), 83,3 (asa), 25 (esp) e 16,6% (cylA). As cepas de E. faecalis isoladas em dentes tratados endodonticamente mostraram fatores de virulência relacionados à adesão. Eles também apresentaram resistência a alguns antibióticos comumente utilizados na odontologia.