Ação hemodinâmica e metabolismo da bradicinina no fígado / Hemodynamic action and metabolism of bradykinin on the liver

RESUMO

Bradicinina (R1P2P3G4S6P7F8R9) infundida na veia porta provoca resposta hipertensiva via receptor B2 e, por outro lado, é eficientemente hidrolisada pelo fígado. A EC 3.4.24.15 é a principal enzima inativadora de BK in vitro e é liberada de fígados normais preservados ex vivo em líquido Braun Collins. Nossos objetivos foram 1) estudar a liberação da EC 3.4.24.15 no reperfusato de fígados (normais e em fase aguda de inflamação) preservados ex vivo; 2) localizar a EC 3.4.24.15 no fígado; 3) caracterizar a interação entre bradicinina (BK) e fígado eluciando o local da ação do peptídeo e o papel das cininases ECA (enzima conversora de angiotensina) e EC 3.4.24.15 na sua inativação. Para tanto, fígados normais e inflamados foram preservados em líquido University of Wisconsin e reperfundidos após 8 ou 24 h. Alíquotas do reperfusato foram recolhidas para dosagens enzimáticas. BK, antagonista do receptor B2 (HOE-140), agonista do receptor B1 (des-R9-BK) e inibidores enzimáticos foram utilizados em perfusões monovascular (entrada pela veia porta) e bivascular (entrada pela veia porta e artéria hepática) de fígado e em ensaios com células hepáticas isoladas. Verificamos que a liberação da EC 3.4.24.15 no reperfusato de figados inflamados foi superior aos normais. Des-R9-BK não produz resposta hipertensiva portal (RHP); BK infundida na artéria hepática provocou RHP (cálcio-dependente) e resposta hipertensiva arterial (RHA) (cálcio-independente), esta quase abolida por naproxeno. Os produtos de hidrólise da BK infundida são R1-F5 e R1-P7; estes fragmentos não foram capazes de produzir RHP. ECA e EC 3.4.24.15 estão presentes no fígado e concentram-se na região perivenular (imuno-histoquímica); BK tem distribuição predominante no espaço extracelular e média de extração hepática de 8 por cento em condições estacionárias (diluição de indicadores); o receptor B2 concentra-se na região periportal em células sinusoidais (imuno-histoquímica), resultado confirmado com Cytosensor microphysiometer onde BK (mas não des-R9-BK) elicia mudanças na taxa de acidificação basal de células estreladas e da fração contendo células sinusoidais endoteliais/Kupffer, este efeito é inibido por HOE-140. Concluímos que a EC3.4.24.15 é indicador sensível do estado inflamatório de fígados preservados mas não indica disfunção do órgão; a seqüência de eventos é ação hipertensiva da BK em células sinusoidais da região periportal e sua hidrólise pela ECA e não pela EC 3.4.24.15...