Fator de crescimento derivado de plaquetas humanas obtido por uma metodologia rápida e de baixo custo / Human platelet-derived growth factor obtained by means of a fast and inexpensive methodology

RESUMO

O fator de crescimento derivado de plaquetas (PDGF) é uma proteína catiônica armazenado principalmente nos grânulos-alfa plaquetário. O PDGF por ser altamente mitogênico, principalmente para fibroblastos e leiomiócitos, é de grande importância no processo de regeneração tecidual. Neste trabalho, o PDGF foi obtido a partir do lisado de plaquetas humanas (5 x 10 plaquetas/mL) vencidas, purificado por cromatografia de troca iônica em resina de CM-Sepharose. A proteína eluída na fração catiônica, foi identificada por anticorpos policlonais anti-PDGF (AA e BB) e, posteriormente, sua atividade mitogênica confirmada pela incorporação da [H3]-TdR usando fibroblastos da linhagem celular NIH/3T3 em cultura. A comparação entre os efeitos mitogênicos sobre o PDGF, fração catiônica, com uma proteína recombinante controle (PDGF-AB), revelou que a proteína parcialmente purificada induziu semelhante estimulação, 157.567 cpm e 165.796 cpm, respectivamente. Os resultados obtidos evidenciam a aplicabilidade dessas condições experimentais na obtenção do PDGF, preservando sua atividade biológica, através de procedimentos de baixa complexibilidade, eficiente e de custo operacional reduzido, possibilitando seu uso em experimentos de regeneração tecidual