Avaliação do potencial de invasão de células epiteliais malignas (carcinoma epidermoide) influenciadas por células mioepiteliais benignas / Evaluation of the potential invasion of malignant epithelial cells (epidermoid carcinoma) influenced by Benign myoepithelial cells

RESUMO

A invasão tumoral é um complexo processo biológico influenciado não só pelas células tumorais como também pelas células do microambiente. Dentre elas, as células mioepiteliais parecem modular negativamente o crescimento e a invasão tumoral por promover a regulação da progressão do ciclo celular além de secretar altos níveis de moléculas supressoras de tumor, como inibidores de proteinases e inibidores angiogênicos. O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência das células mioepiteliais (CM) neoplásicas benignas do adenoma pleomórfico de glândula salivar no potencial de invasão das células epiteliais malignas do adenocarcinoma ductal (AD) por meio de ensaios de invasão in vitro utilizando a técnica de cultivo celular. Para isso, células do AD (HS578T, ATCC) foram cultivadas no compartimento superior de câmaras transwell sobre insertos com membranas (poros de 8µm) cobertas por Matrigel. No grupo controle, foi utilizado meio DMEM e nos grupos experimentais, meios condicionados de 3 culturas primárias de CM (AP3, AP4 e AP8). Após 48 horas, foi realizada a análise quantitativa do índice de invasão das células malignas e do número absoluto de células que invadiram. Os resultados evidenciaram que as células do AD apresentaram índice de invasão de 42,02% e, quando suplementadas com meio condicionado de CM, este foi de 25,77% (AP4), 26,77% (AP8) e 34,63% (AP3), com diferença estatisticamente significante (p<0,05) entre todos os grupos e o grupo controle, além de uma redução no número de células que invadiram de 523,66 no grupo controle para 233,5 (AP4), 183,5 (AP8) e 34,63 (AP3), porém esta redução não mostrou diferença estatística (p>0,05) entre todos os grupos. Concluiu-se que o meio condicionado de CM pode apresentar um papel supressor no processo de invasão in vitro das células do AD

ABSTRACT

Tumoral invasion is a complex biologic process influenced not only by tumoral cells but by cells in the microenvironment as well. Among these, the myoepithelial cells appear to negatively modulate tumor growth and invasion by promoting regulation of cell cycle progression, in addition to secreting high levels of tumor suppressor molecules, such as protease inhibitors and angiogenesis inhibitors. The aim of this study was to evaluate the influence of benign myoepithelial cells of pleomorphic adenoma of the salivary gland (MC) on the invasion potential of malignant epithelial cells of ductal adenocarcinoma (DA) by means of an in vitro invasion assay method using the cell culture technique. For this purpose, cells from the DA (HS578T, ATCC) were grown in DMEM medium in the top compartment of the Transwell chamber on inserts with filters (8µm pore size) covered with Matrigel. Conditioned medium of 3 strains of primary cultures of MC was added. After 48 hours, a quantitative analysis of the invasion rate of malignant cells and absolute number of cells that invaded was performed. The results showed that the DA cells presented an invasion rate of 42.02% and when supplemented with conditioned medium of the MC the rates were 25.77% (AP4), 26.77% (AP8) and 34.63% (AP3) and this difference being statistically significant (p<0,05) in all groups, beyond a reduction in the absolute number cells that invaded, from 523.63 in the control group to 233.4 (AP4), 183.5 (AP8) and 316.83 (AP3), however this reduction being not statistically significant (p>0,05) in all groups. It was concluded that conditioned medium of the MC could play a suppressive role in the invasion process in vitro of DA cells