Functional capacity of natural killer cells in HTLV-1 associated myelopathy/tropical spastic paraparesis (HAM/TSP) patients.

BACKGROUND: Natural killer (NK) cells are part of the innate immune system and provide surveillance against viruses and cancers. The ability of NK cells to kill virus-infected cells depends on the balance between the effects of inhibitory and activating NK cell receptors. This study aimed to investigate the phenotypic profile and the functional capacity of NK cells in the context of HTLV-1 infection. METHODS: This cross-sectional study sequentially recruited HTLV-1 infected individuals with HTLV-1 associated myelopathy/tropical spastic paraparesis (HAM/TSP) and asymptomatic HTLV-1 (AS) from the Integrated and Multidisciplinary HTLV Center in Salvador, Brazil. Blood samples from healthy blood donors served as controls. NK cell surface receptors (NKG2D, KIR2DL2/KIR2DL3, NKp30, NKG2A, NKp46, TIM-3 and PD-1), intracellular cytolytic (Granzyme B, perforin) and functional markers (CD107a for degranulation, IFN-γ) were assayed by flow cytometry in the presence or absence of standard K562 target cells. In addition, cytotoxicity assays were performed in the presence or absence of anti-NKp30. RESULTS: The frequency of NKp30+ NK cells was significantly decreased in HAM/TSP patients [58%, Interquartile Range (IQR) 30-61] compared to controls (73%, IQR 54-79, p = 0.04). The production of cytolytic (perforin, granzyme B) and functional markers (CD107a and IFN-γ) was higher in unstimulated NK cells from HAM/TSP and AS patients compared to controls. By contrast, stimulation with K562 target cells did not alter the frequency of CD107a+ NK cells in HAM/TSP subjects compared to the other groups. Blockage of the NKp30 receptor was shown to decrease cytotoxic activity (CD107a) and IFN-γ expression only in asymptomatic HTLV-1-infected individuals. CONCLUSIONS: NK cells from individuals with a diagnosis of HAM/TSP present decreased expression of the activating receptor NKp30, in addition to elevated degranulation activity that remained unaffected after blocking the NKp30 receptor.

Mycobacterium tuberculosis epitope-specific interferon-g production in healthy Brazilians reactive and non-reactive to tuberculin skin test.

The interferon (IFN)-γ response to peptides can be a useful diagnostic marker of Mycobacterium tuberculosis (MTB) latent infection. We identified promiscuous and potentially protective CD4+ T-cell epitopes from the most conserved regions of MTB antigenic proteins by scanning the MTB antigenic proteins GroEL2, phosphate-binding protein 1 precursor and 19 kDa antigen with the TEPITOPE algorithm. Seven peptide sequences predicted to bind to multiple human leukocyte antigen (HLA)-DR molecules were synthesised and tested with IFN-γ enzyme-linked immunospot (ELISPOT) assays using peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) from 16 Mantoux tuberculin skin test (TST)-positive and 16 TST-negative healthy donors. Eighty-eight percent of TST-positive donors responded to at least one of the peptides, compared to 25% of TST-negative donors. Each individual peptide induced IFN-γ production by PBMCs from at least 31% of the TST-positive donors. The magnitude of the response against all peptides was 182 ± 230 x 106 IFN-γ spot forming cells (SFC) among TST-positive donors and 36 ± 62 x 106 SFC among TST-negative donors (p = 0.007). The response to GroEL2 (463-477) was only observed in the TST-positive group. This combination of novel MTB CD4 T-cell epitopes should be tested in a larger cohort of individuals with latent tuberculosis (TB) to evaluate its potential to diagnose latent TB and it may be included in ELISPOT-based IFN-γ assays to identify individuals with this condition.

Prevalence and risk factors for bacterial vaginosis and other vulvovaginitis in a population of sexually active adolescents from Salvador, Bahia, Brazil.

Bacterial vaginosis, trichomoniasis, and genital candidiasis are considered the main etiologies of vulvovaginitis. Few studies estimate the prevalence of vulvovaginitis among adolescents, especially in Brazil. This study aimed to determine the prevalence and main risk factors associated with bacterial vaginosis and genital infection by C. albicans and Trichomonas vaginalis among a group of adolescents from Salvador, Bahia, Brazil. One hundred sexually active adolescents followed at an adolescent gynecology clinic were included. Endocervical and vaginal samples were obtained during gynecological examination. Nugent criteria were applied for the diagnosis of bacterial vaginosis. For Candida albicans and Trichomonas vaginalis detection, culture in Sabouraud agar plates and Papanicolaou cytology were used, respectively. The mean age of participants was 16.6 ± 1.6 years. The prevalence of bacterial vaginosis was 20% (95% CI 12-28) and of genital infection by Candida was 22% (95% CI 14-30). Vaginal cytology detected Trichomonas vaginalis in one patient. Alcohol, tobacco, and illegal drug use (P = 0.02) and multiple lifetime partners were statistically related to bacterial vaginosis (P = 0.01). The prevalence of bacterial vaginosis and genital candidiasis was similar to other studies carried out among adolescents worldwide.

Mycobacterium tuberculosis epitope-specific interferon-g production in healthy Brazilians reactive and non-reactive to tuberculin skin test

The interferon (IFN)-γ response to peptides can be a useful diagnostic marker of Mycobacterium tuberculosis (MTB) latent infection. We identified promiscuous and potentially protective CD4+ T-cell epitopes from the most conserved regions of MTB antigenic proteins by scanning the MTB antigenic proteins GroEL2, phosphate-binding protein 1 precursor and 19 kDa antigen with the TEPITOPE algorithm. Seven peptide sequences predicted to bind to multiple human leukocyte antigen (HLA)-DR molecules were synthesised and tested with IFN-γ enzyme-linked immunospot (ELISPOT) assays using peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) from 16 Mantoux tuberculin skin test (TST)-positive and 16 TST-negative healthy donors. Eighty-eight percent of TST-positive donors responded to at least one of the peptides, compared to 25% of TST-negative donors. Each individual peptide induced IFN-γ production by PBMCs from at least 31% of the TST-positive donors. The magnitude of the response against all peptides was 182 ± 230 x 106 IFN-γ spot forming cells (SFC) among TST-positive donors and 36 ± 62 x 106 SFC among TST-negative donors (p = 0.007). The response to GroEL2 (463-477) was only observed in the TST-positive group. This combination of novel MTB CD4 T-cell epitopes should be tested in a larger cohort of individuals with latent tuberculosis (TB) to evaluate its potential to diagnose latent TB and it may be included in ELISPOT-based IFN-γ assays to identify individuals with this condition.

Evidence of a higher prevalence of HPV infection in HTLV-1-infected women: a cross-sectional study.

Introdução: A infecção pelo HTLV-1 aumenta a susceptibilidade para outras infecções. Poucos estudos avaliaram a co-infecção entre HPV/HTLV-1 e a resposta imune envolvida nesta interação. O objetivo deste trabalho é determinar a prevalência de infecção cervical pelo HPV em mulheres infectadas pelo HTLV-1 e estabelecer os fatores de risco envolvidos nesta co-infecção. Métodos: Um estudo de corte transversal foi conduzido em Salvador, Brasil, entre setembro de 2005 e dezembro de 2008, envolvendo 50 mulheres infectadas pelo HTLV-1, acompanhadas no Centro de Referência de HTLV e 40 mulheres não infectadas, acompanhadas no Serviço de Ginecologia, ambos na Escola Bahiana de Medicina. A infecção pelo HPV foi confirmada pela Captura Híbrida. A carga proviral do HTLV-1 foi quantificada pelo PCR em tempo real. Resultados: A média de idade das mulheres infectadas pelo HTLV-1 (38±10 anos) foi semelhante ao do grupo controle (36±13 anos). A prevalência de infecção pelo HPV foi 44% nas mulheres infectadas pelo HTLV-1 e de 22,5% no grupo controle (p=0,03). Mulheres infectadas pelo HTLV-1 informaram menor idade de início de vida sexual (17±3 anos versus 19±3 anos; p=0,03) e maior número de parceiros sexuais, em relação ao grupo controle (4±3 versus 2±1; p<0,01). No grupo de mulheres infectadas pelo HTLV-1, não se observou diferença entre a carga proviral do HTLV-1 entre as mulheres infectadas pelo HPV e as não infectadas. Conclusões: A prevalência de infecção pelo HPV foi maior em mulheres infectadas pelo HTLV-1. Novos estudos devem ser realizados para avaliar a progressão desta co-infecção.

Disruption of the splenic histological architecture associated with severe forms of visceral leishmaniasis / Desestruturação histoarquitetural do baço e susceptibilidade a formas graves da leishmaniose visceral

Formas graves de leishmaniose visceral estão associadas com atrofia e desorganização dos compartimentos do baço em seres humanos e em cães. Métodos: Nesse artigo nós revimos as alterações observadas nos baços de cães de uma área endémica de leishmaniose visceral. Resultados: Cães com marcadores de susceptibilidade a leishmaniose visceral apresentam mais frequentemente desorganização do tecido esplénico (x2-test, P<0.01) afetando mais intensamente a zona marginal e folículos linfoides a bainha periarteriolar de linfócitos. O número total de linfócitos T (Whitney, P < 0.05), linfócitos B (Whitney, P < 0.01) e células dendríticas S 100+(Whitney, P < 0.01) nos folículos e de células B na zona marginal (Whitney, P < 0.01 ) dos animais com a arquitetura do baço desorganizada for menor que nos animais com a histologia do baço normal. Essa desorganização arquitetural do baço está associada com menor expressão de LTα e CXCL13 que a observada em baços normais. Há maior frequência de infecções bacterianas de pele em animais com culturas esplénicas positivas para Leishmania (47%) que em animais com culturas negativas (21%). Conclusão: A desorganização arquitetural do tecido esplénico em cães é associada à expressão inadequada de citocinas envolvidas na estruturação dos folículos e da zona marginal do baço. Essas alterações do baço, presentes no curso da leishmaniose visceral pode prejudicar com a cooperação entre leucócitos na defesa contra a infecção por Leishmania e por outros patógenos.

Imunossupressão em indivíduos infectados pelo HTLV: possíveis mecanismos imunológicos

O vírus linfotrópico de células T humanas do tipo 1 (HTLV-I) é o agente etiológico da leucemia/linfoma de células T do adulto (ATL) e da paraparesia espástica tropical/mielopatia associada ao HTLV (HAM/TSP), e está associado a diversas patologias inflamatórias como uveítes, artrites, polimiosites. Além disso, uma maior morbidade e mortalidade de doenças infecciosas, como estrongiloidíase disseminada e tuberculose, é observada em indivíduos co-infectados, sugerindo um grau de imunossupressão. Uma das características imunológicas da infecção pelo HTLV é a proliferação espontânea, in vitro, das células mononucleares do sangue periférico (PBMC), além de elevada produção de citocinas inflamatórias como IFN-γ, TNF-α de IL-10 e IL-2 e maior expressão de moléculas de ativação em linfócitos T. Nesta revisão serão discutidos o papel da ativação celular e da proliferação espontânea sobre a resposta celular contra antígenos de memória.

Vulvovaginites em mulheres infectadas pelo vírus da imunodeficiência humana

Objetivo: comparar a freqüência de vulvovaginites em mulheres infectadas pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV) com mulheres não infectadas. Métodos: estudo de corte transversal com 64 mulheres infectadas pelo HIV e 76 não infectadas. Foram calculadas as freqüências de vaginose bacteriana, candidíase e tricomoníase, que foram diagnosticadas por critérios de Amsel, cultura e exame a fresco, respectivamente. Para análise dos dados, utilizaram-se o teste do χ2, teste exato de Fisher e regressão múltipla para verificar a independência das associações. Resultados: a infecção vaginal foi mais prevalente em pacientes infectadas pelo HIV quando comparadas ao Grupo Controle (59,4 versus 28,9%, p<0,001; Odds Ratio=2,7, IC95%=1,33-5,83, p=0,007). Vaginose bacteriana ocorreu em 26,6% das mulheres HIV positivas; candidíase vaginal, em 29,7% e tricomoníase, em 12,5%. Todas foram significativamente mais freqüentes no grupo de mulheres infectadas pelo HIV (p=0,04, 0,02 e 0,04, respectivamente). Conclusões: vulvovaginites são mais freqüentes em mulheres infectadas pelo HIV.

Estudo da ativação e da resposta aos antígenos de memória em indivíduos infectados pelo HTLV-1

O vírus linfotrópico de células T humanas do tipo 1 (HTL V -I) tem tropismo para os linfócitos T, infectando preferencialmente linfócitos T CD4+CD45RO+, embora outras células possam ser alvo da infecção. No Brasil, a prevalência em doadores de sangue foi estimada em 0,45 por cento, sendo Salvador o epicentro da infecção do HTL V-I no país, com prevalência de 1,35 por cento. Recentemente, um estudo de base populacional, realizado na em Salvador revelou uma prevalência de 2 por cento. O HTLV-I está classicamente associado a leucemia e linfoma de células T do adulto (A TLL), Paraparesia espástica tropical/mielopatia associada ao HTL V -1 (HAM/TSP) e uveite. Este vírus também está relacionado a outras doenças inflamatórias como artrite, dermatite infectiva, polimiosite, alveolite e Síndrome de Sjogren. A infecção pelo HTLV-I, induz uma ativação crônica do sistema imune e uma maior susceptibilidade a doenças infecciosas. Maior morbidade e mortalidade associada à tuberculose, hanseníase, estrongiloidíase grave e disseminada, e escabiose severa sugerem a existência de uma imunossupressão pelo HTL V -I. Células mononucleares do sangue periférico (PBMC) de cerca de 50 por cento dos indivíduos infectados, apresentam proliferação espontânea in vitro, uma das alterações imunológicas características da infecção por este vírus. Neste estudo, avaliamos a resposta imune celular aos antígenos de memória nos indivíduos infectados pelo HTLV-l apresentando ou não proliferação espontânea. Inicialmente quantificamos as populações de linfócitos T CD4 e CD8 e estudamos o repertório do TCR-V~ das subpopulações dos linfócitos T CD4+. Encontramos um aumento da proporção dos linfócitos T CD4+CD45RO+, nos individuos infectados com proliferação espontânea e uma menor frequência de resposta aos antígenos de memória, mesmo nos indivíduos cujos PBMC não proliferavam espontaneamente. Além disso, indivíduos com proliferação espontânea apresentaram expansão policlonal dos linfócitos T CD4+. Em seguida, investigamos o perfil de ativação e a freqüência de células produtoras de lFN-y. A expressão de CD25, CD69 e HLA-DR, bem como a proporção de células produtoras de lFN-y foi maior nos linfócitos T CD4+ dos indivíduos infectados pelo HTL V-I. Por fim, investigamos o potencial inibitório de compostos quinolínicos na proliferação espontânea de linfócitos T, de indivíduos infectados pelo HTL V-L Identificamos seis compostos (XF907, XF731, SF103, MHM22, MDS 14 and SF47) com capacidade para inibir, in vitro, a proliferação espontânea de PBMC. Novos estudos para avaliar o mecanismo de inibição destas drogas devem ser realizados. A descoberta de novos fármacos é importante para o tratamento desta infecção. Nossos resultados indicam que o HTL V -I induz uma imunossupressão caracterizada pela redução na frequência de respostas positivas aos antígenos de mcmória. mesmo entre os indivíduos que não apresentam proliferação espontânea, sugerindo que possa ocorrer uma imunossupressão. A ativação celular e frequências elevadas de células produtoras de IFN-y podem contribuir para esta anergia.

Estudo da ativação e da resposta aos antígenos de memória em indivíduos infectados pelo HTLV-1 / Study of the activation and the reply to antigens of memory in individuals infected for the HTLV-1

(...)vírus linfotrópico de células T humanas do tipo 1(HTLV-1)tem tropismo para os linfócitos T,infectando preferencialmente linfócitos T CD4+CD45RO+,embora outras células possam ser alvo da infecção.No Brasil,a prevalência em doadores de sangue foi estimada em 0,45por cento,sendo Salvador o epicentro da infecção do HTLV-1 no país,com prevalência de 1,35por cento.Recentemente,um estudo de base populacional,realizado em Salvador revelou uma prevalência de 2por cento.O HTLV-1 está classicamente associado a leucemia e linfoma de células T do adulto (ATLL),Paraparesia espástica tropical/mielopatia associada ao HTLV-1(HAM/TSP)e uveite.Este vírus também está relacionado a outras doenças inflamatórias como artrite,dermatite infectiva,polimiosite,alveolite e Síndrome de Sjõgren.A infecção pelo HTLV-1,induz uma ativação crônica do sistema imune e uma maior susceptibilidade a doenças infecciosas.Maior morbidade e mortalidade associada à tuberculose,hanseníase, estrongiloidíase grave e disseminada,e escabiose severa sugerem a existência de uma imunossupressão pelo HTLV-1. Células...Neste estudo...CD4+CD45RO+,nos indivíduos infectados com proliferação espontânea e uma menor frequência de resposta aos antígenos de memória, mesmo nos indivíduos cujos PBMC não proliferavam espontaneamente.Além disso,indivíduos com proliferação espontânea apresentaram expansão policlonal dos linfócitos T CD4+.Em seguida,investigamos o perfil de ativação e a freqüência de células produtoras de IFN-γ.A expressão de CD25,CD69 e HLA-DR,bem como a proporção de células produtoras de IFN-γ foi maior nos linfócitos T CD4+ dos indivíduos infectados pelo HTLV-1.Por fim,investigamos o potencial inibitório de compostos quinolínicos na proliferação espontânea de linfócitos T, de indivíduos infectados pelo HTLV-1.Identificamos 6 compostos(XF907,XF731,SF103,MHM22,MDS14 and SF47)com capacidade para inibir,in vitro,a proliferação espontânea de PBMC.Novos estudos para avaliar o mecanismo de inibição...