Estudo da expressäo das proteínas reguladoras do ciclo celular, através da citometria de fluxo multiparamétrica, em leucemia mielóide aguda / Study of cell cycle regulating proteins by multiparametric flow cytometry in acute myeloid leukemia

RESUMO

As neoplasias sao decorrentes da perda da regulaçao do processo d proliferaçao, diferenciaçao e apoptose celular. A proteína P21 é uma importante reguladora da transiçao G1/S do ciclo celular e o aumento da sua síntese pode SE ativado por via P53 dependente ou nao. Ela se liga às ciclinas D e E, inibindo a cinases dependentes de ciclina (cdk 2 e cdk 4) necessárias para a progressao d ciclo celular. A proteína MDM2 é reguladora da P53 inativando-a, após formaçao d um complexo. Objetivo: estudar o comportamento das proteínas supressoras d tumor (P53, P21), proteínas oncogênicas (MDM2, ciclina D e ciclina E) e o recepto de induçao a apoptose (CD95) em LMA, pela citometria de fluxo multiparamétrica Métodos: vinte e quatro pacientes com LMA ("de novo", secundária e em recaída) foram avaliados quanto a expressao das proteínas reguladoras do ciclo celular na células leucêmicas da medula óssea utilizando-se os seguintes anticorpos monoclonais PAb421, 240 e 1620, anti-P21, MDM2, ciclinas D e E e CD95, a diagnóstico e 24 horas após quimioterapia, procedendo a leitura no citômetro de fluxo. Resultados: A expressao das proteínas foi extremamente variável (0-98 por cento mas elas apresentaram correlaçao direta entre si, com exceçao do CD95. Com quimioterapia houve uma tendência ao aumento de todas as proteínas e a variaçao da P21 se correlacionou diretamente com a variaçao da P53 (240 p=0,001, 421 p 0,001 e 1620 p<0,0001), MDM2 (p<0,0001) e das ciclinas D (p<0,0001) e (p=0,005). Os pacientes que nao alcançaram remissao completa expressavas níveis maiores de P53 (240 p=0,02, 421 p=0.04 e 1620 p=0,01), P21 (p=0,02 MDM2 (p=0,004), ciclina D (p=0,03) e ciclina E (p=0,009) ao diagnóstico em relaçao ao grupo que entrou em remissao completa. Os pacientes que remitiras conseguiram aumentar significantemente os níveis da P21 depois da quimioterapia (P = 0.04). O aumento da P53 depois do tratamento se correlacionou também com aumento da expressao da MDM2 (240 p<0,001, 421 p<0,0001 e 1620 p<0,0001 Conclusao: O aumento da expressao da proteína P21 mostrou ser importante par predizer a resposta hematológica ao tratamento, e seu nível se correlacionou com aumento da expressao da P53 a qual se correlacionou também com o aumento d MDM2 Drogas que inibam esse aumento do MDM2 podem aumentar a resposta hematológica. Estudos com maior número de pacientes sao necessários