Caracterização da distribuição da isoforma GFAP delta no tecido nervoso: comparação da sua imunoexpressão com a da GFAP e vimentina na glicose e em gliomas

RESUMO

Cinco diferentes isoformas da proteína GFAP já foram identificadas, sendo GFAPa. a isoforma majoritária contra a qual anticorpos de rotina são dirigidos, enquanto que os transcritos da isoforma minoritária GFAPô são vinte vezes menos expressos do que os da GFAPa.. Num estudo recente baseado em material de autópsia, resultados de imunomarcação sugeriram que, no cérebro adulto normal, a GFAPô é especificamente expressa por uma subpopulação astrocitária em áreas subpial e subependimária, e que não estaria envolvida na gliose reativa. Entretanto, estes astrócitos GFAPô positivos são aqueles que normalmente apresentam uma super-expressão de GFAP, sendo marcados também pela vimentina. Resultados negativos não necessariamente indicam ausência dessa isoforma. No presente trabalho, a imunoexpressão da GFAPô foi estudada em espécimes cirúrgicos representativos de diversas formas de gliose e diferentes gliomas do adulto, fixados em condições ótimas com formol-zinco, e comparada com a da GFAP e vimentina. Em todos os processos de gliose testados, assim como no controle de cérebro normal, a imunomarcação de GFAPô foi semelhante à de vimentina, sugerindo que, nestas condições, a imunomarcação de GFAPô depende do nível de GFAP expressa, havendo um limiar abaixo do qual a GFAPô não é detectável. A imunomarcação de GFAPô permitiu observar que a gliose subpial de Chaslin é formada por uma multiplicação dos processos celulares da glia Iimitante, também sugerindo que tanto em condições normais quanto reacionais o estado funcional destes astrócitos e daqueles da camada molecular é altamente variável no espaço e possivelmente no tempo. Nossos dados mostraram que em todos os gliomas testados, a imunorreatividade da GFAPô foi semelhante à da GFAP, porém com um padrão mais variável e menor intensidade de marcação, indicando que este marcador não mostraria maior interesse do que o da GFAP para a subclassificação destes tumores.

ABSTRACT

Of the 5 isoforms of GFAP proteins already identified, GFAPa represents the major isoform against which current antibodies are directed, whereas GFAPo is a minor isoform, its transcripts being twenty-fold less expressed than that of GFAPa. In a recent study based on autopsy material, immunostaining suggested that, in normal adult human brain, GFAPo is specifically expressed by a subpopulation of astrocytes in subpial and subependymal areas, but is not involved in reactive gliosis. However, these GFAPo positive astrocytes are those which normally overexpress GFAP and stain positively for vimentin. In addition, negative immunostaining does not prove its absence. In the present study, GFAP&-immunostaining was assessed in surgical samples representative of several types of gliosis and different gliomas of the adult, optimally fixed with formalin-zinc, and compared with that for GFAP and vimentin. In all processes of gliosis tested, as in normal brain control, the GFAP&immunostaining paralleled that for vimentin, suggesting that, in both conditions, GFAPo-immunoreactivity depends on the level of GFAP expressed, with a threshold under which GFAPo is not detectable. Nonetheless GFAP&-immunostaining allowed to observe that Chaslin's subpial gliosis is formed by a multiplication of the cell processes of astrocytes of the glia limitans, also suggesting that in both normal and reactive conditions, the functional state of these astrocytes and those of the molecular layer is highly variable in space and likely in time. In all gliomas tested GFAPo-immunostaining was similar to that for GFAP, although showing weaker intensity and a more variable pattern. Our observations suggest that this marker has no potential interest over that of GFAP in the subclassification of these tumors.