Aplicaçäo da técnica de imunofluorescência direta para o diagnóstico da leishmaniose visceral canina em aspirado de linfonodo / Application of direct immunofluorescence technic for the diagnosis of canine visceral leishmaniasis in lymph nodes aspirate

RESUMO

Recentemente, foco de leishmaniose visceral canina (CVL) foi descrito na regiäo noroeste do Estado de São Paulo - Brasil. O Hospital Veterinário - UNESP - Araçatuba, no ano de 2.000, desenvolveu 60 testes citopatológicos de casos suspeitos de leishmaniose usando aspirado por agulha fina (FNA). Os esfregaços de linfonodo foram corados pelo método de Romanowsky (Diff-Quik®) e observados em microscopia de luz. Os casos positivos mostraram formas amastigotas típicas de Leishmania livres ou em vacúolos de macrófagos. Sinais citopatológicos de reatividade do sistema linfo-histiocitário com ausência de parasitos foram também observados. Com o objetivo de implementar o diagnóstico da CVL, detectando parasitos e material antigênico nos esfregaços, aplicou-se a reaçäo de imunofluorescência direta (IFD) usando anticorpo policlonal anti-Leishmania produzido em camundongo. Comparamos o método de IFD com a pesquisa direta do parasito em esfregaços corados pelo método de Romanowsky. Dos 60 cäes com sinais clínicos da doença, o exame direto foi positivo em 50 por cento (n=30), duvidoso em 36,7 por cento (n=22) e negativo com reatividade do linfonodo em 13,3 por cento (n=8). Quando os linfonodos foram submetidos a reaçäo de IFD observamos reaçäo positiva em 93,3 por cento (n=56) e reaçäo negativa em 6,7 por cento (n=4). Nossos resultados mostraram que a reaçäo de IFD apresentou alta sensibilidade quando comparada a pesquisa direta do parasito pela coloraçäo de Romanowsky. A reaçäo de IFD pode ser um método útil para confirmar os casos duvidosos da doença, onde as formas amastigotas näo säo identificadas com facilidade